一株高產(chǎn)堿性果膠酶菌株的分離、產(chǎn)酶條件的優(yōu)化和酶液的初步分離提純

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1、2010—D5教改聚焦一椿高產(chǎn)堿性呆欣胯菌株的分青、嚴胯條件的他伯和酶浪的初步分離捉絕牛永梅摘要：從公園的花土中分離出一株相對高產(chǎn)堿性果膠酶的菌株，經(jīng)16srDNA鑒定為枯草芽孢桿菌，命名為TCCCC11286。在初步的酶學(xué)性質(zhì)研究中表明，它耐高溫耐堿，最適作用溫度為45~C，到60℃仍有酶活，最適作用pH為8．0。經(jīng)過培養(yǎng)基的初步優(yōu)化，菌株TCCCC11286對于富含銨根離子的化學(xué)物質(zhì)和淀粉具有很好的利用能力。本實驗還對酶的分離純化進行了初步研究。關(guān)鍵詞：枯草芽孢桿菌優(yōu)化分離純化Abstract：Abacterialstrainrelativily

2、highlyproducing1．2試劑alkalinepectateIyasewasobtainedfromthesoilofvariaseflowersPolygalacturonicacidBeijingBiodeeBiotechnologyinthePark．Thebacteriumwasprimarilyidentifiedasastrainthat十六烷基三甲基溴化銨北京奧博星生物技術(shù)有限任公司belongstoBacillussp．basedon16srDNAanditwasnamedas果膠天門峽富達果膠工業(yè)有限公司TCCCCI128

3、6．Studyonthecharacteristicsofalkalinepectinase聚乙二醇天津天泰精細化學(xué)品有限公司showedthatitwashishtemperatureresistantandalkaliproo~TheT．T．R．C．highestactivityoftheenzymewasat．pH8．0and45℃．evenmore甘氨酸天津市珠江衛(wèi)生材料廠itWR8moreactivityat6o℃．Undertheoptionalfermentation無水葡萄糖國藥集團化學(xué)試劑有限公司conditions，strainT

4、CCCCI1286couldmakegoodUSeofcornstarch可溶性淀粉天津市四通化工廠andchemicalsubstancesfulofNH4~．Furthermore，wepreliminarily酵母粉OXOIDLTD，BASINGSTOKE，HAMPSIRE，ENGLANDseperatedandpurifiedthepectinase．TPYPr0NEOXOIDLTD．，BASINGSTOKE，Keyword：Bacillussp．optimizationseparationandpurification．HAMPSIRE，E

5、NGLAND果膠酶(pectinases)是一類能分解植物組織中果膠質(zhì)(由D一AgarJapan半乳糖醛酸以儀一1，4糖苷鍵連接形成的直鏈狀的聚合物)的酶磷酸天津市北方天醫(yī)化學(xué)試劑廠系，按底物專一性、對糖苷鍵作用機理、切斷方式等，大致可分9Na0H天津市北方天醫(yī)化學(xué)試劑廠種組分。堿性果膠酶是指在堿性范圍內(nèi)具有較高活性的果膠酶，(NH4)_-．S04天津市風(fēng)船化學(xué)試劑科技有限一般多指聚半乳糖醛酸裂解酶(polygalaeturonatelyase，PGL)[1]。公司果膠酶廣泛應(yīng)用于食品工業(yè)的果汁加工，果酒澄清，飲用酶制劑，1．3培養(yǎng)基生物農(nóng)藥，而堿性

6、果膠酶除在植物病毒的純化、紙漿漂白等方面(1)LB培養(yǎng)基(s／L)：蛋白胨2O、酵母粉10、NaCI20于12l℃得到應(yīng)用外，已成為綿織物處理過程中至關(guān)重要的生物制劑。用下滅菌20rain果膠酶可以用于不能進行堿精練的織物(如綿和羊毛混紡織物)(2)種子培養(yǎng)基()：蔗糖20、蛋白胨10、玉米漿30、rd~SO,1、處理[21，而且處理后的織物損傷小，織物柔軟豐滿，對環(huán)境的污染K,_HPO~18．4、KIL,PO,6、pH=7于121℃下滅菌20min少，操作人員的工作環(huán)境和設(shè)備的腐蝕情況均比堿精練好蚓。(3)發(fā)酵液(e1)：乳糖20、蛋白胨3、CaC

7、h．3、果膠20、酵母膏自1972年日本學(xué)者K0kiHorikoshi首次用嗜堿細菌制得堿3、MgCl20．2、pH=7．0-7．5于121~C下滅菌20min性果膠酶以來【7J，至今已分離鑒定出幾十種堿性果膠酶，但其中(4)篩選培養(yǎng)基()：果膠5、酵母膏5、蛋白胨5,MgSO42、能應(yīng)用于工業(yè)化生產(chǎn)的不多，僅NovoNordisk公司在1999年研制K,_HPO~1、瓊脂20、pH=7．7．5于121℃下滅菌20rain出用基因工程菌生產(chǎn)的堿性果膠酶Bio-Prep，以及于2003年推出(5)斜面培養(yǎng)基(g／L)：葡萄糖lO、蛋白胨5、牛肉膏5、N

8、aCI5、的一種堿性果膠裂解酶ScourzymeL，但高昂的生產(chǎn)成本限制了其瓊脂條20、pH=7．0于12l