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1、小花玄參中總皂苷的定性定量分析摘要：采用化學試劑法和分光光度法對小花玄參（ｓｃｒｏｐｈｕｌａｒｉａｓｏｕｌｉｅｉｆｒａｎｃｈ．）中總皂苷成分進行定性、定量分析。以菝葜皂苷元為對照品，于３１１ｎｍ處比色測定，測得小花玄參中總皂苷含量為１１．０５ｍｇ／ｇ，平均回收率為９７．５％，ｒｓｄ為１．５９％（ｎ＝６），該測定方法簡便、準確，穩(wěn)定性、重現(xiàn)性好。關鍵詞：小花玄參（ｓｃｒｏｐｈｕｌａｒｉａｓｏｕｌｉｅｉｆｒａｎｃｈ．）；總皂苷；定性分析；定量分析ａｂｓｔｒａｃｔ：ｑｕａｌｉｔａｔｉｖｅａｎｄｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅａｎａｌｙｓｉｓｏｆｔｏｔａｌｓａｐｏｎｉｎｓ
2、ｉｎｓｃｒｏｐｈｕｌａｒｉａｓｏｕｌｉｅｉｆｒａｎｃｈ.wasconductedｂｙｍｅａｎｓｏｆｃｈｅｍｉｃａｌａｎａｌｙｓｉｓａｎｄｓｐｅｃｔｒｏｐｈｏｔｏｍｅｔｒｙ.accordingtoa311nmofsampletestedusingｓａｒｓａｓａｐｏｇｅｎｉｎａｓｒｅｆｅｒｅｎｃｅｓｕｂｓｔａｎｃｅ．ｔｈｅｃｏｎｔｅｎｔｏｆｔｏｔａｌｓａｐｏｎｉｎｓｗａｓ１１．０５ｍｇ／ｇｉｎｓｃｒｏｐｈｕｌａｒｉａｓｏｕｌｉｅｉｆｒａｎｃｈ..tｈｅａｖｅｒａｇｅｒｅｃｏｖｅｒｙｒａｔｅｗａｓ９７．５％；ａｎｄｒｓｄｗａｓ１．５９％（ｎ＝６）．ｔｈｅｍｅｔｈ
3、ｏｄｓｗｅｒｅｓｉｍｐｌｅａｎｄａｃｃｕｒａｔｅ，ｗｉｔｈｅｘｃｅｌｌｅｎｔｓｔａｂｉｌｉｔｙａｎｄｒｅｐｒｏｄｕｃｉｂｉｌｉｔｙ．ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ｓｃｒｏｐｈｕｌａｒｉａｓｏｕｌｉｅｉｆｒａｎｃｈ；ｔｏｔａｌｓａｐｏｎｉｎｓ；ｑｕａｌｉｔａｔｉｖｅａｎａｌｙｓｉｓ；ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅａｎａｌｙｓｉｓ小花玄參（ｓｃｒｏｐｈｕｌａｒｉａｓｏｕｌｉｅｉｆｒａｎｃｈ．）屬玄參科（ｓｃｒｏｐｈｕｌａｒｉａｃｅａｅ）玄參屬細弱小草本，為我國特有種，產(chǎn)于四川西部、青海東部和甘肅東南部。玄參科植物中含有皂苷類成分，主要為甾體皂苷，由此推測小花玄參中含有甾體皂苷。
4、皂苷具有多種藥理學功能，如抗炎、抗腫瘤等［１］。因此，有必要對小花玄參中的皂苷進行研究。本研究通過化學試劑法和分光光度法對小花玄參中總皂苷成分［３］進行定性［２］和定量測定，為總皂苷的快速定性定量分析提供參考。１材料與方法１．１材料ｈｈ－４數(shù)顯恒溫水浴鍋（常州國華電器有限公司），ｒｅ５２８５ａ旋轉蒸發(fā)器（上海亞榮生華儀器廠），ｔｕ－１２２１型紫外分光光度計（北京普析通用有限公司），索氏提取裝置。對照品：菝葜皂苷元（中國藥品生物制品檢定所）；供試樣品：小花玄參莖葉（２０１１年７月采于青海省玉樹州代格村農(nóng)作物地，中科院西北高原生物研究所鑒定）；所用試劑均為分析
5、純。１．２方法１．２．１供試品溶液的制備稱?。埃担缧』ㄐ⑶o葉粉末（１００目），精確到０．０００１ｇ，置于索氏提取器中，加適量石油醚脫脂１ｈ，冷卻后，傾出石油醚提取液，殘渣蒸干后加入甲醇１００ｍｌ，提取至無色，回收減壓至干，加蒸餾水１０ｍｌ溶解，用飽和正丁醇萃取４次（１５、１０、１０和１０ｍｌ），合并正丁醇部分，減壓回收至干，加２０ｍｌ２ｍｏｌ／ｌhcl，水浴回流３ｈ后冷至室溫，用氯仿萃?。炒?，２０ｍｌ／次，合并氯仿提取液，蒸干，殘渣加甲醇溶解，轉至２５ｍｌ容量瓶中，定容，制得供試品溶液。１．２．２定性檢識①醋酐－濃硫酸（ｌｉｅｂｅｒｍａｎｎ－ｂｕｒｃｈ
6、ａｒｄ）檢測：取供試液２ｍｌ，沸水浴上蒸干，加入濃硫酸－醋酐（１∶２０，v/v）數(shù)滴，觀察顏色變化情況；②三氯醋酸檢測：將供試液滴在濾紙上，噴灑２５％（ｍ／ｖ）三氯醋酸－乙醇溶液，加熱并觀察６０℃和１００℃時顏色變化情況；③氯仿－濃硫酸（ｓａｌｋｏｗｓｋｉ）檢測：將供試液水浴蒸發(fā)所得樣品溶于氯仿后加入濃硫酸，觀察氯仿層和硫酸層顏色和熒光。１．２．３對照品溶液的制備稱取７．５ｍｇ菝葜皂苷元對照品以甲醇定容于２５ｍｌ容量瓶中，配制成０．３ｍｇ／ｍｌ的對照品溶液。１．２．４測定波長選擇分別精密吸取對照品溶液０．２ｍｌ、供試品溶液０．１ｍｌ置１０ｍｌ具塞試管中，揮
7、盡溶劑，加入５ｍｌ高氯酸，７０℃水?。保担恚椋?，冰水冷卻后，在２１０～４５０ｎｍ范圍內(nèi)掃描，取最大吸收波長為檢測波長。１．２．５標準曲線制備精密吸取不同體積的對照品溶液于１０ｍｌ具塞試管中，揮干后加入５ｍｌ高氯酸，于７０℃水?。保担恚椋?，冰水冷卻，最大吸收波長處測定吸光度，以濃度為橫坐標（ｃ），吸光度為縱坐標（ａ），繪制標準曲線。１．２．６精密度試驗取對照品溶液４．０ｍｌ，以甲醇調(diào)零，在最大吸收波長處測定吸光度，重復測定６次。１．２．７穩(wěn)定性試驗取供試品溶液０．６ｍｌ，定容至１０ｍｌ，間隔１０ｍｉｎ測定吸光度，重復測定６次。１．２．８重復性試驗精密稱取５份
8、同一供試樣品，同上方法處理，測定吸光度。１．２．９加標回收試驗稱取
