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《曲霉菌胞壁及胞外多糖分離和純化》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、0萬方數(shù)據(jù)福建醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文目錄英文縮略詞表………………………………………………………………………1中文摘要……………………………………………………………………………2英文摘要……………………………………………………………………………4一、引言……………………………………………………………………………6二、材料和方法……………………………………………………………………10三、結(jié)果……………………………………………………………………………22四、討論……………………………………………………………………………30五、總結(jié)……………………………………………………
2、………………………37參考文獻(xiàn)……………………………………………………………………………38綜述…………………………………………………………………………………41致謝…………………………………………………………………………………521萬方數(shù)據(jù)英文縮略詞表（ABBREVIATIONS）縮寫英文全稱中文全稱BCABicinchoninicacid二喹啉酸C/OCut-off臨界值EPEpoxyepoxide環(huán)氧樹脂EDTAethylenediaminotetraceticacid乙二胺四乙酸FDAFoodanddrugadministration美國食品與藥物管理局
3、GMgalactomannan半乳甘露聚糖Hhour小時(shí)HighperformancegelpermeationHPGPC高效凝膠色譜法chromatographyIAInvasiveaspergillosis侵襲性曲霉病Mminute分鐘ODopticaldensity光密度TrisTris（hydroxymethyl）aminomethane2-氨基-2羥甲基-1,3-丙二醇TLCThinlayerchromatography薄層色譜法1萬方數(shù)據(jù)福建醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文曲霉菌胞內(nèi)及胞外多糖的分離純化研究摘要【目的】半乳甘露聚糖(galactomannan,簡
4、稱GM)存在于曲霉菌胞壁，且在曲霉菌生長過程中會(huì)釋放至外液。GM已作為診斷侵襲性曲霉菌感染的標(biāo)志物，而現(xiàn)有的檢測方法存在諸多局限性，本研究目的從煙曲霉菌中提取純度高、分子量均一的GM，為進(jìn)一步建立基于GM檢測的侵襲性曲霉菌感染診斷新技術(shù)奠定基礎(chǔ)?！痉椒ā?.選取溫度為A因素、通氣量為B因素、接種量為C因素，各取3個(gè)水平，以菌體生成量和胞外多糖產(chǎn)量為指標(biāo)進(jìn)行正交實(shí)驗(yàn)，通過分析選取最優(yōu)培養(yǎng)條件。2.收集煙曲霉發(fā)酵液，通過濃縮、醇沉、抽濾、透析、凍干等步驟得到粗多糖，再將粗多糖行去蛋白、過柱等純化步驟處理，得到多糖P1；采用堿裂解菌絲體，經(jīng)過離心、濃縮、透析、凍干等步
5、驟得到粗多糖，經(jīng)conAsepharose4B親和層析填料純化，加入葡聚糖酶，得到多糖P2。3.采用TOSOHTSKgel3000PWxl柱子，分析多糖的純度；高效凝膠色譜法測定標(biāo)準(zhǔn)品右旋糖酐分子量，并制成標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算出待測多糖分子量。4.用三氟乙酸催化多糖水解成單糖，采用硅膠薄層層析法初步分析多糖的單糖組分；繼而用三甲基硅咪唑和醋酸酐將單糖衍生化，使之成為易揮發(fā)、對(duì)熱穩(wěn)定的衍生物，采用氣相色譜法進(jìn)一步分析單糖的種類和比例。【結(jié)果】1.通過正交試驗(yàn)分析，培養(yǎng)溫度28℃、通氣量150ml，接種量為5%時(shí)，曲霉菌的生長狀態(tài)最好，得到的胞外多糖量和菌絲體量分別為初始
6、條件的1.151倍和1.273倍。2.經(jīng)過一系列純化步驟，得到1.58g的胞外多糖P1，純度達(dá)94.7%；162.7mg胞內(nèi)多糖P2，純度為96.0%；高效凝膠色譜法分析，胞外多糖分子量均一，分子量在21kd左右，而胞內(nèi)多糖的分子量不均一。2萬方數(shù)據(jù)福建醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文3.硅膠薄層色譜法初步分析，P1、P2多糖的單糖組分均為半乳糖和甘露糖。通過氣相色譜分析，P1的半乳糖與甘露糖的比例為1:1.18?！窘Y(jié)論】本實(shí)驗(yàn)成功地從煙曲霉菌的胞外發(fā)酵液中分離到純度高、分子量均一的半乳甘露聚糖，分子量和單糖組成與文獻(xiàn)報(bào)道一致，基本符合適配子篩選的要求，可以用于本科題組研制
7、新的檢測方法。而胞壁的多糖分子量不均一，結(jié)構(gòu)較復(fù)雜，有待于進(jìn)一步深入研究?！娟P(guān)鍵詞】曲霉菌；多糖；半乳甘露聚糖；純化；高效凝膠色譜法；薄層層析法；氣相色譜3萬方數(shù)據(jù)福建醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文TheExtractionandPurificationoftheCellWallandExtracellularPolysaccharidesofAspergillusAbstract[Objective]Galactomananisanimportantcompositionamongthecellwallofaspergillusanditcanbereleasedtot
8、heextracellu
