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《苦參堿對免疫性肝損傷保護作用的研究》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關內容在學術論文-天天文庫。
1、苦參堿對免疫性肝損傷保護作用的研究【摘要】目的探討苦參堿對免疫性肝損傷的治療作用。方法采用豬血清腹腔注射法，導致大鼠肝損傷。采用苦參堿肌注治療。利用電鏡技術和免疫組織化學方法觀察肝臟超微結構及貯脂細胞α肌動蛋白變化。結果苦參堿治療后肝細胞膜性結構損傷恢復或減輕，貯脂細胞減少，其胞質中α肌動蛋白表達減少。結論苦參堿對大鼠免疫性肝損傷有保護作用，并有量效關系?！娟P鍵詞】大鼠肝臟超微結構苦參堿免疫組織化學StudyontheProtectiveEffectofMatrineonImmuneLiverInjuryinRatsAbstract：Object
2、iveToinvestigatetheprotectiveeffectofmatrineonimmuneliverinjuryinwereadministratedintraabdominallyswineserumtoinduceimmuneliverinjurymodel,thenweretreatedwithmatrine.Theultrastructureoflivercellandα-SMAoffatstoringcellwereexaminedbyelectronicmicroscopicobservationandimmunohistoc
3、hemicalmembranestructureinjuryoflivercellwasrestored,thefatstoringcelldecreased,andtheexpressionofδ-SMAwerehadtheeffectofanti-immuneliverinjuryinadose-dependentmanner.Keywords：Rats；Liver；Ultrastructure;Matrine；Immunohistochemistry苦參堿是豆科植物苦參的提取物。由于苦參在我國分布廣泛，是傳統的中草藥，其提取物在臨床也被廣泛應用［
4、1，2］。為探討苦參堿對肝臟的保護作用，我們利用免疫性肝損傷動物模型及電子顯微技術和免疫組織化學染色方法，觀察不同劑量苦參堿對肝細胞和肝貯脂細胞的影響，旨在闡明苦參堿對肝臟保護作用的機制。為預防和治療肝病提供新途徑?！ ?材料與方法動物及分組成年Wister大鼠40只，隨機分為①正常對照組、②模型組、③苦參堿治療1組和④治療2組，每組10只。復制免疫性肝損傷模型及治療方法將②③④組大鼠腹腔注射豬血清，1次/周，持續(xù)8周；①組大鼠每周腹腔注射生理鹽水，共8周。之后治療③組肌注苦參堿注射液1mg/kg；連續(xù)治療6周。④組肌肉注射苦參堿/kg治療6周，然后麻
5、醉大鼠開腹取肝臟。組織固定及切片將數小塊肝組織固定于%戊二醛內，2h。然后常規(guī)制做超薄切片和鈾-鉛染色，供透射電鏡觀察。另取肝組織固定于10%中性甲醛內2h，常規(guī)石蠟包埋切片厚μm，裱于涂膠玻片，37℃貯存待染。免疫組織化學染色將石蠟切片常規(guī)脫蠟至水，常規(guī)SP免疫組化方法染色。其中α-肌動蛋白多克隆抗體及SP試劑盒均購自北京中杉金橋生物技術公司。按試劑盒規(guī)程操作。陰性對照用PBS代替Ⅰ抗，陽性對照為公司提供。統計學處理組間比較采用t檢驗?！ ?結果.1肝組織超微結構變化模型組肝臟內匯管區(qū)擴大，膠原纖維增多，甚至出現假小葉，間質細胞成分增多，其中有較多貯
6、脂細胞、成纖維細胞、淋巴細胞和少數粒細胞。電鏡下肝細胞核膜出現鋸齒狀凹陷，核周隙寬窄不均勻，異染色質增多；胞質內高電子密度脂滴增多，線粒體腫脹，嵴減少或消失，甚至可見部分線粒體膜破裂現象。內質網擴張，呈泡狀或不規(guī)則腔隙。粗面內質網脫顆粒。治療組肝細胞核膜凹陷減少，核周隙均勻。胞質內線粒體基本恢復正常，不見膜破裂現象，但仍有嵴減少表現；少數內質網脫顆粒。.2貯脂細胞超微結構變化及免疫組化染色正常對照組貯脂細胞小而少，分布在匯管區(qū)或小葉周邊竇周隙內。電鏡下細胞器少，超薄切片中常見其胞質中有1～3個脂滴樣包含物。模型組貯脂細胞增多，胞體稍增大，胞質中粗面內質
7、網及線粒體增多，脂滴樣包含物明顯減少。免疫組化染色后，αSMA呈棕黃色顆粒，分布于胞質中。模型αSMA著色深，治療組貯脂細胞減少，αSMA著色淺。經彩色圖象分析儀進行形態(tài)學定量分析。結果見表1。表1免疫組化染色質貯脂細胞數密度及灰度值 3討論采用豬血清注射法模擬免疫性肝損傷，其基本病理過程與病毒性肝炎所致肝纖維化類似。由于抗原抗體復合物沉積在肝內，導致肝微循環(huán)受阻，肝細胞及匯管區(qū)間質細胞代謝障礙，同時血管內皮細胞，庫氏細胞產生大量細胞因子，這些細胞因子進一步影響肝細胞及貯脂細胞啟動肝纖維化過程。導致肝細胞損傷和貯脂細胞增多及激活?？鄥A屬四環(huán)喹
8、諾里西啶生物堿,有廣泛的藥理作用［3］。臨床應用及實驗研究表明，苦參堿對中樞神經有鎮(zhèn)靜作用，對
