煙草香氣突變體鑒定及揮發(fā)性香氣成分分析

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1、密級(jí):論文編號(hào):中囯農(nóng)業(yè)科學(xué)院學(xué)位論文煙草香氣突變體鑒定及揮發(fā)性香氣成分分析IdentificationofFragrantMutantsofNicotianatabacumandAnalysisofVolatileFragrantComponents碩士研究生:焦禹順指導(dǎo)教師:王元英研究員申請(qǐng)學(xué)位類別:農(nóng)學(xué)碩士專業(yè):作物遺傳育種研究方向:作物遺傳育種理論與方法培養(yǎng)單位:中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院煙草研究所中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院研究生院2015年5月Secrecy:No.ChineseAcademyofAgriculturalScience

2、sDissertationIdentificationofFragrantMutantsofNicotianatabacumandAnalysisofVolatileFragrantComponentsM.S.Candidate:JiaoYushunSupervisor:Prof.WangYuanyingMajor:CropGeneticsandBreedingSpecialty:TheTheoryandMethodofCropGeneticsandBreedingMay2015獨(dú)創(chuàng)性聲明本人聲明所呈交的論文是我個(gè)人在導(dǎo)

3、師指導(dǎo)下進(jìn)行的研宂工作及取得的研究成果。盡我所知,除了文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外,論文中不包含其他人己經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研宄成果,也不包含為獲得中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院或其它教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位或證書而使用過的材料。與我一同工作的同志對(duì)本研究所做的任何貢獻(xiàn)均己在論文中作了明確的說明并表示了謝意。研究生簽名:技知H時(shí)間:年r月21曰關(guān)于論文使用授權(quán)的聲明本人完全了解中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定,即:中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院有權(quán)保留送交論文的復(fù)印件和磁盤,允許論文被查閱和借閱,可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存、匯編學(xué)位論文。同意

4、中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院可以用不同方式在不同媒體上發(fā)表、傳播學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容a研宂生簽名:時(shí)間:zwt年t月2之曰中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院碩士學(xué)位論文評(píng)鬩人、答辯委員會(huì)簽名表論文題目難1?.宅宮?豐鑒受及釋廷忮香毛成令令祈作物遺傳育作物遺傳育種論文作者焦禹順專業(yè)研究方向-----------------種理論與方法指導(dǎo)教師王元英培養(yǎng)單位(研究所)煙草研究所碩(博)姓名職稱單位專業(yè)簽名導(dǎo)師評(píng)閱人碩導(dǎo)口博導(dǎo)口碩導(dǎo)口I答辯主席博導(dǎo)口碩導(dǎo)口劉家堯教授青島農(nóng)業(yè)大學(xué)分子生物學(xué)博導(dǎo)si碩導(dǎo)口中國(guó)科學(xué)院青島生物周功克研宂員分子生物學(xué)博導(dǎo)5/能源與過

5、程研究所碩導(dǎo)口隋正紅教授中國(guó)海洋大學(xué)分子生物學(xué)博導(dǎo)0答碩導(dǎo)3郭立忠教授青島農(nóng)業(yè)大學(xué)微生物學(xué)博導(dǎo)口辯碩導(dǎo)口中國(guó)科學(xué)院青島生物付春樣研宂員分子生物學(xué)傅導(dǎo)吖能源與過程研究所委碩導(dǎo)a中國(guó)水產(chǎn)科學(xué)研究院張慶利研宂員海洋生物學(xué)博導(dǎo)口黃海水產(chǎn)研究所員國(guó)碩導(dǎo)口山東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院花單世華研宂員遺傳育種博導(dǎo)gf生研宂所專1碩導(dǎo)口博導(dǎo)口會(huì)議記錄(秘書)文柳滯論文答辯時(shí)間地點(diǎn)OQIS年SI^OQ背二會(huì)認(rèn)直摘要煙草是世界上重要的經(jīng)濟(jì)作物,而香氣是煙葉品質(zhì)最重要的決定因素之一。本研究對(duì)通過甲基磺酸乙酯(EMS)誘變中煙100并篩選鑒定獲得的5個(gè)香氣突

6、變體fgr1-fgr5進(jìn)行了鑒定。分別在光學(xué)顯微鏡下觀察并統(tǒng)計(jì)突變體的腺毛密度;使用PEN3型便攜式電子鼻系統(tǒng)對(duì)新鮮煙葉和烤后煙葉揮發(fā)性香氣成分進(jìn)行檢測(cè),并對(duì)電子鼻響應(yīng)值進(jìn)行主成分分析和聚類分析;以兩個(gè)香型突出的突變體與中煙100構(gòu)建了抑制性差減文庫(kù),并從中挑選香氣代謝相關(guān)基因;對(duì)香氣合成相關(guān)基因進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR,研究它們的表達(dá)情況。得到以下主要結(jié)果:(1)分別取旺長(zhǎng)期、現(xiàn)蕾期、盛花期、成熟前期、成熟后期的突變體的全展葉,在光學(xué)顯微鏡下觀察并統(tǒng)計(jì)腺毛密度。與中煙100相比,這5個(gè)突變體表現(xiàn)出不同的成熟性狀和很高的腺

7、毛密度,這兩個(gè)性狀都與煙草香氣有關(guān),其中腺毛密度最高的是突變體fgr3和fgr4。(2)分別對(duì)香氣突變體的新鮮煙葉和烤后煙葉的揮發(fā)性香氣成分進(jìn)行電子鼻檢測(cè),通過比較新鮮煙葉和烤后煙葉的電子鼻響應(yīng)情況發(fā)現(xiàn),煙葉在成熟和烘烤過程中發(fā)生了明顯的化學(xué)成分變化;從電子鼻雷達(dá)響應(yīng)圖上可以看出,電子鼻對(duì)不同突變體的新鮮煙葉的揮發(fā)性成分具有不同的響應(yīng)值和響應(yīng)模式,每個(gè)材料都有特異的指紋圖譜;主成分分析和聚類分析發(fā)現(xiàn),可以將突變體分為2種類型:“晾曬煙類型”和“烤煙類型”。(3)分別取“晾曬煙類型”突變體fgr3和“烤煙類型”突變體fgr

8、4的盛花期樣品,分別與中煙100構(gòu)建正反向差減文庫(kù),從這4個(gè)差減文庫(kù)中隨機(jī)挑取1536個(gè)陽(yáng)性克隆進(jìn)行測(cè)序,得到1017個(gè)高質(zhì)量ESTs,并組裝成202個(gè)unigenes。經(jīng)過功能注釋和GO分析,從這些unigenes中篩選到12個(gè)與煙草香氣代謝相關(guān)的基因。(4)以5個(gè)生長(zhǎng)時(shí)期的突變體fgr3、fgr4和中煙100的葉

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