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《無償獻血者ELISA法篩查HIV反應(yīng)性標本與免疫印跡法檢測結(jié)果.pdf》由會員上傳分享,免費在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫。
1、2015年3月A第2卷第7期臨床醫(yī)藥文獻雜志Mar.A2015、,01.2No.7JournalofClinicalMedicalLiterature1287無償獻血者ELISA法篩查HIV反應(yīng)性標本與免疫印跡法檢測結(jié)果李英輝,楊巍,王濤,杜艷麗,孫微超,劉彥哲(哈爾濱紅十字中心血站,黑龍江哈爾濱150000)【摘要】目的對哈爾濱市無償獻血者中HIV抗體反應(yīng)性的標本進行抗體蛋白印跡確認實驗與酶聯(lián)免疫法對比實驗,通過實驗結(jié)果分析探討其應(yīng)用特點。方法將本血液中心檢驗科2010年1月~2014年6月間ELISA法
2、檢,~,IHIV結(jié)果呈反應(yīng)性的911份標本重新進行抗體蛋白印跡確認與酶聯(lián)免疫法對比實驗。結(jié)果2010年1月~2014年6月來哈爾濱無償獻血者HIV抗體ELISA法與免疫印跡法的陽性符合率為18.2%,抗體不確定占41.7%。S/CO值大于O小于或等于1與確證試驗陽性符合率為0%抗體不確定為29.4%,S/C0值>l≤2陽性符合率為O%抗體不確定53.8%,S/CO值>2≤3陽性符合率為62.9%抗體不確定為33.7%。結(jié)論隨著ELISA法s/CO值的增高,與確證試驗的陽性符合率也升高。考慮到血液的安全篩查試
3、驗的靈敏度相對要高特異性低一些,存在一定假陽性結(jié)果,所以HIV抗體結(jié)果報告必須以WB結(jié)果為準?!娟P(guān)鍵詞】無償獻血者;HIV抗體;蛋白印跡;酶聯(lián)免疫【中圖分類號】R446【文獻標識碼】B【文章編號】ISSN.2095—8242.2015.07.1287.02艾滋病即獲得性免疫缺陷綜合癥,是由艾滋病毒感染所(37±1)℃9呼育60rain。用配好的洗液洗板(5次)。除空引起的,艾滋病毒又稱為人類免疫缺乏病毒簡稱HIV,HIV白孔外每孔加酶100I.tL,(37±1)℃孵育30min。洗板(5主要破壞人體免疫系統(tǒng)
4、的CD4的T淋巴細胞,致使人體對周次)。每孔加入底物A、B各50,混勻后置(37±1)℃圍環(huán)境中的病原微生物喪失抵抗能力,進而機體免疫監(jiān)視功避光顯色30rain。每孔加終止液50,混勻,置酶標儀用能下降,從而使人增加受感染和得一些惡性疾病的機會,可450nlTl波長測定各~:LOD值。并發(fā)嚴重的感染和腫瘤,最終導(dǎo)致感染者死亡l1]。我國AIDS1.3.2法國伯樂應(yīng)用夾心兩步法呈加速流行的趨勢,截至N2oo2年底,我國實際HIV感染者酶聯(lián)免疫技術(shù)檢測人血清或血漿中HIV抗原~lHIV1、已超過100萬。當前對
5、HIV感染還沒有安全有效的治療方法,HIV2相關(guān)的各種抗體,取出試劑盒放置室溫約30rain,平衡HIV極高的突變率等原因又使研~r]HIV有效疫苗極為困難,至室溫后打開自封袋,取用所需板。將濃縮洗滌液用蒸餾水所以目前防治的主要手段還是以預(yù)防為主[2】,艾滋病傳播途或去離子水20倍稀釋。每次實驗設(shè)陰性對照3孔、陽性對照2徑有三種:性傳播,血液傳播和母嬰傳播。輸血是HIV經(jīng)血孔、室內(nèi)質(zhì)控1孔。每孔加入結(jié)合物1(R6)25p.L各孔加入樣液傳播的重要途徑之一,為降低經(jīng)輸血傳播HIV的風(fēng)險,品或?qū)φ掌?5。封板后
6、置(37±1)℃孵育60rain。用配對無償獻血者進行HIV檢測是有效防范措施之一,保證臨床好的洗液洗板(3次)。每~LlooI.tL的結(jié)合物2。血液安全,盡早發(fā)現(xiàn)HIV感染者,控制其傳播。本文結(jié)合我室溫下(22~26)℃孵育(30±2)rain。洗板(5次)。站2010年1月~2014年6月份HIV結(jié)果呈反應(yīng)性的911份標本每孔分配80uL的底物,室溫下(22~26)℃孵育(30±2)ELISA法與免疫印跡法確證試驗檢測結(jié)果進行相關(guān)探討。rain。每孔分配終止液100gL,混勻,4rain后用450nm主
7、測波長和620ntn參考波長比色。1資料與方法結(jié)果判定:樣品OD值S≥CO,判為HIV抗體初篩陽1.1一般資料性,s8、V抗體初篩ELISA法試劑盒英科新創(chuàng)試劑購自廈門新pol(p31、p51、p66)帶;HIV抗體陰性:沒有病毒的創(chuàng)有限公司和法國伯樂試劑購自北京萬泰生物技術(shù)有限公特異性條帶或只檢出P17抗體沒有其他條帶;HIV抗體司。愛康Xantus)JIl樣儀奧斯JE[~Fame。不確定:出現(xiàn)任何病毒特異條帶,但不足于被判斷為陽1I3檢測方法性。HIV-2抗體陽性:在HIV-1陽性或不確定基礎(chǔ)上見如1-3.1英科新創(chuàng)采用雙抗原