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《季也蒙假絲酵母（Candida guilliermind）胞外多糖的分離純化及活性研究.pdf》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學術(shù)論文-天天文庫。
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5、專，■；ｙ■＾１＾？■摘要摘要多糖是構(gòu)成生命有機體的重要基礎物質(zhì)，對調(diào)節(jié)細胞的各種生命活動起著重要作用。多糖具有廣泛的藥理學活性，對人體健康有很大的促進作用。海洋微生物處于低溫、高鹽、高壓、寡營養(yǎng)的特殊環(huán)境，具有產(chǎn)生結(jié)構(gòu)新穎、功能獨特的新型活性多糖的潛力，因此從海洋微生物尋找新型活性多糖已成為開發(fā)新資源的重要策略之一。本研究對一株源于海參腸道的季也蒙假絲酵母(Candidaguilliermind)產(chǎn)胞外多糖進行分離純化，并對其產(chǎn)率、理化性質(zhì)、單糖組成及活性進行研究。首先酵母發(fā)酵液的上清液經(jīng)乙醇沉淀、Sevag試劑除蛋白
6、等方法得到黃褐色絮狀胞外粗多糖（EPS），其產(chǎn)率為0.137g/L。分別采用苯酚-硫酸法和考馬斯亮藍法對EPS的純度及蛋白含量進行測定，結(jié)果表明EPS的純度為48.78%，蛋白含量為1.45%。采用氣相色譜法分析其單糖組成，結(jié)果表明EPS是由木糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖組成，其摩爾比為1.00：41.60：7.17：3.21。再分別采用Fenton反應，鄰苯三酚自氧化法和普魯士藍法對EPS的體外抗氧化活性進行測定，結(jié)果表明EPS能夠有效的清除羥基和超氧陰離子自由基，并具有一定的還原力。體內(nèi)免疫及抗氧化活性實驗是通過向海參體內(nèi)注射EPS溶液
7、，檢測其對海參體腔液中堿性磷酸酶（AKP）、溶菌酶（LSZ）、超氧化物歧化酶（SOD）、過氧化氫酶（CAT）的活性及丙二醛（MDA）含量的影響。結(jié)果表明EPS能夠不同程度地增強海參體腔液中AKP、LSZ、SOD、CAT活性，并顯著減少MDA含量。胞外多糖EPS具有較高的生物活性，因此對其做進一步的純化和分析。首先經(jīng)Sepharose強陰離子交換層析初步純化后，分別得到3個組分EPS1、EPS2和EPS3，并對3個組分的體外抗氧化活性進行比較。進一步采用Sephacryal凝膠過濾層析法，對抗氧化活性較高的EPS2組分再純化，得到1個單一組
8、分EPS2-1，采用氣相色譜法分析其單糖組成，并驗證其抗氧化活性。結(jié)果表明：EPS2-1是由木糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖按摩爾比1.00：35.98：1.22：1.68的比例組成的；它具有較強
