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《cav-1對人臍靜脈內(nèi)皮細胞中mcp-1表達的影響》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫。
1、華中科技大學碩士學位論文OurresultsshowthatsilenceofCAV-1caninhibittheexpressionofMCP-1inducedbyox-LDLinendothelialcells.ItsuggeststhatCAV-1mayplayanimportantroleinthesignalingpathwayofox-LDL-inducedendothelialdysfunction.WewillfurtherinvestigatethattheroleofCAV-1int
2、heLOX-1mediatedsignaltransductionbymutant’sconstruction,FRETandothertechnologies.Keywords:AtherosclerosisOx-LDLCAV-1siRNAMCP-1HUVEC4華中科技大學碩士學位論文研究背景動脈粥樣硬化(atherosclerosis,AS)是多發(fā)性疾病,其病理改變以動脈內(nèi)脂質(zhì)沉積,粥樣斑塊形成及伴隨的炎癥反應為特征,造成血管部分或完全堵塞進而導致心、腦、腎等多器官缺血、梗死,給人類健康造成極大的危
3、害。在AS血管的管壁,單核細胞黏附于血管壁并穿入內(nèi)皮下形成泡沫細胞是動脈粥樣硬化的早期病變,而平滑肌細胞增生、遷移形成平滑肌源性泡沫細胞是該病較晚期病變。這兩種泡沫細胞的形成與單核細胞趨化蛋白-1(monocytechemoattractantprotein-1,MCP-1)密切相關(guān)。大量研究表明單核細胞的趨化主要由MCP-1來實現(xiàn),多種物質(zhì)及細胞因子都可以誘導MCP-1的表達,而MCP-1也可在多種細胞尤其是構(gòu)成動脈粥樣硬化病變的三種主要細胞——單核細胞、內(nèi)皮細胞和平滑[1]肌細胞中表達。大量的研究表
4、明,氧化低密度脂蛋白(oxidizedlowdensitylipoprotein,ox-LDL)[2]在AS的病理過程中起著重要的作用，如ox-LDL能夠刺激內(nèi)皮細胞多種炎性因子和黏附分子的表達，誘導單核細胞黏附和遷移進入動脈內(nèi)膜并轉(zhuǎn)化為巨噬細胞；加劇動脈粥樣硬化的炎癥反應等。Ox-LDL的受體家族成員中有多種清道夫受體:如A類清道夫受體、B類清道夫受體、CD36、CD68等。其中血凝素樣氧化低密[3]度脂蛋白受體-1是Sawanura等在1997年新發(fā)現(xiàn)的存在于血管內(nèi)皮細胞表面的ox-LDL特異性受體
5、,是血管內(nèi)皮細胞攝取和代謝ox-LDL的主要受體。研究發(fā)現(xiàn)血凝素樣氧化低密度脂蛋白受體(Lectin-likeoxidizedlowdensitylipoproteinreceptor-1,LOX-1)，在動脈粥樣硬化的早期，血管內(nèi)皮細胞表達LOX-1比進展期[4]更活躍，這與AS早期血管內(nèi)皮細胞大量表達MCP-1，從而促進單核細胞向內(nèi)皮細胞粘附、遷移的病理過程一致。有研究表明：當人冠狀動脈內(nèi)皮細胞與Ox-LDL共同培養(yǎng)24小時后明顯增加了MCP-1和LOX–1的表達以及單核細胞向內(nèi)皮細胞[5]的黏附；
6、但如果預先加入反義LOX–1mRNA則可抑制上述過程。這些研究結(jié)果提示在AS早期，LOX-1與ox-LDL結(jié)合后,可能對激活內(nèi)皮細胞并誘導內(nèi)皮細胞分泌MCP-1起著重要的作用。[6]而有研究顯示，LOX-1為Ⅱ型跨膜蛋白受體，在靜息狀態(tài)下以單體形式存在，5華中科技大學碩士學位論文[7]結(jié)構(gòu)分析顯示LOX-1胞內(nèi)段無SH2域，且不與G蛋白偶聯(lián)，但由LOX-1介導激活[8·9]的信號途徑主要為酪氨酸蛋白激酶途徑及G蛋白介導的PKC信號途徑，因此LOX-1如何活化、如何介導信號的跨膜轉(zhuǎn)導、進而激活哪些信號途徑
7、均有待進一步研究。細胞質(zhì)膜小凹（caveolae）是細胞膜上的一種特殊的囊泡狀凹陷結(jié)構(gòu)，其已知的功能主要包括胞飲、胞吐、調(diào)節(jié)細胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)導和維持細胞內(nèi)膽固醇平衡四個[10]方面。CAV-1幾乎存在于所有與AS形成有關(guān)的細胞類型中,包括內(nèi)皮細胞,巨噬細胞和平滑肌細胞,在AS形成中起著重要的作用。我們已知小凹蛋白-1（Caveolin-1，CAV-1）通過它的腳手架區(qū)(CaveolinScaffoldingdomain,CSD)來結(jié)合并影響信號分子,受Caveolin-1調(diào)節(jié)的信號分子都有一個Caveoli
8、n結(jié)合區(qū)域(Caveolin-bindingdomains,CBD),CSD與所調(diào)節(jié)蛋白的CBD直接作用抑制信號分子的活性。Caveolin-1是信號分子的支架蛋白和負性調(diào)節(jié)蛋白。CAV-1的“腳手架”區(qū)域突變分析:此區(qū)域有5個關(guān)鍵的殘基部位與它抑制信號分子的活性相關(guān):Phe89、Phe92、Thr93、Trp98、Phe99。近年來研究表明:CAV-1主要和G2蛋白α亞基的無活性的GDP合酶,CAV-1可抑制內(nèi)皮一氧化氮合酶、腺嘌呤環(huán)化酶
