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《膠體金標(biāo)記技術(shù)檢測麻疹抗體方法的建立.pdf》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫。
1、醫(yī)學(xué)動(dòng)物防制2013年4月第29卷第4期JMedPestControl，Apr2013，Vo1．29，No．4·469·doi：10．7629／yxdwfz201304048·檢驗(yàn)技術(shù)·膠體金標(biāo)記技術(shù)檢測麻疹抗體方法的建立劉維華，張雙宅，徐保紅，趙冬，張弘摘要：目的利用原核基因表達(dá)的麻疹H蛋白，結(jié)合膠體金微粒，制備檢測麻疹I(lǐng)gG抗體的膠體金層析試紙條。方法利用抗IgG抗體結(jié)合IgG抗體一麻疹H蛋白一金微粒的原理，優(yōu)化條件，確定最佳標(biāo)記蛋白pH值及蛋白量等，制備膠體金試紙條，并進(jìn)行樣本檢測。結(jié)果根據(jù)自身表達(dá)蛋白的特點(diǎn)及濃度，標(biāo)記的金微
2、粒pH值為9．0，蛋白量為241xg／ml。79份樣品中，陽性符合率為94．2％，陽性檢出率組間比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論該試紙條測定麻疹I(lǐng)gG抗體表現(xiàn)了良好的符合率，可以考慮用于條件比較差的縣區(qū)麻疹I(lǐng)gG的監(jiān)測，簡便快速，有良好的經(jīng)濟(jì)效益。關(guān)鍵詞：麻疹；H蛋白；膠體金技術(shù)；基因克隆表達(dá)中圖分類號(hào)：R466．6；R511．1文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A文章編號(hào)：1003—6245(2013)04—0469—03Developmentofmethodtodetectmeaslesantibodywithcolloidalgoldlabelingte
3、chniqueLIUWei—hua，ZHANGShuang—zhai，XUBao—hong，ZHAODong，ZHANGHong．ShifiazhuangCenterforDiseaseControlandPrevention，Shijiazhuang050011，Hebei，China．Abstract：ObjectiveTodevelopcolloidalgoldchromatographydipsticksofIgGantibodytodetectmeaslesusingprokaryoticgeneexpressionofm
4、easlesHprotein，whichwascombinedwithcolloidalgoldparticles．MethodTakeadvantageofcombinedwithIgGantibodyIgGantibody—-measlesHprotein--theprincipleofgoldpar--ticles，determinetheoptimalmarkerproteinpHandtheamountofproteinanddothesampletest．ResultsAccordingtocharacteristics
5、ofproteinexpressionandconcentration，pHofcolloidalgoldparticleswas9．0andconcentrationofproteinwas24g／m1．Among79samples，thepositivecoincidenceratewas94．2％．Therewasnostatisticallysignificantdifferenceamongpositivedetectionrategroups．ConclusionsItwasconfirmedthatthediagnos
6、ismethodwasconvenient，rapidandaccurate，whichwaspotentiallylesscostlyforuseinthefieldformeaslesIgGsurveillancewithoutanyotherinstruments．Keywords：Measles；Hprotein；Colloidalgoldtechnology；Genecloneandexpression麻疹是由麻疹病毒(measlesvirus)引起的急性全麻疹監(jiān)測提供快速、簡便、更經(jīng)濟(jì)的方法。身發(fā)疹性呼吸道傳染病，傳染性
7、很強(qiáng)。該病毒感染除1材料與方法了能夠引起發(fā)熱、呼吸道卡他癥狀和全身斑丘疹等急性感染癥狀外，還能抑制細(xì)胞介導(dǎo)的免疫作用，從而1．1材料氯金酸、檸檬酸三鈉為國產(chǎn)分析純；導(dǎo)致肺炎、腹瀉等繼發(fā)感染，少數(shù)病例中甚至還能引BSA為日本進(jìn)口分裝；麻疹血凝素蛋白由本研究室制起腦炎及持續(xù)性中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染等嚴(yán)重并發(fā)癥¨J。備；羊抗鼠二抗和羊抗人IgG抗體為Sigma公司產(chǎn)我國的免疫規(guī)劃要求每年對健康人群進(jìn)行麻疹I(lǐng)gG抗品；硝酸纖維素膜、玻璃纖維、吸水紙、雙面膠等均體的監(jiān)測，目前所采用的是ELISA方法，由于該方法購自上海金標(biāo)生物科技公司；需要必要的儀
8、器設(shè)備和試劑，費(fèi)時(shí)費(fèi)力，由于基層疾1．2方法病預(yù)防與控制中心不具備工作條件和技術(shù)力量，很難1．2．1純化膠體金制備按檸檬酸還原法制備膠體開展工作，多是將樣品送至市級(jí)疾控中心進(jìn)行監(jiān)測。金溶液。在99ml高純水中，準(zhǔn)確加入lml的1％氯金
