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《丙型肝炎病毒核酸液相芯片分型檢測方法的建立及應(yīng)用-論文.pdf》由會員上傳分享,免費在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫。
1、國際檢驗醫(yī)學雜志2014午7月第35卷第13期IntJLabMed,July2014,Vd.35,No.13·臨床檢驗研究論著·丙型肝炎病毒核酸液相芯片分型檢測方法的建立及應(yīng)用周有良,胡春凌。,汪朝暉,任傳路,胥萍,陳佩琴,劉惺(1.蘇州出入境檢驗檢疫局,江蘇蘇州215011;2.深圳博睿祥暉生物技術(shù)有限公司,廣東深圳518050;3.中國人民解放軍100醫(yī)院檢驗科,江蘇蘇州215007;4.蘇州市第五人民醫(yī)院檢驗中心,江蘇蘇州215007)摘要:目的建立丙型肝炎病毒1a、1b、2a、3a、3b、6a亞型的核酸液相芯片分型檢測方法。方法建立
2、PCR擴增及核酸探針偶聯(lián)方法,將PCR產(chǎn)物與偶聯(lián)核酸探針的微球混合物進行雜交,建立液相芯片檢測方法,并對建立的液相芯片檢測方法進行靈敏度及特異性評價,應(yīng)用該方法對93份血清樣本核酸進行檢測。結(jié)果建立的丙型肝炎病毒核酸液相芯片分型檢測方法具有較高的特異性和敏感性,能對6種亞型進行檢測和分型,對于HC妒la、3a和6a亞型核酸液相芯片分型檢測方法的靈敏度為1×10copies/PCR;對于HCV—lb、2a和3b亞型核酸液相芯片分型拉測方法的靈敏度為1X10copies/PCR。對93份臨床樣本的檢測結(jié)果表明,該方法具有高通量、快速、敏感、特異
3、的特點。結(jié)論本方法能對丙型肝炎病毒的6種亞型進行同時快速檢測,為丙型肝炎病毒的分型檢測提供一種新方法。關(guān)鍵詞:肝炎,丙型;肝炎病毒;液相芯片;聚合酶鏈反應(yīng)DOI:10.3969/].issn.1673—4130.2014.13.0l9文獻標識碼:A文章編號:l673—413O(2014)13-171O—O4EstablishmentandapplicationofHCVgenotypeliquichipdetectionmethodZhouYouliang,HuChunling,WangZhaohui,RenChuanlu。,XuPing,
4、ChenPeiqin,LiuXing(1.SuzhouEntry一腔xiiInspenctionandQuarantineBureau,Suzhou,Jiangsu215011,China;2.ShenzhenSma7tshitgingBoc^oZ0gP5Co.,Ltd.,Shenzhen,Guangdong518050,China;3.DepartmentoJCliticalLaboratory,100HospitalofPLA,Suzhou,Jiangsu215007,China;4.LaboratoryC”ter5uzhouMunic
5、ipalFifthPeoplesHospital,SuzhouJiangsu215007。China)Abstract:ObjectiveToestaolishaliquichipmethodfordetecting6sub—genotypesofhepatitisCvirus(HCV),includingla,1b。2a。3a,3band6a.MethodsThecouplingmethodofPCRamplificationandnucleicacidprobewasestablished.ThePCRproductandthemicr
6、ospheresmixtureofthecouplednucleicacidprobewerehybridizedforestablishingtheliquiehipdetectionmethod.Thesensitivityandspecificityoftheestablishedliquichipdetectionmethodwereevaluated.Nucleicacidin93serumsampleswasdetec—tedbythismethod..ResultsTheestablishedHCVnucleiacidliqu
7、ichipgenotypedetectionmethodhadthehigherspecificityandsensitivity,whichcoulddetectandclassfy6HCVsub—genotypes.ThesensitivityforHCVla,3aand6asub—genotypeswas1×10copies/PCR;thesensitivityforHCV1b。2aand3bsub—genotypeswas1×10copies/PCR.Thedetectionresultsin93serumsamplesshowed
8、thatthethisgenotypingmethodhadthecharacteristicsofhighthroughput,rapidness,sentsitivityan