香菇菌絲發(fā)酵及胞內(nèi)多糖提取條件的優(yōu)化

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1、<<<食品工程·技術CEREALSANDOILSPROCESSING香菇菌絲發(fā)酵及胞內(nèi)多糖提取條件的優(yōu)化11,21111尹艷麗曹健王衛(wèi)國黃亮田青羅宇(1.河南工業(yè)大學生物工程學院2.中原工學院)【摘要】通過搖瓶培養(yǎng)研究香菇菌絲液體發(fā)酵的最適培養(yǎng)條件,通過正交試驗探討香菇菌絲胞內(nèi)多糖的最佳提取條件和方法。結果表明:最適發(fā)酵培養(yǎng)時間為7d,pH值6.5,乳糖2%,硫酸亞鐵0.2%,大豆蛋白胨0.6%,所得菌絲體為94.0g/L(濕重);熱水浸提法的最佳條件為:料液比為1∶10,浸提時間4h,浸提溫度90℃,多糖含量最高為10.3%;超聲波法的最佳提取條件為:超聲功率400W,處理時間

2、50min,料液比1∶15,多糖含量最高為12.5%。通過對比,確定超聲波法為香菇菌絲多糖的最佳提取方法?!娟P鍵詞】香菇;胞內(nèi)多糖;發(fā)酵;提取中圖分類號:TS244.5文獻標識碼:A文章編號:1673-7199(2009)12-0167-04香菇是藥食兩用菌類,作為食用菌,由于其營養(yǎng)心機,上海菲怡爾分析儀器有限公司;SW-CJ-2F型雙成分豐富,歷來受到人們的喜愛;作為藥物,其中所人雙面凈化工作臺,蘇州凈化設備有限公司;JY92P-含的香菇多糖是其主要的活性成分。1969年,日本科Ⅱ超聲波細胞粉碎機,寧波新芝生物科技有限公司。學家Chihara等人在Nature雜志上首次發(fā)表了從

3、香菇子1.2方法實體中提取并分離出香菇多糖,研究其在老鼠體內(nèi)具1.2.1香菇液體發(fā)酵培養(yǎng)有抑制肉瘤180活性。此后香菇多糖等食用菌、動植將活化的香菇斜面菌絲塊接入液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)物多糖就引起了各國科學家的興趣,各國學者競相從7d,再以10%的接種量接入發(fā)酵培養(yǎng)基中,搖床轉(zhuǎn)速各種生物材料中尋找和提取具有生理活性的多糖物質(zhì)。為150r/min,溫度為28℃,培養(yǎng)7d得發(fā)酵液。本文對香菇液態(tài)深層發(fā)酵進行研究,以期短時間內(nèi)生1.2.2生物量的測定產(chǎn)大量菌絲體,然后對菌絲體內(nèi)多糖的提取進行系統(tǒng)以4層紗布過濾發(fā)酵液,稱菌絲體濕重。研究,獲得一種簡單可行的提取工藝。1.2.3香菇多糖的提取將發(fā)

4、酵液過濾所得菌絲體于65℃左右干燥箱中烘1材料與方法干,用以下方法提取多糖:1.1材料(1)熱水浸提法:稱取4g香菇菌絲干粉,加入10(1)菌種。香菇(Lentinanedodes),由河南農(nóng)友生倍體積(w/v)的蒸餾水,于90℃水浴中恒溫3h,物科技有限公司提供。4000r/min離心10min,收集上清液,沉淀再重復浸提(2)培養(yǎng)基。斜面培養(yǎng)基(g/L):土豆200,蔗糖2次,合并3次的上清液,濃縮,醇析,Sevag法除蛋20,瓊脂20;液體培養(yǎng)基(g/L):土豆200,蔗糖20;白,過濾,定容至50mL測多糖含量。發(fā)酵培養(yǎng)基(g/L):土豆200,蔗糖20,大豆蛋白胨(2)

5、超聲波法:稱取4g香菇菌絲干粉,加入10倍5,MgSO42,pH值自然。體積(w/v)的蒸餾水,超聲功率為400W,用超聲波(3)試驗儀器。HZQ-Q全溫震蕩器,中國(哈爾處理40min,離心得上清液,濃縮,醇析,Sevag法除濱)東聯(lián)電子技術開發(fā)有限公司;TDL-5A臺式高速離蛋白,過濾,定容至50mL測多糖含量。糧油加工2009年第12期167技術·食品工程>>>CEREALSANDOILSPROCESSING1.2.4多糖含量測定物量最高,可見在所選的幾種碳源中,可溶性淀粉是多糖=總糖-還原糖,測定總糖采用苯酚-硫酸法,最佳碳源,所得菌絲體質(zhì)量為71.6g/L,其次是乳糖和

6、測定還原糖采用3,5-二硝基水楊酸法。葡萄糖,最差是蔗糖,所得菌絲體質(zhì)量僅為32.0g/L。但在發(fā)酵過程中可溶性淀粉一部分被香菇利用,另一2結果與討論部分被水解為其他糖類,這樣會影響多糖的測定結果,2.1菌絲培養(yǎng)條件的確定綜合考慮采用乳糖作為最佳碳源較為合適。2.1.1最適培養(yǎng)時間2.1.4最適培養(yǎng)氮源圖1培養(yǎng)時間對菌絲體生長的影響圖4不同氮源對菌絲體生長的影響菌體的生長經(jīng)過延緩期、對數(shù)期、穩(wěn)定期和衰亡以乳糖為碳源,選擇尿素、硫酸銨、酵母膏和大期4個階段,由圖1可知:前2d為延緩期,3~6d為對豆蛋白胨為香菇發(fā)酵培養(yǎng)基的氮源,其他發(fā)酵條件不數(shù)期,6~8d為穩(wěn)定期,從9d開始進入衰

7、亡期。香菇真變。由圖4可知:以大豆蛋白胨為氮源的培養(yǎng)基中香菌培養(yǎng)7d時生物量最高可達45.0g/L。菇生物量最高,可達82.3g/L,其次是酵母膏和尿素,2.1.2最適培養(yǎng)pH值最差的是硫酸銨,生物量僅有23.5g/L。2.1.5無機鹽對菌株產(chǎn)多糖的影響圖2起始pH值對菌絲體生長的影響圖5不同無機鹽對菌絲體生長的影響由圖2可知:菌株生長受培養(yǎng)基起始pH值的影響較為顯著,菌株在中性偏酸性條件下生長較好,弱堿無機鹽可為微生物提供除碳、氮源以外的各種重性條件下生物量急劇下降。香菇真菌在

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