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1、北京醫(yī)學(xué)2014年第36卷第9期.論著.楊梅素對HepG2細(xì)胞凋亡的影響郭海清任鋒陳亞利張向穎段鐘平孫華張晶【摘要】目的探討楊梅素對人肝癌細(xì)胞系HepG2凋亡的影響及其機(jī)制。方法以不同濃度的楊梅素孵育HepG2細(xì)胞.在不同時(shí)間分別采用倒置顯微鏡觀察細(xì)胞形態(tài)學(xué)變化;采用噻唑藍(lán)(MTT)法檢測細(xì)胞存活率;采用乳酸脫氫酶(LDH)活力定量測定試劑盒測定細(xì)胞上清液LDH活性;采用流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞凋亡率;采用蛋白質(zhì)印跡法檢測細(xì)胞凋亡途徑關(guān)鍵蛋白的表達(dá)結(jié)果楊梅素對HepG2細(xì)胞的凋亡誘導(dǎo)作用呈現(xiàn)劑量和時(shí)間依賴性。楊梅素作用于Helc,G2細(xì)胞,隨楊梅素濃度增加,細(xì)胞凋亡率增加。與正常對照組相比,1
2、00p~mol/L楊梅素作用于HepG2細(xì)胞24h后,細(xì)胞存活率明顯降低『(100.02~5.97)%VS.(71.60~3.75)%,P=0.0061;早、晚期細(xì)胞凋亡率明顯升高『(10.19~2.61)%vs.(2.52~2.05)%,P=0.003;(11.71±3_34)%vs.(3.69~1.13)%,P=0.004],差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。隨楊梅素濃度增加.線粒體途徑的促凋亡因子BAX蛋白表達(dá)量增加,而抗凋亡因子BCL一2蛋白表達(dá)量降低。結(jié)論楊梅素能夠誘導(dǎo)HepG2細(xì)胞凋亡.可能具有潛在的抗肝癌活性:線粒體途徑在此過程中起重要作用?!娟P(guān)鍵詞】楊梅素HepG2細(xì)胞凋亡線粒體途徑T
3、heefectofmyricetinonHepG2apoptosisGuoHaiqing,RenFeng,ChenYali,ZhangXiangying,DuanZhongping,SunHua,ZhangJing.ToxicInducedLiverDiseaseDepartment,BeijingYou,zHospital,CapitalMedicalUniversity,Beijing100069,ChinaCorrespondingauthor:ZhangJing,Email:drzhangjing@163.corn【Abstract】ObjectiveTostudytheeffe
4、ctofmyricetinonHepG2apoptosis.MethodsHcpG2cellwasincubatedwithdifferentconcentrationsofmyricetin.CellviabilitywasmeasuredbyMTTmethod.Apoptosiswasmeasuredbyflowcytometry.Theexpressionsofthekeyproteinofapoptosisweredetectedbywesternblot.ResultsThereductionofcellviabilitywasmoresignificantwiththeinc
5、reaseofmyricetinconcentration.Inthe100vmol/Lmyricetinfor24hgroup,thecellviabilitywaslowerthanthecontrolgroup[(71.6~3.75)%VS.(100.02~5.97)%,P=0.006],theearlyandlateapoptosisratewerehigherthantheeontrolgroup[(10.19~2.61)%VS.(2.52~2.05)%,P=0.003;(11.71±3.34)%VS.(3.69+1.13)%,P:0.004].Theexpressionofp
6、ro-apoptoticfactorBAXproteinwasincreased.whiletheanti—apoptoticfactorBCL一2pro—teinexpressionwasreduced.ConclusionMyricetincouldinduceapoptosisofHepG2cellthroughmitochondnalpathway,indicatingthatmyricetinmightinhibithepatocellulareareinomaprogression.【Keywords】MyricetinHepG2cellApotosisMitochondri
7、alpathway楊梅素是存在于日常飲食中的一種黃酮醇類化材料與方法合物,因其具有抗氧化、抗腫瘤等多種功效而受到廣一泛關(guān)注【l-31。文獻(xiàn)報(bào)道。楊梅素對胰腺癌細(xì)胞[41、膀胱癌、試劑細(xì)胞I5]及結(jié)直腸癌細(xì)胞[61均有明顯的凋亡誘導(dǎo)作用,楊梅素(純度>95%)、二甲基亞砜(DMSO)購自然而.關(guān)于楊梅素對肝癌的作用及其機(jī)制的研究較美國Sigma公司;噻唑藍(lán)(MTY)購自美國Amresco少本研究通過觀察楊梅素對人肝癌細(xì)胞系HepG2公