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《Hp通過Akt信號(hào)通路誘導(dǎo)胃粘膜細(xì)胞發(fā)生上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化EMT的研究》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、學(xué)位論文獨(dú)創(chuàng)性聲明本人聲明所呈交的學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。據(jù)我所知，除了文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包含為獲得直昌太堂或其他教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位或證書而使用過的材料。與我一同工作的同志對(duì)本研究所做的任何貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說明并表示謝意。學(xué)位論文作者簽名(手寫)：叫囊使手簽字日期：地1弓年學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書㈧日本學(xué)位論文作者完全了解南昌大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，有權(quán)保留并向國家有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交論文的
2、復(fù)印件和磁盤，允許論文被查閱和借閱。本人授權(quán)南昌大學(xué)可以將學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進(jìn)行檢索，可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存、匯編本學(xué)位論文。同時(shí)授權(quán)中國科學(xué)技術(shù)信息研究所和中國學(xué)術(shù)期刊(光盤版)電子雜志社將本學(xué)位論文收錄到《中國學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫》和《中國優(yōu)秀博碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫》中全文發(fā)表，并通過網(wǎng)絡(luò)向社會(huì)公眾提供信息服務(wù)。(保密的學(xué)位論文在解密后適用本授權(quán)書)學(xué)位論文作者簽名(手寫)：載蔡砍≥導(dǎo)師簽名(手寫)：乞j叩簽字日期：≯1許k月7日簽字日期：川弓年16月夕摘要研
3、究背景：胃癌是全球第四大最常見的惡性腫瘤，也是我國第二大常見，是癌癥相關(guān)死亡的主要疾病因素【I】。盡管近年來在胃癌的預(yù)防、早期診斷和治療：療面取得了長足的進(jìn)展，全球胃癌的發(fā)病率和死亡率均有所降低，但在我國胃癌的發(fā)病率和死亡率仍居高不下，每年約有17萬人死于胃癌，占所有癌癥死亡人數(shù)的1／5。目前普遍認(rèn)為，Hp是慢性胃炎的病原菌，在消化性潰瘍的發(fā)生和復(fù)發(fā)中可能起重要作用[2】。1994年世界衛(wèi)生組織／國際癌癥研究機(jī)構(gòu)(WHO／IARC)將幽門螺桿菌定為I類致癌原[3，41。EMT是指在胚胎發(fā)育、腫瘤轉(zhuǎn)移
4、或組織纖維化過程中發(fā)生的上皮細(xì)胞脫黏附而轉(zhuǎn)變成具遷移能力的問質(zhì)細(xì)胞的現(xiàn)象，在細(xì)胞凋亡與增值、遷移與粘附中發(fā)揮重要作用。研究證實(shí)，Hp可通過激活胃癌卜皮細(xì)胞P13K／Akt信號(hào)通路誘導(dǎo)EMT，促進(jìn)胃癌的侵襲和轉(zhuǎn)移。但Hp感染正常胃粘膜細(xì)胞是否誘發(fā)EMT國內(nèi)外未見明確報(bào)道。因此，探討Hp感染正常胃粘膜是否通過P13K／Akt信號(hào)通路誘導(dǎo)胃粘膜發(fā)生EMT，從而導(dǎo)致增值、凋亡紊亂參與疾病發(fā)生，可進(jìn)一步闡明Hp的致病機(jī)制，為Hp感染相關(guān)性疾病防治策略的制定提供新的理論和依據(jù)。研究方法：1、收集Hp陽性和陰性的
5、慢性非萎縮性胃炎、腸上皮化生、異型增生和胃癌病理標(biāo)本(每組分別為39例、40例、39例和47例，其中再分為H口陽性和陰性，共165例)，行免疫組化檢測(cè)Akt、p-Akt、GSK．3D、P．GSK．3B、E．cadherin和N．cadherin蛋白的表達(dá)。2、ATCC43504Hp標(biāo)準(zhǔn)菌株以MOI=50作用GES．1，同時(shí)以同體積細(xì)胞培養(yǎng)液作用的GES—l作為對(duì)照組，0、0．5、1、3、6和12h后，行Westernblot檢測(cè)Akt—GSK．3B．EMT信號(hào)通路相關(guān)蛋白的表達(dá)。3、Akt抑制劑Ak
6、tInhibitorVIII109M預(yù)處理GES．11h，同時(shí)以同體積DMSO作用和未預(yù)處理的GES．1作為對(duì)照組，再以ATCC43504Hp標(biāo)準(zhǔn)菌株MOI=50作用lh，行Westernblot檢測(cè)Akt．GSK．3p．EMT信號(hào)通路相關(guān)蛋白的表達(dá)。4、采用四唑藍(lán)(MTT)EL色試驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞存活率。研究結(jié)果：摘要(p<0．05)。N—cadherin蛋白表達(dá)在慢性非萎縮性胃炎、腸上皮化生和異型增生階段Hp陽性和陰性組間亦無顯著性差異(礦O．05)，而在胃癌階段Hp陽性組N．cadherin蛋白表達(dá)
7、顯著高于Hp陰性組(p<0．05)。2、Hp活菌對(duì)胃黏膜上皮細(xì)胞株Akt．GSK一3B．EMT信號(hào)通路的影響Hp活菌以MOI=50作用GES．1不同時(shí)間后，Akt、GSK3[3表達(dá)水平均無明顯變化(p>O．05)，而p-Akt表達(dá)水平在作用后0．5h即升高，3h達(dá)到高峰，12h內(nèi)均高于Oh(p<0．001)：p-GSK3p表達(dá)水平在作用后0．5h即增加，后逐漸升高，12h達(dá)到高峰(p<0．01)；E．Cadherin表達(dá)水平在作用后O．5h即減少，后逐漸降低，6h達(dá)到低谷，12h內(nèi)均低于Oh(p<0
8、．05)；N—Cadherin表達(dá)水平在作用后0．5h即增加，后逐漸升高，3h達(dá)到高峰，12h內(nèi)均高于0h(矽<0．001)。而對(duì)照組Akt、P—Akt、GSK．3p、p—GSK．3p、E—Cadherin、N．Cadherin蛋白表達(dá)水平均無明顯變化(礦0．05)3、Akt在Hp活菌激活胃黏膜上皮細(xì)胞株Akt．GSK．3p—EMT信號(hào)通路中的作用(1)AktInhibitorVIII以101xM預(yù)處理GES．11h后，P—Akt(口<0．001)、P-GSK．3p(
