無償獻(xiàn)血者ELISA法篩查HIV反應(yīng)性標(biāo)本與免疫印跡法檢測(cè)結(jié)果.pdf

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1、2015年3月A第2卷第7期臨床醫(yī)藥文獻(xiàn)雜志Mar．A2015、，01．2No．7JournalofClinicalMedicalLiterature1287無償獻(xiàn)血者ELISA法篩查HIV反應(yīng)性標(biāo)本與免疫印跡法檢測(cè)結(jié)果李英輝，楊巍，王濤，杜艷麗，孫微超，劉彥哲(哈爾濱紅十字中心血站，黑龍江哈爾濱150000)【摘要】目的對(duì)哈爾濱市無償獻(xiàn)血者中HIV抗體反應(yīng)性的標(biāo)本進(jìn)行抗體蛋白印跡確認(rèn)實(shí)驗(yàn)與酶聯(lián)免疫法對(duì)比實(shí)驗(yàn)，通過實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析探討其應(yīng)用特點(diǎn)。方法將本血液中心檢驗(yàn)科2010年1月～2014年6月間ELISA法

2、檢,~,IHIV結(jié)果呈反應(yīng)性的911份標(biāo)本重新進(jìn)行抗體蛋白印跡確認(rèn)與酶聯(lián)免疫法對(duì)比實(shí)驗(yàn)。結(jié)果2010年1月～2014年6月來哈爾濱無償獻(xiàn)血者HIV抗體ELISA法與免疫印跡法的陽性符合率為18．2％，抗體不確定占41．7％。S／CO值大于O小于或等于1與確證試驗(yàn)陽性符合率為0％抗體不確定為29．4％，S／C0值>l≤2陽性符合率為O％抗體不確定53．8％，S／CO值>2≤3陽性符合率為62．9％抗體不確定為33．7％。結(jié)論隨著ELISA法s／CO值的增高，與確證試驗(yàn)的陽性符合率也升高。考慮到血液的安全篩查試

3、驗(yàn)的靈敏度相對(duì)要高特異性低一些，存在一定假陽性結(jié)果，所以HIV抗體結(jié)果報(bào)告必須以WB結(jié)果為準(zhǔn)。【關(guān)鍵詞】無償獻(xiàn)血者；HIV抗體；蛋白印跡；酶聯(lián)免疫【中圖分類號(hào)】R446【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】B【文章編號(hào)】ISSN．2095—8242．2015．07．1287．02艾滋病即獲得性免疫缺陷綜合癥，是由艾滋病毒感染所(37±1)℃9呼育60rain。用配好的洗液洗板(5次)。除空引起的，艾滋病毒又稱為人類免疫缺乏病毒簡稱HIV，HIV白孔外每孔加酶100I．tL，(37±1)℃孵育30min。洗板(5主要破壞人體免疫系統(tǒng)

4、的CD4的T淋巴細(xì)胞，致使人體對(duì)周次)。每孔加入底物A、B各50，混勻后置(37±1)℃圍環(huán)境中的病原微生物喪失抵抗能力，進(jìn)而機(jī)體免疫監(jiān)視功避光顯色30rain。每孔加終止液50，混勻，置酶標(biāo)儀用能下降，從而使人增加受感染和得一些惡性疾病的機(jī)會(huì)，可450nlTl波長測(cè)定各~：LOD值。并發(fā)嚴(yán)重的感染和腫瘤，最終導(dǎo)致感染者死亡l1]。我國AIDS1．3．2法國伯樂應(yīng)用夾心兩步法呈加速流行的趨勢(shì)，截至N2oo2年底，我國實(shí)際HIV感染者酶聯(lián)免疫技術(shù)檢測(cè)人血清或血漿中HIV抗原~lHIV1、已超過100萬。當(dāng)前對(duì)

5、HIV感染還沒有安全有效的治療方法，HIV2相關(guān)的各種抗體，取出試劑盒放置室溫約30rain，平衡HIV極高的突變率等原因又使研~r]HIV有效疫苗極為困難，至室溫后打開自封袋，取用所需板。將濃縮洗滌液用蒸餾水所以目前防治的主要手段還是以預(yù)防為主[2】，艾滋病傳播途或去離子水20倍稀釋。每次實(shí)驗(yàn)設(shè)陰性對(duì)照3孔、陽性對(duì)照2徑有三種：性傳播，血液傳播和母嬰傳播。輸血是HIV經(jīng)血孔、室內(nèi)質(zhì)控1孔。每孔加入結(jié)合物1(R6)25p．L各孔加入樣液傳播的重要途徑之一，為降低經(jīng)輸血傳播HIV的風(fēng)險(xiǎn)，品或?qū)φ掌?5。封板后

6、置(37±1)℃孵育60rain。用配對(duì)無償獻(xiàn)血者進(jìn)行HIV檢測(cè)是有效防范措施之一，保證臨床好的洗液洗板(3次)。每~LlooI．tL的結(jié)合物2。血液安全，盡早發(fā)現(xiàn)HIV感染者，控制其傳播。本文結(jié)合我室溫下(22~26)℃孵育(30±2)rain。洗板(5次)。站2010年1月～2014年6月份HIV結(jié)果呈反應(yīng)性的911份標(biāo)本每孔分配80uL的底物，室溫下(22~26)℃孵育(30±2)ELISA法與免疫印跡法確證試驗(yàn)檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行相關(guān)探討。rain。每孔分配終止液100gL，混勻，4rain后用450nm主

7、測(cè)波長和620ntn參考波長比色。1資料與方法結(jié)果判定：樣品OD值S≥CO，判為HIV抗體初篩陽1．1一般資料性，s

8、V抗體初篩ELISA法試劑盒英科新創(chuàng)試劑購自廈門新pol(p31、p51、p66)帶；HIV抗體陰性：沒有病毒的創(chuàng)有限公司和法國伯樂試劑購自北京萬泰生物技術(shù)有限公特異性條帶或只檢出P17抗體沒有其他條帶；HIV抗體司。愛康Xantus)JIl樣儀奧斯JE[~Fame。不確定：出現(xiàn)任何病毒特異條帶，但不足于被判斷為陽1I3檢測(cè)方法性。HIV-2抗體陽性：在HIV-1陽性或不確定基礎(chǔ)上見如1-3．1英科新創(chuàng)采用雙抗原