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1、羅格列酮對RIN【摘要】研究羅格列酮(rosiglitazone,RSG)對胰島β細胞高糖損害的干預作用。方法采用生理濃度葡萄糖（5.5mmol/L）、生理濃度葡萄糖+羅格列酮、高濃度葡萄糖（33.3mmol/L）、高濃度葡萄糖+羅格列酮培養(yǎng)RIN-m細胞。以放射免疫法檢測胰島素分泌水平。以流式細胞儀及TUNEL法檢測RIN-m細胞凋亡。RT-PCR方法檢測胰腺十二指腸同源盒-1（pancreaticduodenalhomeoboxfactor-1，PDX-1）和胰島素mRNA表達。結果①RIN-m細胞與33.3mmo
2、l/L的葡萄糖孵育2周后胰島素分泌功能開始下降，細胞凋亡率增長2.7倍（P＜0.01）。而羅格列酮可以修復胰島素的分泌，降低RIN-m細胞凋亡率。②羅格列酮上調PDX-1（1.30±0.06vs.1.61±0.10，P＜0.01）和胰島素(1.75±0.09vs.1.98±0.11，P＜0.01)mRNA表達。結論高糖抑制胰島β細胞胰島素分泌，并誘導其凋亡。羅格列酮具有直接保護β細胞免于高糖毒性的作用。【關鍵詞】羅格列酮RIN-m細胞凋亡胰腺十二指腸同源盒-1Abstract:ObjectiveToinvestigat
3、etheeffectofrosiglitazone(R)onhighglucose-inducedRIN-mcellimpairment.MethodsTheRIN-mcellsediacontainingnormalglucose(5.5mmol/L,NG),NG+R50μmol/L(NG+R),highglucose(33.3mmol/L,HG)andHG+R50μmol/L(HG+R).Insulinsecretioneasuredbyradioimmunoassay.ApoptosisofRIN-mcellsi
4、nedbyinsituTUNELmethodbinedetry.ThemRNAexpressionofpancreaticduodenalhomeoboxfactor-1(PDX-1)andinsulineasuredbysemi-quantitativeRT-PCRassay.Results(1)After2cellsto2.7foldsanddecreasedtheinsulinsecretion(P＜0.05).TheadditionofRinhibitedthehighglucose-inducedincrea
5、seofapoptosisofRIN-mcellsandimprovedtheinsulinsecretion(P＜0.05).(2)IncubationofRIN-mcellsRNAexpressionofPDX-1［from（1.30±0.06）to(1.63±0.10)，P＜0.05］andthatofinsulin［from(1.75±0.09)to(1.98±0.11),P＜0.05］.ConclusionsHighglucosecaninducecellapoptosisanddecreaseinsulin
6、secretion.R(rosiglitazone)hasdirectprotectiveeffectsonβcellsagainsttheglucotoxicity.Keycell;apoptosis;pancreaticduodenalhomeoboxfactor-1（PDX-1）持續(xù)高糖環(huán)境導致胰島功能缺陷和胰島數量的減少［1］.freel細胞為對象，研究噻唑烷二酮類藥物羅格列酮對胰島β細胞高糖損害的早期干預作用。1材料和方法1.1材料1.1.1細胞RIN-m細胞購自北京百星高科技術貨物進出口公司（來源于ATCC
7、），系射線誘導的大鼠胰島細胞瘤。1.1.2試劑羅格列酮純品粉末由四川太極集團提供。無糖型RPMI1640購自Hyclone公司。胎牛血清購自加拿大PAA公司。大鼠胰島素放免測定試劑盒購自北京科美東雅公司。RT-PCR試劑盒和TUNEL細胞原位凋亡檢測試劑盒購自南京凱基生物公司。Annix-Ⅴ檢測試劑盒購自Biovision公司。PCR引物由上海生工合成。1.1.3儀器MJPTC-200PCR儀（MJResearchInc，USA），凝膠成像系統（上海復日科技公司），LEICAQ細胞在無糖型RPMI1640中常規(guī)培養(yǎng)，以
8、約5×107/L接種培養(yǎng)皿中，每2天換液1次，體外培養(yǎng)。實驗分4組，每組重復5次：①生理濃度葡萄糖（NG）組，培養(yǎng)液含5.5mmol/L葡萄糖；②NG+羅格列酮（NG+R）組，培養(yǎng)液含5.5mmol/L葡萄糖+50μmol/L羅格列酮；③高濃度葡萄糖(HG)組，培養(yǎng)液含33.3mmol/L葡萄糖；④HG+羅格列酮（HG+R）組，培
