資源描述：
《淋病奈瑟菌外膜蛋白與粘膜佐劑的融合表達》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫。
1、·269·第10卷 第4期中 華 男 科 學Vol.10No.42004年4月NationalJournalofAndrologyApr.2004·論著·淋病奈瑟菌外膜蛋白與粘膜佐劑的融合表達潘 靜,毛旭虎,張衛(wèi)軍,魯東水,羅 萍,王 寧(第三軍醫(yī)大學醫(yī)學檢驗系,重慶400038)摘要: 目的:在大腸埃希菌(E.coli)中表達淋病奈瑟菌外膜蛋白與粘膜免疫佐劑的融合蛋白?！》椒?PCR擴增淋病奈瑟菌保守抗原表位porinloopⅥ～Ⅷ(PL678)基因,并與不耐熱腸毒素B亞單位(LTB)融合,轉化E.coli,ELISA、SDS2PA
2、GE及Western印跡分析其表達?！〗Y果:融合蛋白獲得表達,具有結合GM1神經(jīng)節(jié)苷酯的能力和與抗淋病奈瑟菌多克隆抗體的反應性?！〗Y論:融合蛋白的表達為研究淋病奈瑟菌分子內(nèi)佐劑疫苗奠定了基礎。關鍵詞:淋病奈瑟菌;不耐熱腸毒素B亞單位;融合表達+中圖分類號:R339.21 文獻標識碼:A 文章編號:100923591(2004)0420269204FusionExpressionofNeisseriagonorrhoeaeOutmembraneProteinwithaMucosalAdjuvantPanJing,MaoXuhu,Zh
3、angWeijun,LuDongshui,LuoPing,WangNingCollegeofMedicalLaboratory,ThirdMilitaryMedicalUniversity,Chongqing400038,China(PanJ,MaoXH,ZhangWJ,LuDS,LuoP,WangN)Correspondenceto:MaoXuhu,E2mail:clinimmu@mail.tmmu.com.cnAbstract:Objective:ToexpressafusionproteinofNeisseriagonorrho
4、eaewithamucosaladjuvant.Methods:ThegenecodingLoopⅥ2Ⅷ(PL678)ofporin,anout2membraneproteinofNeisseriagonorrhoeae,wasobtainedbyPCR.ItwasinsertedintoaplasmidfusedwithsubunitBofheatlabileenterotoxin.TherecombinantwastransformatedinE.coli.Theexpressionoffusionproteinwasanalys
5、edbyELISA,SDS2PAGEandWestern2blot.Result:FusionproteinwithLTBwassuccessfullyexpressed,anddisplayedboththeabilityofbindingGM1andthereactogenicitywithpolyclonalantibodiesagainstNeisseriagonorrhoeae.Conclusion:Theexpressionoffusionproteinlaidafoundationforthestudyoftheintr
6、amolecularvaccineagainstNeisseriagonorrhoeae.NatlJAndrol,2004,10(4):2692271,274Keywords:Neisseriagonorrhoeae;subunitBofheatlabileenterotoxin;fusionexpression 淋病奈瑟菌(Neisseriagonorrhoeae,Ng)是淋病的優(yōu)勢/顯性,為研制和開發(fā)淋病分子內(nèi)佐劑基因工程致病菌,疫苗對于預防控制淋病的流行傳播具有十疫苗奠定基礎。1分重要的意義。本研究擬應用分子設計的理論和基因重
7、組技術通過分析Ng具有保護作用的抗原表1 材料與方法位porinloopⅥ～Ⅷ(PL678)的分子結構,克隆其基因,1.1 材料E.coliDH5α、JM109菌株為本室保存菌并與強力、無毒的粘膜免疫佐劑不耐熱腸毒素B亞種,LTB羧基末端融合表達載體pLV2.0由本室構單位(subunitBofheatlabileenterotoxin,LTB)按適當空間結構在大腸埃希菌(E.coli)中融合表達呈免疫建。各種限制性內(nèi)切酶、TaqDNA聚合酶、T4DNA收稿日期:2003202219;修回日期:2003212210基金項目:重慶市應用
8、基礎研究課題(200026321)作者簡介:潘 靜(19682),重慶市人,實驗師,碩士研究生,從事臨床檢驗專業(yè)。通信作者:毛旭虎,E2mail:clinimmu@mail.tmmu.com.cn·270·中 華 男 科
