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1、第四章消毒與滅菌1采用多種物理、化學(xué)或生物學(xué)的方法來抑制或殺死微生物的方法。物理消毒滅菌法化學(xué)消毒滅菌法2消毒(disinfection)殺滅物體上病原微生物的方法,并不一定能殺死細(xì)菌芽胞。滅菌(sterilization)殺滅物體上所有微生物的方法,包括細(xì)菌芽胞在內(nèi)的全部病原微生物和非病原微生物。抑菌(bacteriostasis)抑制體內(nèi)或體外細(xì)菌的繁殖。防腐(antisepsis)防止或抑制體外細(xì)菌生長繁殖的方法。無菌(asepsis)不存在活的微生物。無菌技術(shù)是指在進(jìn)行外科手術(shù)或分離、轉(zhuǎn)種及培養(yǎng)微生物時防止其他微生物污染實驗材料的操作方法。基本概念:3第一節(jié)
2、物理消毒滅菌法熱力滅菌法輻射滅菌法濾過除菌法超聲波滅菌法干燥與低溫抑菌法4一、熱力滅菌法原理高溫使菌體蛋白質(zhì)、核酸、酶等凝固或變性失活。方法濕熱滅菌干熱滅菌51.干熱滅菌法一般細(xì)菌繁殖體在干燥狀態(tài)下80~100℃1h,芽胞160~170℃2h死亡。焚燒燒灼干烤紅外線6電熱干烤箱7巴氏消毒法:63℃30minor72℃15~30sec,用于牛奶、酒類的消毒。煮沸法:100℃5~10min,用于消毒食具、刀剪、注射器等。流動蒸氣消毒法:100℃蒸汽15~30min,芽胞不能全部殺滅。間歇蒸氣滅菌法:100℃蒸汽15~30min,37℃過夜,再100℃蒸汽15~30min
3、,如此連續(xù)三次以上。適于不耐高熱的含糖、牛奶等培養(yǎng)基。高壓蒸氣滅菌法:103.4kPa蒸汽壓,121.3℃15~20min,適于普通培養(yǎng)基、生理鹽水、手術(shù)敷料等耐高溫、耐濕熱物品的滅菌。2.濕熱滅菌法8手提式高壓蒸汽滅菌器立式高壓蒸汽滅菌器9立式智能高壓蒸汽滅菌器10干熱滅菌與濕熱滅菌穿透力的比較加熱方式傳導(dǎo)介質(zhì)溫度(℃)加熱時間(h)透過布層溫度(℃)結(jié)果20層40層100層干熱空氣130~1404867270以下滅菌不完全濕熱飽和蒸汽105.3310110l10l滅菌完全11二、輻射殺菌法(一)紫外線:波長265~266nm殺菌原理:主要作用于細(xì)菌DNA,使
4、相鄰兩個胸腺嘧啶共價結(jié)合形成二聚體,從而干擾DNA復(fù)制和轉(zhuǎn)錄,導(dǎo)致細(xì)菌變異和死亡。用途與缺陷:穿透力弱,只能用于手術(shù)室、傳染病房、細(xì)菌實驗室的空氣消毒和不耐熱的物品表面消毒。12(二)電離輻射:包括x射線和γ射線,有較高的能量與穿透力。用于食品、一次性醫(yī)用塑料制品的消毒。(三)微波:可穿透玻璃、塑料薄膜和陶瓷等介質(zhì),但不能穿透金屬。常用于非金屬器械消毒,實驗室用品、食品餐具、藥杯等消毒。13三、過濾除菌法是用物理阻留的方法除去液體和氣體的微生物。主要適合于不耐高溫的血清、抗生素、抗毒素、藥液以及空氣除菌。不能去除病毒、支原體、衣原體等。14濾菌器杯式過濾器圓筒式過濾
5、器1516四、超聲波殺菌法目前主要用于粉碎細(xì)胞,以提取細(xì)胞組分或制備抗原等。17五、干燥與低溫抑菌法干燥法常用于保存食物。低溫可使細(xì)菌的新陳代謝減慢,故常用作保存細(xì)菌菌種,冷凍真空干燥法是目前保存菌種的最好方法。18第二節(jié)化學(xué)消毒滅菌法19一、消毒劑的主要種類根據(jù)殺滅微生物作用的能力高效消毒劑:戊二醛、甲醛中效消毒劑:乙醇、碘伏低效消毒劑:新潔爾滅、洗必泰20根據(jù)殺菌機制促進(jìn)菌體蛋白質(zhì)變性或凝固酚類(高濃度)、醇類等干擾細(xì)菌的酶系統(tǒng)和代謝某些氧化劑、重金屬鹽類等損傷細(xì)菌細(xì)胞膜酚類(低濃度)、表面活性劑等21根據(jù)化學(xué)結(jié)構(gòu)與性質(zhì)酚類--石炭酸(苯酚)、來蘇(甲酚皂)、洗
6、必泰(氯已定)等醇類--70%~75%乙醇?xì)⒕ψ顝娭亟饘冫}類--紅汞等氧化劑--過氧化氫、過氧乙酸等表面活性劑--增加菌細(xì)胞表面張力,并增加其通透性使細(xì)菌破裂,如新潔爾滅(苯扎溴銨)等烷化劑--甲醛等,殺菌力強,但毒性大22二、消毒劑的應(yīng)用231.患者排泄物與分泌物糞、尿、膿、痰等,多用等量的20%漂白粉、5%石炭酸或2%來蘇兒攪拌均勻,作用2h再傾去。廁所、陰溝的消毒多采用生石灰。242.皮膚(手)外科手術(shù)常采用0.1%新潔而滅、0.01%洗必泰泡手。傳染科醫(yī)護(hù)人員手的消毒常用0.2%-0.4%過氧乙酸浸泡,可以殺滅乙肝病毒。注射或手術(shù)部位局部消毒用2.5%碘酒
7、、70%酒精。皮膚淺表創(chuàng)傷可用2%紅汞。253.粘膜預(yù)防新生兒淋球菌性眼結(jié)膜炎:1%硝酸銀滴眼口腔粘膜消毒:3%過氧化氫沖洗尿道、陰道、膀胱:0.1%高錳酸鉀或0.01%洗必泰等。264.水煮沸法自來水用氯氣消毒漂白粉275.空氣常用甲醛加熱或甲醛混合高錳酸鉀熏蒸:甲醛40ml加高錳酸鉀30g/m3,熏蒸12~24h。居室空氣消毒可用5-10ml醋酸/m3加等量水加熱蒸發(fā)。肝炎病房可用3g/m3過氧乙酸熏蒸90min。286.食具的消毒煮沸15-30min0.5%~1%漂白粉或過氧乙酸液浸泡30~60min。7.蔬菜、瓜果采用0.1%高錳酸鉀浸泡15min。29