維拉帕米對(duì)肝星狀細(xì)胞增殖的抑制作用

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1、瀘州醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)2010年第33卷第1期JournalofLuzhouMedicalCortegeVo1.33No.1201015贛維拉帕米對(duì)肝星狀細(xì)胞增殖的抑制作用任美萍,李萬平,李蓉,劉明華,肖順漢,李茂(瀘州醫(yī)學(xué)院藥學(xué)院:藥理毒理研究室;藥理學(xué)教研室,四川瀘州646000)摘要目的:觀察維拉帕米對(duì)體外培養(yǎng)的人肝星狀細(xì)胞(hepaticstellateceHs,HSCs)增殖的影響。方法:用不同濃度的維拉帕米對(duì)HSCs進(jìn)行處理,CCK一8試劑盒(CellCountingKit一8)檢測(cè)細(xì)胞增殖抑制率,HE染色觀察細(xì)胞形態(tài)超微結(jié)構(gòu)的變化。結(jié)

2、果:維拉帕米可抑制HSCs的增殖,且有劑量相關(guān)性,其Ic值為0.15+0.01p~mol/ml;HE染色可見維拉帕米組出現(xiàn)不同程度的細(xì)胞體積變小、核濃縮深染等凋亡形態(tài)改變。結(jié)論:維拉帕米可抑制HSCs的活化增殖,誘導(dǎo)其凋亡。關(guān)鍵詞維拉帕米;肝星狀細(xì)胞;肝硬化中圖分類號(hào)R961.5文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼A文章編號(hào)1000-2669(2010)1—0015—03THEEFFECToFVERAPAMILoNPRoLⅡERATIoNoFHEPATICSTELLATECELLSRenMeiping,etalLaboratoryofPharmacologyandT

3、oxicology,LuzhouMedico]CoAbstract0bjective:ToobservetheeffectofVerapamilonproliferationofhumanHSCs.Methods:HSCswereincubatedwithdifferentconcentrationofVerapamil,cellproliferationwasassessedbyCellCountingKit一8,morphologicchangewasdetectedbyHEstaining.Results:Verapamilcanin

4、hibittheproliferationofHSCsinadose—dependentmanner,theIC50valuewas0.15~0.011xmol/ml,HEstainingshowedvariouschangesofcellapop-tosissuchasshrinking,pyknosisandhyperchromaticchange,andSOon.Conclusion:VerapamilcaninhibittheproliferationofHSCsandinducetheirapoptosis.KeywordsVer

5、apamil;Hepaticstellatecells;Hepatocirrhosis肝纖維化(hepaticfibrosis,HF)是多種原因所致1材料與儀器的肝損傷向肝硬化發(fā)展過程中的病理過程和必經(jīng)階段,現(xiàn)已知HF是一個(gè)可逆性的病變,而肝硬化是不1.1藥品與試劑可逆的ll1。因此,抑制肝纖維化的發(fā)展或逆轉(zhuǎn)肝纖維鹽酸維拉帕米片:天津市中央藥業(yè)有限公司,批化,對(duì)慢性肝炎、肝硬化的治療具有重大意義。肝星號(hào):090101;DMEM/HIGHGLUCOSE:賽默飛世爾生狀細(xì)胞(HSCs)的活化增殖及凋亡減少在肝纖維化物化學(xué)制品(北京)有限公司,批

6、號(hào):NUB0146;胰蛋過程中起關(guān)鍵作用閉,抑制HSCs的活化增殖和誘導(dǎo)白酶:美國(guó)Sigma公司;胎牛血清:天津?yàn)笊镏破涞蛲鍪欠乐胃卫w維化、肝硬化的重要策略之一。研品科技責(zé)任有限公司;CCK-8(CellCountingKit-8)試究發(fā)現(xiàn)維拉帕米有保護(hù)大鼠肝細(xì)胞、抑制肝纖維化劑盒:碧云天生物技術(shù)研究所;4%多聚甲醛固定液:形成、降低肝硬化程度的作用,但目前尚未見維拉帕博士德生物工程有限公司,批號(hào):20070308;蘇木精米對(duì)體外培養(yǎng)的HSCs作用的相關(guān)報(bào)道。本研究以染液、伊紅染液、二甲苯由瀘州醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院病理體外培養(yǎng)的肝星狀細(xì)胞為研

7、究對(duì)象,采用CCK一8試科實(shí)驗(yàn)室提供。劑盒檢測(cè)維拉帕米對(duì)肝星狀細(xì)胞增殖的抑制作用。1_2細(xì)胞株肝星狀細(xì)胞株HSCs引自瀘州醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院基金項(xiàng)目:四川省衛(wèi)生廳科學(xué)研究項(xiàng)目(No2006437)傳染與免疫實(shí)驗(yàn)室,采用含10%胎牛血清的DMEM作者簡(jiǎn)介:任美萍(1978一),女,助教,碩士生pH7.2~7.4的完全培養(yǎng)基,在37℃、5%C02條件下常瀘州醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)2010年第33卷第l期16JournalofLuzhouMedicalCoUegeVo1.33No.12010規(guī)培養(yǎng)。計(jì)算半數(shù)抑制濃度(IC卯)。13儀器2.4HE染色觀察細(xì)胞形態(tài)變

8、化酶標(biāo)分析儀:北京普朗新技術(shù)有限公司,型號(hào):取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的HSCs,0.25%胰酶制成單細(xì)胞DNM-9602;倒置相差顯微鏡:13本Olympus公司,型懸液,細(xì)胞濃度為lxl0

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