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《抗藍舌病病毒VP7和NS2蛋白單克隆抗體的制備及鑒定.pdf》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫。
1、第33卷第l0期中國預(yù)防獸醫(yī)學報VO1．33．NO．102011年10月ChineseJournalofPreventiveVeterinaryMedicine0ct．2011doi：10．3969／j．issn．1008-0589．2011．10．15抗藍舌病病毒VP7和NS2蛋白單克隆抗體的制備及鑒定秦永麗，孫恩成，耿宏偉1,2，楊濤，劉霓紅，趙晶，王凌風，徐青元，蔡緒禹，李文京。，吳東來(1．中國農(nóng)業(yè)科學院哈爾濱獸醫(yī)研究所獸醫(yī)生物技術(shù)國家重點實驗室／農(nóng)業(yè)部獸醫(yī)公共衛(wèi)生重點開放實驗室，黑龍江哈爾濱150001；2．
2、東北農(nóng)業(yè)大學動物醫(yī)學學院，黑龍江哈爾濱150030；3．中國動物疫病預(yù)防控制中心，北京100125)摘要：為建立藍舌病病毒(BTV)的檢測方法和研究該病毒蛋白的功能，本研究利用BTV血清8型(BTV8)免疫BALB／c小鼠，取免疫后的小鼠脾淋巴細胞與SP2／0細胞融合，制備單克隆抗體(MAb)。并以BTV8作為包被抗原建立間接ELISA方法，經(jīng)篩選獲得了8株穩(wěn)定分泌抗BTV8MAb的雜交瘤細胞株(1B2、1F6、2B1、2D10、3B6、3D9、4D4和4D12)。Westemblot結(jié)果顯示，MAb1F6、2B1、2
3、D10、3B6、3D9與BTV8VP7蛋白反應(yīng)，MAbB2、4D4、4D12與BTV8NS2蛋白反應(yīng)。間接免疫熒光結(jié)果顯示，該8株MAb與24型BTV血清型呈不同的反應(yīng)譜系。本研究所獲得的MAb為建立BTV免疫學檢測方法和相關(guān)病毒蛋白的功能研究提供了實驗依據(jù)。關(guān)鍵詞：藍舌病病毒；VP7蛋白；NS2蛋白；單克隆抗體中圖分類號：$852．65文獻標識碼：A文章編號：1008—0589(2011)10-0816-04ProductionandidentifiCatiOnofmonoclonalantibodiesagains
4、tVP7andNS2ofbluetonguevirusQrNYong—li。，SUNEn—cheng，GENGHong—wei，YANGTao，LIUNi-hong，ZHAOJing，WANGLing—feng，XUQing—yuan，CAIXu—yu，LIWen-jing。，wuDong-lai(1．KeyLaboratoryofVeterinaryPublicHealth，MinistryofAgricultural，StateKeyLaboratoryofVeterinaryBiotechnology，Harbi
5、nVeterinaryResearchInstitute，ChineseAcademyofAgriculturalSciences，Harbin150001，China；2．CollegeofAnimalMedicine，NortheastAgriculturalUniversity，Harbin150030，China；3．ChinaAnimalDiseaseControlCenter，Beijing100125，China)Abstract：Topreparemonocloneantibody(MAb)agains
6、tbluetonguevirus(BTV)，SP2／0myelomacellswerefusedwithspleencellsofBALB／cmiceimmunizedwichBTVserotype8．a(chǎn)ndscreenedbyindirectELISAcoatedwithBTV8．EightMAbs(1B2，1F6，2B1，2D10，3B6，3D9，4D4and4D12)againstBTVwereproduced．TheresultofwestemblotindicatedthattheMAbsof1F6，2B1，
7、2D10，3B6，3D9reactedtoVP7protein，andtherestofMAbsreactedtoNS2protein．TheresultsofIFAshowedthatalltheMAbshaddifferentreactivitywithBTV1-24serotypes．TheMAbsproducedinthisstudyareusefultoolsfordevelopingimmunologicaldiagnostictechniquesofBTVandinvestigatingproteinsr
8、elatedtoBTV．Keywords：bluetonguevirus；VP7：NS2；monoclonalantibody藍舌病(Bluetongue，BT)是由呼腸孤病毒科環(huán)狀和野生反芻動物等?。感染動物的平均病死率為病毒屬的BT病毒(BTV)~I起的，主要由庫蠓傳播的30％，其中綿羊的病死率可高達80％【2_。世界動物反芻
