膠體金快速診斷輪狀病毒的臨床應(yīng)用

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1、膠體金快速診斷輪狀病毒的臨床應(yīng)用膠體金快速診斷輪狀病毒的臨床應(yīng)用【摘?！磕康?簡述腹瀉患兒輪狀病毒的檢測意義。方法:用輪狀病毒的快速診斷試劑盒對234例1歲?3歲患兒的大便標(biāo)本，做免疫層析雙抗體夾心法試驗，檢驗輪狀病毒感染情況。結(jié)果125例小兒腹瀉患者中，輪狀病毒的檢出率為51.2%,109例小兒胃腸炎患者中輪狀病毒檢出率為46.8%,總陽性率為49.1%(115/234),皆于lOmin內(nèi)出結(jié)果。結(jié)果:陽性結(jié)果中未發(fā)現(xiàn)交叉反應(yīng)，與酶法檢測無顯著性差異，符合臨床診斷。結(jié)論:該快速診斷法具有操作簡便、快速、準(zhǔn)確、特異性強(qiáng)、陽性

2、率高等特點，可以向醫(yī)療單位門診推廣應(yīng)用，它為治療輪狀病毒致腹瀉、胃腸炎的患兒提供了及時準(zhǔn)確的客觀依據(jù)。?【關(guān)鍵詞】輪狀病毒;膠體金；胃腸炎;腹瀉?doi:10.3969/j.issn.1006-1959.2010.09.140文章編號:1006-1959(2010)-09-2424-02流行病學(xué)資料顯示輪狀病毒急性感染是造成嬰兒與兒童腹瀉性疾病的主要病因，每年因急性胃腸炎和腹瀉而入院的嬰兒與兒童病例屮，輪狀病毒感染率為50%?60%??［1,2］?。因此，輪狀病毒的檢測在嬰幼兒急性胃腸道疾病的診療中具有重要意義，輪狀病毒的快

3、速檢測為嬰幼兒胃腸道感染性疾病的診斷及時提供了準(zhǔn)確的客觀依據(jù)，使嬰幼兒輪狀病毒感染的早期治療成為現(xiàn)實，大大縮短了診斷時間，提高了臨床診治效率。筆者應(yīng)用了北京萬泰的A群輪狀病毒診斷試劑，采用免疫層析雙抗體夾心法，對筆者所在醫(yī)院就醫(yī)的有腹瀉或胃腸炎癥狀的患兒進(jìn)行輪狀病毒的快速診斷，現(xiàn)將結(jié)杲報告如下：?1.資料與方法?1.1資料:?1.1.1一般資料:本組234例患兒均為2009年1月?2010年1月期間因腹瀉癥狀來筆者所在醫(yī)院就診者,其中男126例,女108例,年齡1?3歲。?1.1.2輪狀病毒的快速診斷試劑盒:含10份測試卡,

4、鋁箔袋，干燥劑，說明書,滴管。測試卡主要成分有塑料卡，塑料底板，吸水濾紙，硝酸纖維素膜（包括包被有A群輪狀病毒抗體的檢測線和包被有抗鼠抗體的對照線）,金墊（附著有膠體金標(biāo)記A群輪狀病毒單克隆抗體）。滴管內(nèi)有樣品稀釋液。?1.1?3檢查標(biāo)本:患兒的大便標(biāo)本，收集患兒標(biāo)本吋是用一次性的帶蓋大便樣品杯盛裝，試驗中所需標(biāo)木量約lg左右。?1.2方法:按北京萬泰公司的輪狀病毒診斷試劑說明書的方法進(jìn)行。由于試劑盒是放2°C~30°C常溫保存，所以試劑盒取出即可用。旋開滴管取出采便勺，從糞便中收取一勺樣木（約100mg）,取樣后抹平勺面，

5、放入裝有樣品稀釋液的滴管中，旋緊滴管。振蕩混勻，折斷滴管上的蓋帽。將測試卡平放干燥平面上，垂直而緩慢地滴加2-3滴混勻后的樣本（約80ug）至測試卡加樣端中心。5-10分鐘內(nèi)判斷結(jié)果，結(jié)果判斷不可超過10分鐘。?1?3結(jié)果判定方法:測試卡出現(xiàn)兩條紅線為陽性，測試卡只出現(xiàn)一條對照線為陰性，測試卡不出現(xiàn)紅線，即無對照線出現(xiàn)，實驗無效，應(yīng)重復(fù)檢測。?2.結(jié)果?234例患兒，總陽性率為49.1%,其中輪狀病毒致小兒腹瀉的陽性檢出率為51.2%,致小兒胃腸炎的陽性率為46.8%,均于lOmin內(nèi)得出結(jié)果，陽性結(jié)果中無一例出現(xiàn)交叉凝集現(xiàn)

6、象，（見表1）。?表1234例1歲?3歲患兒輪狀病毒快速檢測結(jié)果?3?討論?可引起嬰幼兒急性胃腸炎和腹瀉的原因很多，其中輪狀病毒感染是引起嬰幼兒腹瀉的主要病原體之一。輪狀病毒主要感染患兒的小腸上皮細(xì)胞，從而造成細(xì)胞損傷，引起腹瀉??[3]?。流行病學(xué)資料顯示:輪狀病毒每年在夏秋冬季流行，感染途徑為糞-口途徑，臨床表現(xiàn)為急性胃腸炎，呈滲透性腹瀉病，病程一般為7d,發(fā)熱持續(xù)3d,嘔吐2?3d,腹瀉5d,嚴(yán)重出現(xiàn)脫水癥狀。?WHO已將輪狀病毒感染納入全球腹瀉病控制和免疫規(guī)劃。輪狀病毒在自然界中分布很廣，會感染多種動物，感染入的輪狀

7、病毒具有共同的族抗原。病毒在腸道絨毛細(xì)胞質(zhì)中增殖、破壞細(xì)胞，在脫落壞死的細(xì)胞中含有大量病毒隨糞便排出，因為絨毛細(xì)胞被破壞引起腹瀉，造成電解質(zhì)與水分的損失,而導(dǎo)致脫水、酸中毒和休克。?由于嬰幼兒免疫力普遍較低，身體代償能力不足，輪狀病毒感染導(dǎo)致的腹瀉可致嚴(yán)重的電解質(zhì)代謝紊亂,救治不及時可危及患兒生命安全。因此輪狀病毒的及時、準(zhǔn)確快速檢測，對臨床的治療具有重要意義??[4]?。臨床可用于輪狀病毒檢測的方法很多：電鏡、核酸電泳、免疫熒光、ELISA等，但是上述檢測方法或因診斷周期長,或因操作繁瑣、檢測成本高，很難滿足臨床診斷要求,

8、臨床應(yīng)用價值不高。膠體金快速診斷試驗檢測輪狀病毒是一種操作簡便、快速的診斷方法，糞便中輪狀病毒抗原陽性,可診斷為輪狀病毒性腹瀉或胃腸炎??⑸?。根據(jù)以上臨床應(yīng)用的結(jié)果來看，可知道:該法檢測結(jié)果準(zhǔn)確，從陽性結(jié)果完全符合臨床診斷和無一例交叉反應(yīng)可說明。該法檢測快速、操作簡便、不需設(shè)備，而且易學(xué)