骨髓染色檢查

《骨髓染色檢查》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在工程資料-天天文庫。

1、1?儀器OLYMPUS顯微鏡2.方法骨髓細胞學檢查應(yīng)抽取骨髓少量制成薄片。采用骨髓小粒豐富、制片厚薄均勻的涂片，經(jīng)瑞氏一姬姆薩混合染色后，于顯微鏡下檢查細胞質(zhì)和量的變化。3.試劑3.1.瑞氏染色液：瑞氏染粉18g,置潔凈干操的研缽內(nèi)，加甘油3.5ml,研濟片刻，使瑞氏染粉充分溶解，加卬醇50ml,繼續(xù)研磨片刻后，收集上層染液；殘余部分再加甲醇50ml研磨：再收集上層染液，重復兒次后，用甲醇沖洗研缽，倒入同一瓶內(nèi)，最后加甲醇至500mlo開始兒周應(yīng)經(jīng)常振搖染色液。染色液存放的吋間越長，染色效果也越佳。此外，研磨時染粉內(nèi)應(yīng)先加甘油，以免染

2、粉在研磨過程中結(jié)成塊，更易溶解。染粉未經(jīng)研磨配成的染液不宜用作骨髓片染色。%12.姬姆薩濃縮染液：將姬姆薩染粉3.8g放入純廿油250ml屮，置60°C水浴2小時，溶解后加60°C預熱的甲醇250ml混勻，于室溫、棕色瓶內(nèi)保存，配后數(shù)天即可使用，可長期保存。3.pH6.5磷酸鹽緩沖液：磷酸二氫鉀1.5g,磷酸氫二鈉1.0g.加蒸餡水到5000mlo最后糾正pH6?5。3.4.姬姆薩稀釋液：取姬姆薩濃縮溶液50ml,加pII6.5磷酸鹽緩沖液到500ml,混勻。此液為姬姆薩應(yīng)用液，可直接作涂片復染用。作瑞氏稀釋液時，取此液10一20mL

3、加蒸憎水至100ml,混勻即可。材料%11.消毒骨髓穿刺包：骨髓穿刺針（16號、14號）；10ml注射器（干燥）;7號針頭；紗布；孔l

4、J；橡皮手套；)2%碘酒、75%酒精、棉球；4.3.5ml:0.lg鹽酸利多卡因；4.4.推片、載玻片。5?操作（以骼后上棘為例）5.1.骨髓抽取:病人側(cè)臥，兩腿向胸部彎曲，腰紙部向后突出，在骼后上棘處做上記。在標記處用碘酒、酒精作螺旋狀由內(nèi)而外消毒，戴消毒手套將孔巾蓋于已消毒的局部，孔巾孔口對準穿刺部位。注射5ml:0.lg鹽酸利多卡因麻醉局部皮膚、皮卜?組織并至骨膜，按摩注射處至藥液擴散為止。5.

5、1.4.以左手姆指和食指將穿刺部位兩側(cè)皮膚壓緊同定，右手持穿刺針與背再面垂直，旋轉(zhuǎn)刺入骼后上棘，達骨髓腔吋有空松感。%11.5.取出針芯，接10ml干燥注射器抽取，至惰髓液出現(xiàn)即止。5.1.6.撥下注射器而復插入針芯，將骨髓液注在一玻片上供涂片用，再拔出穿刺針，壓迫傷口數(shù)分鐘使止血，敷以消毒紗布。)制片：用推玻片沾取少量（相當于5ul）骨髓液于栽玻片上以適當?shù)慕嵌龋?0-45度）用力均勻推制出厚薄均勻的涂片。%1注意事項3.1.骨髓取材：取材部位冇胸骨、棘突、骼骨前皤或后皤等。兩歲以內(nèi)小孩最好用脛骨，成人常取餡后上棘，此部位穿刺方便，

6、病人也易接受.穿刺前要求嚴格消毒，杜絕細菌感染，除穿刺室紫外線消毒和皮膚消毒外，述應(yīng)注意穿刺包和手套消毒時間有否過期。戴手套要熟練，避免手套接觸未消毒物品。穿刺針進入髓腔時常有脫空感，吸取前針筒內(nèi)應(yīng)留有l(wèi)ml左右的空隙，否則籠液很快進入針筒空隙而無法取出。針筒內(nèi)若有水份也要用消毒紗布擦干，以免溶解細胞。吸液量一般控制在0.2ml左右。因吸量過多，易被外周血稀釋。部分病人干抽或吸出量太少時，不要將針頭立即拔出，可邊抽邊調(diào)節(jié)針頭深淺，或邊抽邊緩慢外移針頭，最后將針頭內(nèi)叮能殘留的髓液盡量推出、制片，以減少病人痛苦。3.2.染色選兩塊小粒較多

7、、厚薄均勻的骨髓片，自然干燥后在較厚的頭端髓膜上寫上病人姓名、日期及“BM”標記。加瑞氏染色液8—12滴，用吸球吹吸并使其布滿整張涂片，約半分鐘后，加姬姆薩稀釋液5-10滴，再用吸球吹吸氣，使兩液充分混勻，若有金黃色油膜出現(xiàn)，染色效果更佳。染色吋間一般為10-20分鐘，夏天可縮短些、冬天則可延長些。沖洗時應(yīng)平放玻片讓流水緩慢沖洗。另外，因手拿玻片處可能會冇染料殘留，應(yīng)更換手拿位置再予沖洗。染色太淡的涂片，可用姬姆薩稀釋液復染3分鐘；著色太深時，可用瑞氏染液滴加于涂片上，立即沖洗即可。各實驗室最好能摸索出自己的染色經(jīng)驗，盡量做到一次性染

8、色成功。沒有姬姆薩染液的單位，可用蒸飾水加少量天青（或美藍）代替，但染色效果沒有前者好。染好的涂片要自然干燥，切忌加熱烘干，否則細胞退色而影4.分析要點%11.骨髓片觀察的內(nèi)容：1）?肉眼觀察涂片有無骨髓小粒、脂肪滴，制片、染色是否良好。2）?低倍鏡下觀察骨髓増生情況（主要分為5級），標本有否稀釋，并計數(shù)全片的巨核細胞，了解有無特殊異常細胞。3）?高倍鏡下觀察巨核細胞形態(tài)及巨核細胞分類計數(shù)（一般被分類的巨核細胞應(yīng)不少于25個）,并進一步觀察低倍鏡下看到的可疑細胞。4）?油鏡下明確在低、高倍鏡發(fā)現(xiàn)的異?；蚩梢杉毎男再|(zhì)，并作骨髓細胞分類

9、和全面的細胞形態(tài)分析。骨髓細胞分類計數(shù)的正常范圍較難制定。因為分析骨髓像是以骨髓細胞變化為基礎(chǔ)，并結(jié)合臨床表現(xiàn)和血像的綜合性分析，不能只以單一的比例作為是否止常的標準。另外，個體羌異、穿刺是否成功和分類部位等，都會影響細