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《膠體金免疫層析檢測牛結(jié)核γ干擾素方法的建立.pdf》由會員上傳分享,免費(fèi)在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫。
1、中國動物傳染病學(xué)報2010,18(1):45—50ChineseJouma1ofAnimalInfectiousDiseases研究論文膠體金免疫層析檢測牛結(jié)核Y干擾素方法的建立錢琨,尹天燕,趙士學(xué),黃大盧,金文杰,秦愛建(揚(yáng)州大學(xué)江蘇省動物預(yù)防醫(yī)學(xué)重點實驗室,揚(yáng)州225009)摘要:牛結(jié)核病是一種重要的人畜共患病,盡管許多國家已經(jīng)實施了牛群凈化,但其仍然威脅人類的公共衛(wèi)生健康。本研究利用抗牛Y干擾素特異性單克隆抗體,通過免疫金標(biāo)記技術(shù),建立了膠體金免疫層析試紙條檢測牛y干擾素的方法。研究結(jié)果證明,該方法對
2、牛y干擾素具有高度特異性,與其它動物干擾素沒有交叉反應(yīng),檢測牛Y干擾素的靈敏度與進(jìn)口ELISA試劑盒相當(dāng)。試紙條在室溫保存6個月、4℃保存12個月,其特異性及靈敏度沒有明顯變化。對田間送檢的23份全血經(jīng)結(jié)核特異性刺激后進(jìn)行檢測,結(jié)果與進(jìn)口結(jié)核ELISA試劑盒符合率為91.3%。研究表明,本研究建立的牛y干擾素免疫層析檢測方法具有特異、敏感、穩(wěn)定、操作簡單快捷等特點,適合用于牛結(jié)核的快速特異檢測。關(guān)鍵詞:牛結(jié)核病‘5牛Y干擾素‘5單克隆抗體;膠體金免疫層析中圖分類號:$858.235.2:R392文獻(xiàn)標(biāo)識碼:
3、A文章編號:1674—6422(20l0)0l一0045—06DEVELoPMENToFANIMMUNoCHRoMAToGRAPHICSTIUPFoRRAPIDDETECTIoNoFBoVINETUBERCULOSISINF.YQIANKun,YINTian—yan,ZHAOShi—xue,HUANGDa—lu,JINWen-jie,QINAi-jian(KeyLabofJiangsuPreventiveVeterinaryMedicine.YangzhouUniversity,Yangzhou225009
4、.China)Abstract:Bovinetuberculosis(TB)isstillazoonoticproblemontheworld.Despitethefactthateradicationprogramsarebeingimplementedinmanycountries,itisstillapublichealthproblem.AnimmunochromatographicstripassayfordetectionofbovineINF-Ywasdevelopedinthisstudy.
5、ComparedwiththeELISAkit,thestripwasspecificfordetectingbovineINF—v.Thestripsretainedtheirsensitivityandspecificityforsixmonthsatroomtemperatureor12monthsat4℃TwentythreesamplesfromCOWSpotentiallyinfectedwithTBweredetectedusingthestripandELISAkit.Theagreemen
6、tofthesetwomethodswas91.3%.TheimmunochromatographicstripfordetectionofbovineINF—vhashighspecific/ty,sensitivityandstability.Togetherwiththeadvantagesofrapiddetectionandeasyoperationwithoutrequirementforspecialskillsandexpensiveequipment,thismethodissuitabl
7、efortheon-sitedetectionofbovineTBassayKeyWords:Bovinetuberculosis;bovine1NF—Y;monoclonalantibody;gold-immunochromatographicstrip收稿Et期2009—11一l6基金項目江蘇省高校自然科學(xué)重大基礎(chǔ)研究項目(合07KJA23021);省研究生科研創(chuàng)新計劃(CX09B一317Z)作者簡介錢琨和尹滅燕同為第一作者。錢琨,男,博士,講師,主要從事分子病毒學(xué)及免疫學(xué)研究;尹天燕,女,碩士研究生,
8、手要從事病原診斷學(xué)研究通訊作者秦愛建,E—mail:aijian@yzu.edu.cn·。_——46。_——中國動物傳染病學(xué)報2010年1月牛結(jié)核病是由牛分枝桿菌和結(jié)核分枝桿菌所引IgG、HRP標(biāo)記兔抗鼠IgG(全分子)、聚乙二醇起的一種慢性消耗性傳染病,可通過病畜傳播給人4000(PEG)、弗氏完全佐劑(Freund’SAdjuvant類或其它動物。結(jié)核病除了感染人外,還能感染50complete)、弗氏不完全