正交法優(yōu)化三七提取工藝的研究

正交法優(yōu)化三七提取工藝的研究

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1、正交法優(yōu)化三七提取工藝的研究作者:苗文莉,官鵬,趙新鋒,劉青,鄭曉暉【摘要】目的優(yōu)選三七的最佳提取工藝。方法以三七皂苷R1和人參皂苷Rg1為指標(biāo)進行正交試驗,采用膠束毛細(xì)管電色譜法測定含量,優(yōu)化影響三七提取工藝的條件。結(jié)果4倍量70%乙醇回流提取2次,每次1.5h,乙醚、正丁醇統(tǒng)一處理所得提取液中三七皂苷R1、人參皂苷Rg1的含量最高。結(jié)論試驗結(jié)果可為三七提取工藝的確定提供實驗依據(jù),該優(yōu)化工藝可為工業(yè)生產(chǎn)提供參考。  【關(guān)鍵詞】三七;三七皂苷R1;人參皂苷Rg1;膠束毛細(xì)管電色譜  StudyonprocessforextractionofPanaxnot

2、oginsengbyorthogonalexperiments  【Abstract】ObjectiveTooptimizetheconditionsfortheextractionofPanaxnotoginseng.MethodsConditionsfortheextractionentaldesignasguidedbythecontentofnotoginsenosideR1andginsenosidesRg1presentintheextract.ResultsTheoptimumconditionfortheextractionofP.noto

3、ginsengfusetheherbin70%alcoholfor1.5htountcorrespondingto4timesofthequantityofP.notoginseng.ThemostcontentofginsenosidesRg1andnotoginsenosideR1inPanaxnotoginsenginatebyMEKCafterthecollectionentalresultscanbeusedforconfirmingprocessforextractionofPanaxnotoginsengandofferingreferenc

4、esforit’sindustrialproduction.  【Key,河北永年光導(dǎo)纖維廠);pH計(美國梅特勒公司);超純水機(基因公司Maxima)?! ?.2藥材  三七藥材(市售,經(jīng)西安交通大學(xué)生藥教研室郭增軍老師鑒定為真品);三七皂苷R1(中國藥品生物制品鑒定所,批號:745-8801);人參皂苷Rg1(中國藥品生物制品鑒定所,批號:0703-200119);乙腈(美國Fisher公司,色譜純);超純水(自制);其他藥品均為分析純?! ?方法及結(jié)果  2.1毛細(xì)管電泳條件  以pH為9.0,20.0mmol/L的硼砂-硼酸緩沖體系加25mmol

5、/L的SDS與乙腈4∶1(V/V)為電泳緩沖溶液,以未涂層石英毛細(xì)管柱(內(nèi)徑50μm,有效長度41.5cm)為分離通道,壓力進樣(50mbar×10s),分離電壓20kV(25℃),檢測波長202nm,所有溶液在使用之前均用聚乙烯濾膜(0.45μm)過濾,并超聲除去細(xì)小氣泡,每次電泳分離前,毛細(xì)管柱先用0.1mol/LNaOH、超純水和電泳介質(zhì)依次分別沖洗3.0、3.0、5.0min,然后進行分離和測定?! ?.2對照品、內(nèi)標(biāo)及供試品溶液的配制  2.2.1對照品溶液的配制  精密稱取三七皂苷R1、人參皂苷Rg1對照品4.4900mg和4.0212mg,5

6、0%甲醇定容于2ml容量瓶中,制備成2.2450mg/ml、2.0106mg/ml的對照品溶液,4℃儲藏待用?! ?.2.2內(nèi)標(biāo)溶液的配制  精密稱取3.0105mg淫羊藿苷,50%的甲醇定容于10ml容量瓶中,制備成0.3010mg/ml的內(nèi)標(biāo)溶液,4℃儲藏待用?! ?.2.3供試品溶液的配制  收集提取液,用乙醚和水飽和的正丁醇各萃取3次,回收正丁醇,殘渣用50%的甲醇溶解并定容于10ml容量瓶中,4℃儲藏待用?! ?.3試驗方法  2.3.1提取方法  選擇乙醇為溶媒,用熱回流法對三七總皂苷進行提取,考察對提取效率影響較大的4項因素:溶劑濃度、溶劑用

7、量、回流次數(shù)、回流時間,每個因素各取三個水平。采用L9(34)正交表進行試驗,以提取液中三七皂苷R1和人參皂苷Rg1為考察指標(biāo),選擇最佳提取工藝?! ?.3.2正交試驗及結(jié)果  根據(jù)預(yù)試結(jié)果,擬定4個因素,每個因素3個水平。因素水平表見表1。表1因素水平表(略)  取三七藥材(過30目)10.0g,共取9份按下面正交表回流提取。因為此表中無空白列,以重復(fù)數(shù)據(jù)估算誤差,重復(fù)數(shù)為3[4]。三七中三七皂苷R1、人參皂苷Rg1均為已知成分,因此在進行方差分析時采用綜合加權(quán)評分法,將兩者中含量最高的項共定為100,結(jié)果為其綜合評分。實驗方案及結(jié)果見表2。對以上結(jié)果進

8、行方差分析。結(jié)果見表3。表2正交試驗設(shè)計及試驗結(jié)果(略)表3方差分

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