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《不同采血部位及放置時(shí)間對(duì)樣品檢測(cè)高敏C反應(yīng)蛋白的影響》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在教育資源-天天文庫(kù)。
1、C反應(yīng)蛋白(CRP)是一種肝臟分泌的急性時(shí)相反應(yīng)蛋白,生理狀態(tài)下含量甚微,在急性感染、創(chuàng)傷、組織壞死時(shí)其血液中濃度急性升高。高敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)是使用了具備更高靈敏度的檢測(cè)方法所獲得的結(jié)果。眾多研究表明,CRP輕度增高與動(dòng)脈粥樣硬化、腦卒中和周?chē)懿∠嚓P(guān),是獨(dú)立的危險(xiǎn)因子[1]。hs-CRP在冠心病、中風(fēng)、周?chē)芩ㄈ燃膊☆A(yù)測(cè)中發(fā)揮重要作用,對(duì)于心血管疾病危險(xiǎn)性評(píng)估具有重要意義。目前,臨床上常選用即時(shí)檢驗(yàn)(POCT)設(shè)備來(lái)檢測(cè)hs-CRP,通常以新鮮手指末梢血作為樣品。對(duì)于大中型醫(yī)
2、院來(lái)說(shuō),一般都有大型全自動(dòng)生化分析儀,采集靜脈血后直接上機(jī)檢測(cè)hs-CRP;然而對(duì)于沒(méi)有大型全自動(dòng)儀器的基層小型醫(yī)院,一些檢測(cè)項(xiàng)目只能由小型POCT設(shè)備完成。然而關(guān)于靜脈抗凝血直接用于POCT設(shè)備檢測(cè)hs-CRP,與末梢血之間是否有差異的報(bào)道較少。因此,我們?cè)u(píng)估了末梢血與靜脈抗凝血的差異程度以及樣品存放時(shí)間對(duì)檢測(cè)結(jié)果的影響。材料和方法一、對(duì)象收集2012年4月至7月門(mén)診患者84例,其中男36例,女48例,年齡14~85歲。用含有EDTA-K2抗凝劑的真空管采集患者靜脈血2mL,同時(shí)采集該批患者的
3、手指末梢血20μL加入含有800μLCRP樣品處理液的樣品管中。二、儀器與試劑采用國(guó)賽特定蛋白分析儀(散射比濁法),原裝hs-CRP測(cè)定試劑。三、測(cè)定方法將采集的84例抗凝靜脈血充分混勻,根據(jù)試劑盒使用說(shuō)明書(shū)要求取20μL全血加入800μLCRP樣品處理液中,待紅細(xì)胞完全溶解(10s)后混勻,吸取40μL加入比色杯中按操作規(guī)程進(jìn)行檢測(cè),其余抗凝血放入4℃冰箱保存(所有樣品均加蓋),分別于24h、7d再取出檢測(cè)。將84例已加入CRP樣品處理液的手指末梢血樣品吸取40μL加入比色杯中,按操作規(guī)程進(jìn)行
4、檢測(cè),即刻檢測(cè)完后剩余樣品后放入4℃冰箱保存(所有樣品均加蓋),分別于24h、7d再取出檢測(cè)。取一患者靜脈血及末梢血樣品各連續(xù)檢測(cè)11次計(jì)算其精密度。以hs-CRP參考區(qū)間(≤5.0mg/L)為依據(jù)將患者分為≤5.0mg/L及>5.0mg/L2組。四、統(tǒng)計(jì)學(xué)方法使用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。hs-CRP呈偏態(tài)分布,采用中位數(shù)(范圍)表示。靜脈抗凝血即刻檢測(cè)值與其余檢測(cè)值的差異性分析采用wilcoxon秩和檢驗(yàn),相關(guān)性分析采用Spearman相關(guān)分析。P<0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
5、結(jié)果一、靜脈抗凝血樣品精密度為2.33%;末梢血樣品精密度為2.30%。二、靜脈抗凝血樣品hs-CRP即刻檢測(cè)值與末梢血即刻檢測(cè)值比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),其他各時(shí)間段檢測(cè)值與靜脈抗凝血即刻檢測(cè)值比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見(jiàn)表1。三、以靜脈抗凝血樣品hs-CRP即刻檢測(cè)值為參比,末梢血樣品即刻檢測(cè)值與其比較偏差最小(P>0.05),相關(guān)性最好;而4℃放置24h后靜脈抗凝血及末梢血樣品相對(duì)偏差均增大,放置7d時(shí)偏差明顯增大(P<0.05),相關(guān)性均明顯下降。四、樣品放置4
6、℃24h后有69%的靜脈抗凝血樣品、68%的末梢血樣品測(cè)定值開(kāi)始下降;放置7d時(shí)測(cè)定值下降的樣品數(shù)分別為72%和75%,與即刻測(cè)定值比較偏移最大可達(dá)44%。但也有部分樣品放置24h或7d后測(cè)得的hs-CRP值高于即刻測(cè)定值,最高的1例靜脈抗凝血樣品存放7d后增高81%。討論目前常用于測(cè)定CRP的方法有酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)、散射比濁法和透射比濁法[2]。本研究采用POCT設(shè)備檢測(cè)hs-CRP,結(jié)果顯示靜脈抗凝血與末梢血樣品的精密度無(wú)明顯差異。表1、表2顯示采血后即刻檢測(cè)兩者的相對(duì)偏差小,
7、相關(guān)性好,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。臨床檢驗(yàn)中可根據(jù)實(shí)際情況選用其中一種樣品進(jìn)行檢測(cè)。而實(shí)際工作中無(wú)論采用靜脈抗凝血或手指末梢血,在血液的預(yù)處理階段均需手工加樣,因此應(yīng)盡量避免人為因素造成的誤差,如微量毛細(xì)血管吸樣要準(zhǔn)確;手指末梢采血時(shí)避免用力擠壓,血液自然流出后拭去第一滴血再采樣;靜脈抗凝血進(jìn)行預(yù)處理時(shí)應(yīng)將血液充分混勻后吸樣,并且血液預(yù)處理時(shí)應(yīng)待血液完全溶血后再檢測(cè),若溶血不完全會(huì)出現(xiàn)與乳糜血相同的情況,即儀器顯示空白過(guò)高無(wú)法檢測(cè)。完整的CRP是一種環(huán)形結(jié)構(gòu)的五聚體,這種特征性的結(jié)構(gòu)使
8、其歸類(lèi)于五聚素家族,循環(huán)中CRP半衰期為19h[2]。本研究將末梢血樣品和靜脈抗凝血樣品分別放置4℃保存,于24h、7d取出檢測(cè)的值與靜脈抗凝血即刻檢測(cè)的hs-CRP值比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),且相對(duì)偏差增大。2種樣品放置4℃24h后多數(shù)樣品hs-CRP值開(kāi)始下降,放置至7d時(shí)偏移最大可達(dá)44%,但也有部分樣品放置24h或7d后測(cè)得的hs-CRP值高于即刻值,最高1例靜脈抗凝血樣品存放7d后增高81%。眾所周知,散射比濁法是檢測(cè)可溶性抗原抗體復(fù)合物在液相中形成的濁度從而測(cè)定抗原的含
