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1、蛹蟲草菌株發(fā)酵液及菌絲提取物抑菌活性探析摘要:研究蛹蟲草(Cordycepsmilitsris)的發(fā)酵液和菌絲提取物的抑菌效果,為蛹蟲草抑菌活性物質(zhì)的開發(fā)利用提供基礎(chǔ)資料。采用濾紙柱、海綿柱和花泥柱3種方法檢測(cè)其抑菌效果,結(jié)果表明蛹蟲草發(fā)酵液及菌絲提取物對(duì)大腸桿菌(Escherichiaco1i)和金黃色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)均有一定抑制作用,其中菌絲提取物抑菌作用較強(qiáng);對(duì)大腸桿菌的抑制強(qiáng)于對(duì)金黃色葡萄球菌的抑制。抑菌效果檢測(cè)方法以濾紙柱法檢測(cè)效果較好,花泥柱法次之,海綿柱法較差。關(guān)鍵詞:蛹蟲草;抑菌;檢測(cè)方法;發(fā)酵液;菌絲提取物中圖分類號(hào):S567?35;Q93
2、9?96文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A文章編號(hào):0439-8114(2012)16-3492-04StudiesonAntibacterialActivitiesofFermentationBrothandMyceliaExtractionofCordycepsmilitarisHANYan-fengl,ZHANGYan-Wei2,DONGXuan1,HUANGYu1,LIANGZong—qi1(1.InstituteofFungusResources,CollegeofLifeScience,GuizhouUniversity,Guiyang550025,China;2.AcademyofChemistry
3、andLifeScience,GuizhouNorma1College,Guiyang550018,China)Abstract:Fermentationbrothandmyce1iaextractionofCordycepsmi1itarisindifferentfermentativedayswereexploredfortheirantibacteria1activities?Forthethreemethodstotesttheantibacterialeffect,theresu1tsshowedthatfilterpapermethodwasthebest,foliowedbyfl
4、owermudcolumn,theworstwasspongecolumn?Theinhibitioneffectofmyce1iaextractiononbothbacteriawasstrongerthanthatoffermentationbroth;andtheinhibitioneffectofbothmaterialsonEscherichiaco1iwasstrongerthanthatonStaphy1ococcusaureus?Keywords:Cordycepsmi1itaris;antibacterial;testmethod;fermentationbroth;myce
5、1iaextraction蛹蟲草又名北冬蟲夏草,是我國(guó)名貴中藥材冬蟲夏草的代用品,含有多種生物活性物質(zhì)[1,2]o蛹蟲草為蟲、菌結(jié)合體,其真菌也常被稱為蛹蟲草(Cordycepsmi1itaris)o研究發(fā)現(xiàn),蛹蟲草的子實(shí)體、菌絲體和發(fā)酵液中均有多種活性成分,能抑制部分細(xì)菌和真菌,對(duì)人體具有一定的保健功效,具有潛在應(yīng)用前景】3-5]o一些關(guān)于蛹蟲草的研究認(rèn)為,蛹蟲草的抗菌成分可能是蟲草素[6,7]、多糖[8]、多肽[9]、酶類[10]或酚類[11],具有抑菌作用可能是單一成分導(dǎo)致也有可能是多組分協(xié)同作用。劉陽(yáng)等[12]報(bào)道發(fā)酵液的抑菌效果是單一活性成分抑菌效果的2倍,表明蛹蟲草中多種活性成分共
6、同作用的抑菌效果好于單一活性成分的抑菌效果。但針對(duì)某一種微生物而言,其主要抑菌活性物質(zhì)應(yīng)該是一類或一種物質(zhì)。試驗(yàn)采用3種檢測(cè)材料對(duì)蛹蟲草菌絲提取物和發(fā)酵液進(jìn)行抑菌效果檢測(cè)比較,和常用的抑菌效果檢測(cè)采用的濾紙片法和牛津杯法有所不同。同時(shí)比較不同發(fā)酵天數(shù)的蛹蟲草發(fā)酵液和菌絲提取物的抑菌效果,以期為蛹蟲草抑菌活性物質(zhì)的開發(fā)利用提供基礎(chǔ)資料。1材料與方法1.1供試菌株蛹蟲草GZUIFR-ZH菌株、大腸桿菌(Escherichiacoli)、金黃色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)為貴州大學(xué)真菌資源研究所微生物實(shí)驗(yàn)室保存。1.2培養(yǎng)基PDA固體培養(yǎng)基:馬鈴薯200g去皮切塊,煮沸30m
7、in后6層紗布過濾,加入葡萄糖、瓊脂各20g,水1000mLo121°C滅菌30min。蛹蟲草液體發(fā)酵培養(yǎng)基:馬鈴薯200g去皮切塊,煮沸30min后6層紗布過濾,加入葡萄糖20g,水1000mL,分裝至250mL三角瓶中,每瓶裝液100mLo121°C滅菌30min。牛肉膏蛋白膿固體培養(yǎng)基:牛肉膏3g,蛋白豚10g,NaC15g,瓊脂20g,*l000mL,pH7.0?7.2o121°C滅菌30