血清尿酸測(cè)定

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上傳者:萬(wàn)里一葉飄
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血清尿酸測(cè)定1.實(shí)驗(yàn)原理使用TBHBA(2,4,6-三溴-3-羥基苯甲酸)的酶比色測(cè)定法。尿酸酶氧化尿酸產(chǎn)生過(guò)氧化氫和尿囊素。在過(guò)氧化物酶存在下,過(guò)氧化氫氧化4-氨基安替比林和TBHBA(2,4,6-三溴-3-羥基苯甲酸),產(chǎn)生紅色醌亞胺(Trinder反應(yīng)產(chǎn)物)。尿酸酶尿酸+H2O+O2尿囊素+CO2+H2O2過(guò)氧化物酶TBHBA+4-氨基安替比林+2H2O2醌亞胺+3H2O2.標(biāo)本:2.1病人準(zhǔn)備:12小時(shí)禁食。2.2類(lèi)型:血清,肝素或EDTA血漿,尿液。3.標(biāo)本存放:血清、血漿的穩(wěn)定性:20~25℃保存可穩(wěn)定3天;4~8℃保存可穩(wěn)定7天;-20℃

1保存可穩(wěn)定6個(gè)月。對(duì)尿液用蒸餾水作1+10稀釋后檢測(cè),結(jié)果乘11后報(bào)告。4.標(biāo)本運(yùn)輸:常溫條件下保存運(yùn)輸。5.標(biāo)本拒收標(biāo)準(zhǔn):細(xì)菌污染的標(biāo)本。6.實(shí)驗(yàn)材料6.1試劑威特曼尿酸測(cè)定試劑盒。試劑1試劑26.1.1試劑準(zhǔn)備:試劑為即用式。6.1.2試劑穩(wěn)定性與貯存:試劑保存于2~8℃,若無(wú)污染,可穩(wěn)定至失效期。試劑不可冰凍。開(kāi)蓋后放于儀器的冰箱中可以穩(wěn)定30天。當(dāng)546nm處的試劑空白吸光度小于0.5時(shí),試劑可正常使用。6.1.3變質(zhì)指示:當(dāng)試劑有看得見(jiàn)的微生物生長(zhǎng),有濁度,或者未開(kāi)蓋的液體有沉淀時(shí),表明試劑已變質(zhì),不能繼續(xù)使用。6.1.4注意事項(xiàng):試劑中含疊氮鈉(0.95g/L)為防腐劑。不可入口!避免接觸皮膚及粘膜。應(yīng)采取必要的預(yù)防措施使用試劑6.2校準(zhǔn)品:使用DiaSys公司提供的TruCalU

2校準(zhǔn)品對(duì)自動(dòng)分析儀進(jìn)行校準(zhǔn),具體參見(jiàn)生化檢驗(yàn)校準(zhǔn)品和質(zhì)控品.SOP文件。6.3質(zhì)控品:具體參見(jiàn)生化檢驗(yàn)校準(zhǔn)品和質(zhì)控品.SOP文件。7.儀器:奧林巴斯AU2700生化分析儀8.操作步驟8.1項(xiàng)目基本參數(shù):參見(jiàn)生化檢驗(yàn)奧林巴斯AU2700生化分析儀項(xiàng)目測(cè)定參數(shù).SOP文件8.2儀器操作步驟:參見(jiàn)生化檢驗(yàn)奧林巴斯AU2700生化分析儀操作規(guī)程.SOP文件9.檢驗(yàn)結(jié)果的判斷與分析10.質(zhì)量控制:在每一批標(biāo)本中都應(yīng)把非定值血清水平I與II質(zhì)控做為未知標(biāo)本進(jìn)行分析,以2S為質(zhì)控警告限,3S為失控限,繪制質(zhì)控圖,判斷是否在控。質(zhì)控規(guī)則參見(jiàn)室內(nèi)質(zhì)控操作規(guī)程.SOP文件。11.計(jì)算方法:以TruCalU復(fù)合校準(zhǔn)品尿酸校準(zhǔn)值校準(zhǔn)儀器后,在病人結(jié)果可報(bào)告范圍內(nèi),儀器直接報(bào)告可靠檢測(cè)結(jié)果,以mmol/L報(bào)告。

