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1、再障的骨髓片檢查詳細(xì)內(nèi)容：一、制片骨髓涂片制作方法與血片制作方法基本相同，但因有骨髓小粒和脂肪滴，有核細(xì)胞較多，因此較血液粘稠，推片略難于血片，推片時(shí)角度要小一些，速度要慢一些，避免骨髓片過厚。二、染色傳統(tǒng)的骨髓涂片染色方法多用在Romanowsky染色基礎(chǔ)上改良而成的Wright和Giemsa染色法。20世紀(jì)70年代，顯微分光光度計(jì)和電子計(jì)算機(jī)的廣泛應(yīng)用，傳統(tǒng)的形態(tài)學(xué)描述已開始被精確科學(xué)的數(shù)字所取代，常規(guī)的骨髓細(xì)胞染色方法也隨之被重新研究和改良，形成了一些新改良的骨髓細(xì)胞染色方法。目前，臨床常用的染色方法主要有：（一）瑞氏(Wright)染色Ⅰ液：瑞氏染料(伊紅
2、、美藍(lán))1.0g，AR級以上甲醇600ml，甘油15ml。Ⅱ液：磷酸鹽緩沖液(pH6.4~6.8)使用時(shí)滴加Ⅰ液3~5滴0.5~1min后滴加等量Ⅱ液，染5~10分鐘（二）吉姆薩(Giemsa)染色Ⅰ液：吉姆薩染料(伊紅、天青)1.0g，甲醇66ml，甘油66ml。Ⅱ液：磷酸鹽緩沖液(pH6.4~6.8)使用時(shí)用Ⅱ液將Ⅰ液稀釋10-20倍，染色10~30min。（三）Marshall提出的標(biāo)準(zhǔn)化的Romanowsky染色Ⅰ液：美藍(lán)9.0mg，天青B(thiocyanate)17.0mg，伊紅13.0mg溶解于20ml1:1甘油甲醇。Ⅱ液：0.00132M的sore
3、nsen磷酸鹽緩沖液(pH6.4~6.8)，使用時(shí)將Ⅰ液用100mlⅡ液稀釋，染色10min。(四)R-G(Romanowsky-Giemsa)染色Ⅰ液：天青B130mg，伊紅Y65mg分別溶解于50ml甲醇作為貯存液。Ⅱ液：0.00132M的sorensen磷酸鹽緩沖液(pH6.4-6.8)使用時(shí)將Ⅰ液用Ⅱ液稀釋，染色10min。(五)wittekind1987年介紹的R-G染色Ⅰ液：天青B750mg溶于75mlDMSO，伊紅Y120mg溶于25mlDMSO混合作為貯存液。Ⅱ液：1:25V/VpH6.5HEPES緩沖液。使用時(shí)將Ⅰ液用Ⅱ液稀釋，染色15~35mi
4、n。三、骨髓涂片、染色的質(zhì)量保證涂片和染色過程中應(yīng)該注意的問題主要有：1．載玻片要潔凈，手指不要觸及玻片表面。2．穿刺后立即涂片并送檢，避免血液凝固同時(shí)保證骨髓涂片在新鮮狀態(tài)下染色。如遇特殊情況，陳舊玻片再染色時(shí)間不宜超過一周，以免蛋白質(zhì)變性，染色偏堿和形態(tài)變異。3．涂片一般不用抗凝劑以免影響細(xì)胞形態(tài)。4．涂片時(shí)注意保留片尾和邊緣，因體積較大的細(xì)胞多在此處。5．應(yīng)取骨髓小粒多的骨髓液制作涂片，至少要6～10張，自然干燥。6．涂片制成后，應(yīng)在空氣中快速搖動或吹干，防止細(xì)胞皺縮或溶血。7．骨髓涂片固定和染色的時(shí)間要較血片略長，最好放在低倍鏡下觀察，待染色滿意時(shí)再沖洗。
5、8．若染色過淺，可于涂片干燥后重染，如染色太深可于干燥后滴加甲醛數(shù)滴，稍停后沖洗四、骨髓涂片檢查的內(nèi)容及程序(一)檢查步驟（骨髓涂片檢查）1．低倍鏡檢查(1)觀察涂片情況 觀察涂片制作及染色是否滿意，取材是否是真正的骨髓液等。若取材不好、涂片過厚、染色較差，則分類計(jì)數(shù)結(jié)果將不可靠，甚至造成誤導(dǎo)，應(yīng)另選涂片、染色較好的骨髓片進(jìn)行檢查，或重新取材。(2)判斷有核細(xì)胞增生程度 低倍鏡下選擇細(xì)胞分布均勻部位觀察骨髓片有核細(xì)胞增生情況，根據(jù)骨髓片中有核細(xì)胞的密度或有核細(xì)胞與成熟紅細(xì)胞的比例來估計(jì)有核細(xì)胞的增生程度。對增生減低的標(biāo)本，應(yīng)觀察全部送檢骨髓片，以免漏檢有代表性的標(biāo)
6、本。骨髓有核細(xì)胞增生程度通常分為五級，見表2-2-1。當(dāng)增生程度介于兩級之間時(shí)，則將結(jié)果劃為上一級。例如在增生活躍與增生明顯活躍之間時(shí)，可判斷為增生明顯活躍。在臨床上這種增生程度的判斷在很大程度上靠檢查者的經(jīng)驗(yàn)來估計(jì)。骨髓增生程度的判斷受骨髓取材好壞的影響很大，一般來說，只有當(dāng)涂片中存在骨髓小粒時(shí)才宜于估計(jì)其增生程度，所以在骨髓穿刺時(shí)，最好將多余的穿刺液收集起來制作病理切片，通過組織切片觀察骨髓小粒中的造血細(xì)胞多少更具有真實(shí)性和可靠性。表,骨髓有核細(xì)胞增生程度五級估計(jì)標(biāo)準(zhǔn)(3)觀察全片巨核細(xì)胞的數(shù)量 巨核細(xì)胞數(shù)量變化較大，一張骨髓涂片上可有7~133個(gè)，平均36個(gè)
7、。如將骨髓膜標(biāo)準(zhǔn)化為1.5cm×3.0cm(4.5cm2)，則參考值為7~35個(gè)。在一般的骨髓檢查報(bào)告單上可憑經(jīng)驗(yàn)分為易找到、不易找到、增多三級記述。但在巨核細(xì)胞明顯增多或疑為特發(fā)性血小板減少性紫癜時(shí)，則應(yīng)作全片巨核細(xì)胞計(jì)數(shù)，并作分類。即在低倍鏡下每見到一個(gè)巨核細(xì)胞，即用高倍鏡或油鏡確定其發(fā)育階段和有無血小板形成，至少觀察25個(gè)巨核細(xì)胞。(4)觀察骨髓片邊緣和尾部 注意尋找有無體積較大的或成堆的特殊病理細(xì)胞，如轉(zhuǎn)移癌細(xì)胞、多核細(xì)胞、尼曼-匹克細(xì)胞、戈謝細(xì)胞、Reed-Stemberg細(xì)胞、海藍(lán)組織細(xì)胞等。2.油鏡檢查在低倍鏡觀察的基礎(chǔ)上，選擇較滿意的片膜段，換用油
8、鏡觀察。從
