沱茶總黃酮的提取及含量測定.pdf

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1、第3O卷第2期平頂山學院學報Vo1．3ONo．22015年4月JournalofPingdingshanUniversityApr．2015沱茶總黃酮的提取及含量測定熊偉，張曉娟，楊飛4，楊勇琴，張海洋(1．大理學院基礎醫(yī)學院，云南大理671000；2．云南省昆蟲生物醫(yī)藥研發(fā)重點實驗室，云南大理671000；3．大理市第一人民醫(yī)院，云南大理671000；4．云南農業(yè)大學煙草學院，云南昆明650201)摘要：采用超聲波乙醇法從云南沱茶中提取總黃酮類化合物，單因素實驗分析乙醇濃度、提取時間和料液比3個因素對沱茶總黃酮得率的影響．結果表明，以乙醇濃度=70％、提取時間30mi

2、n，料液比(g／mL)1：30為超聲法最佳提取工藝，提取總黃酮得率為5．978mg／g，平均回收率為99．83％，RSD=0．96％(／7,=3)，旨在為進一步綜合開發(fā)利用云南沱茶提供參考依據．關鍵詞：總黃酮；沱茶；超聲提?。槐壬ㄖ袌D分類號：R284．2文獻標識碼：A文章編號：1673—1670(2015)02—0069—040引言1材料與儀器云南沱茶是具有悠久歷史的高級緊壓茶，由于1．1材料傳統的原料配制與加工工藝技術形成了特有的色、1．1．1實驗樣品香、味風格，受到廣大茶葉消費者的歡迎．云南沱購自于云南下關沱茶集團股份有限公司(批茶的醫(yī)療保健作用非常廣泛，除具有興

3、奮作用號：20130516)．外，還具有利尿、強心解痙、減肥、抑制動脈硬化、1．1．2試劑及藥品抗菌抑菌、抑制癌細胞和抗衰老作用_l-3]．因此，蘆丁對照品(批號：100080—201308)由中國在法國、西班牙、日本、香港等20多個國家和地藥品生物制品鑒定所提供；無水乙醇、石油醚區(qū)有“減肥茶”“窈窕茶”“美容茶”“益壽茶”之美(60～90℃)、亞硝酸鈉、硝酸鋁、三氯化鋁、三氯化稱．鐵、鹽酸、鎂粉、濃氨水等化學試劑為分析純，購于生物總黃酮是指黃酮類化合物，是一大類天北京鼎國昌盛生物技術公司．然產物，廣泛存在于植物界，是許多中草藥的有1．2儀器設備效成分．在自然界中最常見

4、的是黃酮和黃酮醇，微量移液器(德國Eppendorf公司)；UV9100其他包括雙氫黃(醇)、異黃酮、雙黃酮、黃烷醇、紫外一可見分光光度計(北京瑞利分析儀器公查爾酮、橙酮、花色苷及新黃酮類等HJ．黃酮類化司)；BT一224S型電子分析天平(德國Sartofius公合物具有眾多的生理功能和藥用價值，然而迄今司)；KQ一205B型超聲波清洗器(廣州鴻富化工有關對云南沱茶中黃酮類化合物提取工藝和含有限公司)；Fw177型中草藥粉碎機(天津泰斯特量測定的研究卻未見報道．筆者采用單因素實驗儀器有限公司)；數顯恒溫水浴鍋(江蘇金壇市金分析法對沱茶總黃酮的提取工藝進行研究，并測城國勝

5、實驗儀器廠)；DZF一150小型真空衡溫干定沱茶中總黃酮化合物的含量，旨在為進一步開燥箱(鄭州長城科工貿有限公司)；SH2一D(III)循發(fā)利用沱茶提供參考．環(huán)水式真空泵(上海子期實驗設備有限公司)；收稿日期：2014—08—30基金項目：云南省教育廳科學研究重點項目(2014Z126)；大理學院博士科研啟動基金(BSKY2012018)；大理學院應用開發(fā)研究項目(201406)；云南省大學生創(chuàng)新創(chuàng)業(yè)計劃(201408)作者簡介：熊偉(1982一)，男，湖南省株洲市人，博士，大理學院基礎醫(yī)學院副教授，碩士生導師，主要研究方向：植物多糖生物活性．·7O·平頂山學院學報20

6、15焦MAS—II常壓微波輔助合成／萃取反應儀(上海新鹽酸一鎂粉反應：精確吸取1．0mL提取液于儀器微波化學科技有限公司)；醫(yī)用離心機(北京玻璃試管中，加入適量鎂粉，充分搖勻后再加入濃醫(yī)用離心機廠)．鹽酸5—8滴，觀察其顏色的變化．2．4回收率的測定方法2實驗方法精確稱取沱茶6份，每份1．000g，分別加入蘆2．1蘆丁對照品標準曲線的繪制丁對照品5。0mg，按2．2步驟操作，得到加入蘆丁用電子天平準確稱取蘆丁對照品20．56mg，置標準液的樣品的吸光度值，根據公式計算回收于100mL的容量瓶中，加入=70％乙醇至刻度，率：回收率=樣品加蘆丁標樣測得總黃酮含即得蘆丁對照品

7、溶液．用微量移液器精密吸取1．0、量一樣品中總黃酮含量／蘆丁的加入量×100％．2．0、3．0、4．0和5．0mL對照品溶液置于10mL比色3實驗結果管中，各加入=70％乙醇定容至5mL，加P=5％亞硝酸鈉溶液0．4mL，搖勻放置6rain，再加P=10％3．1黃酮類化合物的定性鑒定硝酸鋁溶液0．4mL，搖勻，再放置6min，加P=4％黃酮類化合物經三氯化鐵反應在可見光下呈氫氧化鈉溶液4mL，搖勻放置15min．相同方法配紫色；三氯化鋁反應呈灰藍色；氨顯色反應在紫外制空白對照，在506tim波長處測定吸光度值A為縱光下呈明顯的墨綠色熒光斑