312.參考值范圍:(mmol/L)血清/血漿女性男性成人137~363214~488兒童0~5天113~470113~4701~4歲101~303131~4705~11歲178~381178~38112~14歲190~363190~44015~17歲190~381268~482尿液≤4.76mmol/d(正常飲食)≤3.57mmol/d(低嘌呤飲食)參考值因性別、年齡、飲食和地域的不同而有所差別。根據(jù)好的實(shí)驗(yàn)室經(jīng)驗(yàn),每個(gè)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)建立自己的參考值。13.臨床意義:

4尿酸和尿酸鹽是嘌呤代謝的最終產(chǎn)物。痛風(fēng)是高尿酸血癥最常見(jiàn)的并發(fā)癥,血清尿酸水平的升高導(dǎo)致在關(guān)節(jié)處生成尿酸鈉晶體。此外導(dǎo)致血液中尿酸升高的原因還有:排泄功能下降的腎臟疾病,饑餓,濫用藥物,過(guò)度飲酒或某些藥物的使用。高尿酸水平也是冠心病的間接危險(xiǎn)因子之一。低尿酸血癥較少見(jiàn),其與罕見(jiàn)的遺傳代謝紊亂有關(guān)。14.操作性能14.1線(xiàn)性范圍:17.8~1190mmol/L。14.2精密度:精密度的評(píng)估是根據(jù)NCCLS推薦的標(biāo)準(zhǔn)方法,AU2700批內(nèi)精密度小于3%,總精密度小于3%。用于分析的質(zhì)控血清和數(shù)據(jù)處理符合以上的NCCLS的規(guī)則。批內(nèi)精密度n=20(mmol/L)s(mmol/L)CV(%)批間精密度n=20(mmol/L)s(mmol/L)CV(%)樣品1163.62.51.55樣品1159.42.41.52樣品2318.24.00.74樣品2311.15.11.63樣品3600.74.60.77樣品3593.66.31.0614.3方法學(xué)比較:本公司的試劑盒(y)與某商品化試劑盒(x),同時(shí)對(duì)70個(gè)樣品進(jìn)行UA檢測(cè),將檢測(cè)結(jié)果作方法學(xué)比較,其統(tǒng)計(jì)結(jié)果如下:y=1.02x-26.2mmol/L;

5r=0.997。14.4靈敏度:本試劑的檢測(cè)限為17.8mmol/L。14.5病人結(jié)果可報(bào)告范圍:17.8~1190mmol/L。15.超出范圍結(jié)果處理:本法對(duì)尿酸的檢測(cè)范圍為17.8~1190mmol/L。當(dāng)樣品測(cè)定值超過(guò)上限時(shí),應(yīng)將樣品用9g/L氯化鈉溶液作1+1稀釋?zhuān)匦聹y(cè)定,結(jié)果乘以2。16.病危報(bào)警值的處理:當(dāng)尿酸測(cè)定值>720mmol/L時(shí),在經(jīng)過(guò)復(fù)查等確認(rèn)手段處理后應(yīng)及時(shí)向臨床主管醫(yī)生匯報(bào)。17.方法局限性17.1本法對(duì)尿酸的檢測(cè)范圍為17.8~1190mmol/L。當(dāng)樣品測(cè)定值超過(guò)上限時(shí),應(yīng)將樣品用9g/L氯化鈉溶液作1+1稀釋?zhuān)匦聹y(cè)定,結(jié)果乘以2。17.2干擾物質(zhì):當(dāng)樣品中膽紅素濃度£171mmol/L,血紅蛋白濃度£1.00g/L,甘油三酯濃度£22.6mmol/L時(shí)沒(méi)有觀察到干擾??箟难釙?huì)干擾檢測(cè)結(jié)果。如需克服抗壞血酸的干擾,推薦使用DiaSys公司提供的尿酸液體試劑(TOOS法)。

618.補(bǔ)救措施:當(dāng)儀器發(fā)生故障時(shí),迅速聯(lián)系儀器廠家進(jìn)行維修。19.參考文獻(xiàn)1.ThomasL,editor.Clinicallaboratorydiagnostics.1sted.Frankfurt:TH-BooksVerlagsgesellschaft;1998.p.208-14.2.NewmanDJ,PriceCP.Renalfunctionandnitrogenmetabolites.In:BurtisCA,AshwoodER.editors.Tietztextbookofclinicalchemistry.3rded.Philadelphia:W.B.SaundersCompany;1999.p.1204-7020.其他:儀器測(cè)定后的廢液及難降解的材料集中收集后按《檢驗(yàn)科廢物處置管理規(guī)定》執(zhí)行。

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