血常規(guī)檢查及鏡檢ppt課件.ppt

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1、血常規(guī)檢查與鏡檢溫州醫(yī)學院附屬第二醫(yī)院李向陽今日議題血常規(guī)檢查的內(nèi)容血球分析儀的發(fā)展歷程鏡檢的意義血球分析儀存在的問題及解決方案血常規(guī)檢查的內(nèi)容血紅蛋白測定各種細胞計數(shù)及比例各種細胞的形態(tài)學變化血液中其它物質(zhì)和生物體各種細胞的形態(tài)學各種細胞的形態(tài)學各種細胞的形態(tài)學血球計數(shù)儀的發(fā)展史590年荷蘭人米德爾堡和詹森設(shè)計制造了最原始的顯微鏡1610年伽利略使用望遠鏡觀察小的物體并將其放大,后來被列文霍克改進成為原始的顯微鏡。1658年意大利人馬爾皮基應用最原始的顯微鏡首先觀察到了紅細胞,他是第一個見到紅細胞的人開始進行紅細胞計數(shù)則是200年后的事情了而設(shè)計并生產(chǎn)出第一臺

2、血細胞計數(shù)儀則又過了近100年。1852年就有人開始設(shè)計對紅細胞的計數(shù)辦法1855年發(fā)明了用于計數(shù)血細胞的計數(shù)板目前仍然使用的改良Neubauer計數(shù)板就是應用最為廣泛和持續(xù)時間最為長久的經(jīng)典一種,仍然是最為可靠和最為經(jīng)典的計數(shù)技術(shù)它不僅適用于血細胞計數(shù),還可用于其他細胞、動物血細胞、微小粒子及需要在顯微鏡下計數(shù)的各種樣品。直到PaulEhrlich通過用苯胺染料(anilinedyes)對血細胞進行染色,可以區(qū)分細胞核、細胞漿以及一些完好的細胞結(jié)構(gòu)把各種不同的白色的細胞(whitecells)劃分為五種類型,也就是今天仍然沿用的分類標準。1912年出生在美國阿

3、肯色州一個小城的人WallanceH.Coulter發(fā)現(xiàn)了微小粒子通過特殊的小孔時可產(chǎn)生電阻變化這一現(xiàn)象,并根據(jù)這種電阻變化特點將其應用于微小粒子的粒度測量和計數(shù)上??萍冀鐬楸碚盟陌l(fā)明,將其稱為庫爾特原理(Coulterprinciple)。Coulter先生將其引入到血液細胞計數(shù)上,在1953年獲得美國發(fā)明專利細胞分類儀器將體積為35~450fL的血細胞,分為256個通道(channel)。每個通道:1.64fl。根據(jù)細胞大小,分別置于不同的通道中,顯示血細胞體積分布直方圖(Histogram)。經(jīng)溶血素處理脫水后,血細胞體積大小發(fā)生了變化?。?!第一群(35

4、~90fl)小細胞區(qū):淋巴細胞(體積最?。5诙海?0~160fl)單個核細胞區(qū),(中間細胞):單核細胞、嗜酸性粒細胞、嗜堿性粒細胞、原始、幼稚細胞、異常細胞等。第三群(160fl以上)大細胞區(qū):嗜中性粒細胞(體積最大)。經(jīng)過半個多世紀的發(fā)展,這種儀器已經(jīng)有了非常明顯的進步。以前因為只能進行細胞計數(shù),因此我們一般將這類儀器叫做血細胞計數(shù)儀(BloodCellCounter),由于技術(shù)的進步目前這類儀器可以提供除了血細胞計數(shù)以外的更多參數(shù)的聯(lián)合測定和分析,因此我們一般將這類儀器統(tǒng)稱為血液細胞分析儀(HematologyAnalyzer)。光散射法血液分析儀檢測原

5、理組合應用電學光學細胞化學等血細胞分類方法采用VCS技術(shù)進行五分類的儀器采用采用阻抗、激光散射和熒光染色技術(shù)激光散射和細胞化學染色技術(shù)多角度偏振光散射法應用于白細胞五分類(MAPSS技術(shù))采用圖像分析的單純細胞分類儀VCS技術(shù)V代表體積測量法,可有效區(qū)分體積大小差異顯著的淋巴細胞和單核細胞。C代表高頻電導性。細胞核的化學組份可使電流的傳導性產(chǎn)生變化,其變化量可以反映出細胞內(nèi)含物的信息。可區(qū)分體積相近而內(nèi)部性質(zhì)不同的細胞群體,如淋巴細胞和嗜堿性粒細胞S代表激光散射測量技術(shù),激光束可穿透細胞,探測細胞內(nèi)核分葉狀況和胞漿中的顆粒情況,以區(qū)分出顆粒特性不同的細胞群體。例

6、如細胞內(nèi)顆粒粗的要比顆粒細的散射光更強,因此可以用于區(qū)分粒細胞中的嗜中性、嗜酸性和嗜堿性三種細胞。阻抗、激光散射和熒光染色技術(shù)白細胞分析DIFF通道:STROMATOLYSER-4DL試劑中的表面活性劑可以溶解掉標本中的紅細胞和血小板,并在白細胞膜上打出小孔;然后第二種試劑TROMATOLYSER-4DS中的聚次甲基染料通過這個小孔進入白細胞中,與細胞核的核酸和細胞器結(jié)合,在經(jīng)過波長633nm的激光照射,產(chǎn)生的熒光強度與細胞的核酸含量成正比。STROMATOLYSER-4DL試劑還具有與嗜酸性顆粒特異性結(jié)合的能力,可根據(jù)側(cè)向散射光信號強度,將嗜酸性粒細胞從中性粒

7、細胞中分離出來。前向散射光(FSC)信號可反應細胞體積大??;側(cè)向散射光(SSC)信號可反應細胞的顆粒和細胞核等內(nèi)含物的信息在DIFF散射圖當中可以得到中性粒細胞、嗜酸性粒細胞、單核細胞、淋巴細胞等四個分群WBC/BASO通道是專用作檢測嗜堿性粒細胞的通道STROMATOLYSER–FB是一種酸性試劑,可將紅細胞和血小板形成淡影化,將除嗜堿性粒細胞以外的白細胞處理成裸核形態(tài),然后采用前向散射光(FSC)信號和側(cè)向散射光(SSC)信號使嗜堿性粒細胞從其它細胞中分離出來。核酸熒光染色法幼稚粒細胞分析上有特殊的IMI通道,在IMI檢測通道中主要應用射頻(RF)技術(shù)和直流

8、電阻抗法(DC)。這個測

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