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《丙型肝炎病毒核酸檢測試劑國家參考品的制備-論文.pdf》由會員上傳分享,免費在線閱讀,更多相關內(nèi)容在應用文檔-天天文庫。
1、中國生物制品學雜志2014年8月第27卷第8期ChinJBiologicalsAugust2014.Vo1.27No.8·1035·診斷制劑丙型肝炎病毒核酸檢測試劑國家參考品的制備劉悅越,劉艷,杜加亮,范行良,高加梅,國泰中國食品藥品檢定研究院腸道病毒疫苗室,北京100050摘要:目的制備丙型肝炎病毒(hepatitisCvirus,HCV)核酸檢測試劑國家參考品。方法收集我國不同地區(qū)的獻血員血漿,用核酸篩查試劑篩查HCVRNA情況,并通過PCR法對人細小病毒B19進行定性測定,篩選陽性參考品、陰性參考品和最低檢
2、出限參考品。對HCVRNA陽性樣本進行基因分型;3家實驗室以WHOHCVRNA國際標準品為對照品,對參考品進行協(xié)同標定;并檢測參考品的穩(wěn)定性和適用性。結果篩選出10份HCV陽性,而HBV、HIV、B19均為陰性的樣本作為陽性參考品,其中有6份為1b型,1份為2a型,1份為3a型,1份為3b型,1份為6a型;10份HCV、HBV、HIV、B19均為陰性的樣本作為陰性參考品;1份凍干的HCVRNA陽性,HBV、HIV、B19為陰性的樣本作為最低檢出限參考品,基因型為1b型。3個實驗室經(jīng)協(xié)作標定,陰性參考品的結果均為陰
3、性,陽性參考品的HCVRNA濃度在104~10Iu/ml之間,最低檢出限參考品的HCVRNA濃度為6.18×106IU/ml。一20℃放置4周、4℃放置12d、室溫放置7d以及反復凍融5次對參考品的HCVRNA含量無明顯影響。參考品適用于目前國內(nèi)市場上主要國產(chǎn)血液篩查和定量試劑的檢測。結論制備了HCV核酸檢測試劑國家參考品,可用于HCV核酸診斷試劑的質(zhì)量評價和控制。關鍵詞:丙型肝炎病毒;核酸;診斷;參考品中圖分類號:R373.2+1R392—33文獻標識碼:A文章編號:1004.5503(2014)08—1035
4、.04PreparationofnationalreferencepanelsfordiagnostickitsforhepatitisCvirusnucleicacidLIUYue-yue,LIUYan,DUJia—liang,F(xiàn)ANXing-1iang,GAOJia-mei,GUOTaiNationalInstitutesforFoodandDrugControl,Be~jing100050,ChinaCorrespondingauthor:GuoTai,E-mail:guotai@nifdc.org.cnA
5、bstract:ObjectiveTopreparethenationalreferencepanelsfordiagnostickitsforhepatitisCvirus(HCV)nucleicacid.MethodsPlasmasamplesofblooddonorsinvariousregionsinChinawerecollectedandscreenedforHCVRNAbybloodscreeningreagents,andtestedforhumanparvovirusB19byPCR,based
6、onwhichpositiveandnegativereferencepanelsaswellasreferenceforminimumdetectionlimitwerescreened.ThesamplespositiveforHCVRNAweregenotyped.ThecandidatereferenceswerecollaborativelycalibratedbythreelaboratoriesusingWHOHCVRNAstandardasacontrol,andevaluatedforstabi
7、lityandapplicability.ResultsTensamplespositiveforHCVbutnegativeforHBV,HIVandB19werescreenedaspositivereferences,ofwhich6wereofgenotypelb,onewasof2a,onewasof3a,onewasof3b,andonewasof6a.TensamplesnegativeforHCV,HBV,HIVandB19werescreenedasnegativereferences.Onef
8、reeze-driedsamplepositiveforHCVRNAbutnegativeforHBV.HIVandB19wasseveredasthereferenceforminimumdetectionlimit,whichwasofgenotypelb.Collaborativecalibrationshowedthatalltheresultsofnegativ