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《蛋白免疫印跡法(wb)試驗(yàn)結(jié)果及hiv感染關(guān)系研究》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫(kù)。
1、蛋白免疫印跡法(WB)試驗(yàn)結(jié)果及HIV感染關(guān)系研究【摘要】目的通過對(duì)蛋白免疫印跡法(WB)試驗(yàn)結(jié)果的觀察,確定個(gè)體是否感染HIV以及HIV感染的狀況。方法對(duì)60份抗-HIV初篩陽(yáng)性血清使用蛋白免疫印跡法(WB)進(jìn)行確認(rèn)實(shí)驗(yàn)。結(jié)果在被檢測(cè)樣品中,HIV-1型確認(rèn)試驗(yàn)陽(yáng)性54例,占90%;HIV-1型確認(rèn)試驗(yàn)陽(yáng)性,且提示HIV-2陽(yáng)性感染1例,占1.6%;HIV-1型確認(rèn)試驗(yàn)弱陽(yáng)性(不確定)3例,占5%;HIV-1型確認(rèn)試驗(yàn)陽(yáng)性2例,占3.3%。結(jié)論蛋白免疫印跡法(WB)試驗(yàn)確定個(gè)體有無HIV感染以及HI
2、V感染情況提供依據(jù)。【關(guān)鍵詞】HIV感染;蛋白免疫印跡法(WB);條帶【Abstract】ObjectiveThroughtowesternblotassayobservationofresultofthetest,confirmindividualinfectHIVandHIVinfectthestate.MethodsSafethepositiveserumandusewesternblotassaytoconfirmtocasesof60persist-HIVpositiveforthefirs
3、ttime.ResultsBeingmeasuredinthesample,HIV-1typesconfirmtesting54casesofpositive,takes90%.HIV-1typesconfirmstestingpositive,andpointoutHIV-2infect6onepositively,takes1.6%.HIV-1typesconfirmtestingweakpositive3,takes5%HIV-1typeconfirmtestingnegative2,take3
4、.3%.ConclusionWesternBlotAssaytestoffersbasisonconfirmwhetherindividualshaveHIVisinfectedandHIVinfectthestate.【Keywords】HIVinfect;WesternBlotAssay;Strip作者單位:455000河南省安陽(yáng)市腫瘤醫(yī)院檢驗(yàn)科艾滋病(AIDS)是一種目前尚無有效治愈方法,病死率極高的傳染病,它在全世界的廣泛流行已經(jīng)成為嚴(yán)重的公共衛(wèi)生問題和社會(huì)問題。截止到2007年7月底,我們對(duì)
5、60名抗-HIV初篩陽(yáng)性者進(jìn)行了蛋白免疫印跡法(WB)確認(rèn)實(shí)驗(yàn),通過實(shí)驗(yàn)結(jié)果(蛋白帶條)的觀察,探討與HIV感染關(guān)系,并且還可以在監(jiān)控病情進(jìn)展,觀察治療結(jié)果,綜合監(jiān)測(cè)和行為干預(yù)等方面起到重要作用,現(xiàn)將結(jié)果報(bào)告如下。1試劑與方法1.1試劑人類免疫缺陷病毒(HIV1+2)型抗體免疫印跡試劑盒(新加坡健利檢驗(yàn)診斷私人有限公司提供)。1.2儀器脫色搖床:江蘇TS-1。1.3方法過夜孵育法1.3.1試劑的配制1.3.1.1稀釋洗滌緩沖液6將1體積的濃縮洗滌緩沖液(20X)加入到19倍體積的雙蒸餾水中,充分混勻。
6、1.3.1.2封閉緩沖液1體積的濃縮樣品稀釋緩沖液加入到9倍體積的雙蒸餾水中,充分混勻,每毫升加入1g封閉粉,充分混勻。1.3.1.3酶結(jié)合物工作溶液按1:1000比例,用上述配好的封閉緩沖液稀釋酶結(jié)合物。1.3.2試驗(yàn)步驟:1.3.2.1用鑷子小心取出需要的試劑膜,有號(hào)碼的一端向上,分別放入孵育板槽內(nèi)。強(qiáng)陽(yáng)性對(duì)照、弱陽(yáng)性對(duì)照、陰性對(duì)照各一條。1.3.2.2每槽內(nèi)加入2ml稀釋的洗滌緩沖液,在室溫下(25±3)℃將孵育板置搖床上振蕩孵育至少5min,以吸引器吸出緩沖液。1.3.2.3在每槽中加入2ml
7、上述配好的封閉緩沖液,隨后分別加入2ml患者血清和強(qiáng)陽(yáng)性、弱陽(yáng)性、陰性對(duì)照。1.3.2.4蓋上蓋子,于室溫下(25±3)℃在搖床上過夜(16～20h)振蕩孵育。1.3.2.5小心掀開蓋子以避免濺出或樣品交叉,以吸引器吸出反應(yīng)液。不用的樣品槽間需要更換吸頭以避免交叉污染。1.3.2.6每槽中加入2ml的洗滌緩沖液,每次置搖床上振蕩5min。棄洗液,再重復(fù)兩次。61.3.2.7每槽中加入2ml酶結(jié)合物工作液,蓋上蓋子,于室溫下(25±3)℃在搖床上振蕩孵育30min。1.3.2.8仔細(xì)打開蓋子,吸出酶結(jié)合
8、物溶液,按步驟6洗滌3次。1.3.2.9每槽中介入2ml底物液,蓋上蓋子,于室溫下(25±3)℃在搖床上振蕩孵育15min。1.3.2.10小心打開蓋子,吸出底物,以雙蒸餾水洗滌3次,以終止反應(yīng)。1.3.2.11用鑷子小心取出試劑膜,放在濾紙上,吸干水分,觀察并記錄結(jié)果。2結(jié)果60份抗-HIV初篩陽(yáng)性(WB)確認(rèn)試驗(yàn)結(jié)果表160份抗-HIV初篩陽(yáng)性(WB)確認(rèn)試驗(yàn)結(jié)果份數(shù)條帶形式結(jié)果1只檢測(cè)出p17抗體,沒有其他條帶陰性1沒有出現(xiàn)病毒的特異性條帶,只出現(xiàn)
