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1、天山巖黃芪根中多糖的提取及含量測(cè)定論文海力茜陶爾大洪，孫蓮，馬合木提買買提明，何燕【關(guān)鍵詞】天山巖黃芪根;,,多糖含量;,,分光光度法摘要：目的研究天山巖黃芪根中多糖的含量。方法采用分光光度法測(cè)定天山巖黃芪根中多糖的含量，以葡萄糖為對(duì)照品，以苯酚-濃硫酸為顯色劑，在486nm處測(cè)定樣品溶液的吸光度。結(jié)果標(biāo)準(zhǔn)曲線為A=51.654C+0.0372，r=0.9998.freelsemenoviiRegeletHerd.MethodsUsesmethodinspectrophotometrictodeterminethePolysac
2、charideintherootsofHedysarumsemenoviiRegeletHerd.Taketheglucoseastheparison,takethephenol-strongsulfuricacidasthedeveloper,λ=486nmdeterminationsamplesolutionattractstheluminosity.ResultsThestandardcurveethodissimple,sensitiveandaccurate.KeysemenoviiRegeletHerd;Polysa
3、ccharide;SX-spectrophotometry豆科巖黃芪屬植物，具有補(bǔ)氣固表、利尿托毒、排膿、斂瘡生肌之功能［1］?，F(xiàn)代藥理研究證明其有強(qiáng)心、利尿、降壓、護(hù)肝、抗腎炎和提高免疫等作用。該屬植物化學(xué)成分較復(fù)雜，其中具有生物活性的成分有多糖、木質(zhì)素類、黃酮類化合物、香豆苯醚類、生物堿類、皂苷類、甾體類、氨基酸、微量元素等眾多的生物活性物質(zhì)［2~8］。天山巖黃芪HedysarumsemenoviiRegeletHerd為豆科(Leguminosea)巖黃芪屬(HedysarumLinn.)植物，分布于新疆烏魯木齊、伊犁、阿
4、勒泰、塔城等地區(qū)，經(jīng)過調(diào)研和文獻(xiàn)查新得知，對(duì)天山巖黃芪中多糖的提取及含量測(cè)定未見報(bào)道。因此，為了資源開發(fā)，我們首次對(duì)天山巖黃芪中多糖的提取及含量測(cè)定進(jìn)行研究。多糖不僅是機(jī)體的重要組成部分，還具有提高機(jī)體免疫、抗菌、抗病毒、抗衰老、抗腫瘤、抗突變、降血脂、降血糖、防輻射以及改善動(dòng)物生產(chǎn)性能等多種生物活性，同時(shí)由于它自身對(duì)細(xì)胞毒性極小，對(duì)正常細(xì)胞影響很小，因此多糖作為藥物對(duì)于治療多種免疫缺損疾病和自身免疫疾病有顯著的效果。為此，我們采用可見分光光度法對(duì)天山巖黃芪根中多糖的含量進(jìn)行了測(cè)定，為今后進(jìn)一步地研究、開發(fā)該藥用植物資源提供參考
5、。1材料與試劑1.1樣品來源天山巖黃芪6月份采自新疆烏魯木齊東山區(qū)，采后洗凈，晾干，60℃烘干，粉碎后過60目篩備用。1.2儀器與試劑SX721分光光度計(jì)(上海第三分析儀器廠)，紫外分光光度儀，超聲儀(SK8210HP)，水浴鍋，酒精計(jì)，漏斗，分液漏斗，無水葡萄糖，苯酚分析純，濃硫酸，95%乙醇，氯仿，正丁醇，活性碳。2方法與結(jié)果2.1多糖的提取與精制［9,10］天山巖黃芪根粉100g加水適量超聲提取3次，30min/次，過濾，合并濾液，濃縮，加95%醇至含醇量為80%，靜置過夜（4℃），過濾，分離出沉淀，加適量水溶解，加95%
6、醇至含醇量為80%，再靜置過夜（4℃），過濾，分離出沉淀，加水溶解，除蛋白（氯仿∶正丁醇=4∶1），共除20次，加活性炭脫色，抽濾，加95%醇至含醇量為80%，靜置過夜（4℃，過濾，分離出沉淀，冷凍干燥得多糖（0.5051g），密封備用。2.2溶液的制備2.2.1葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備精密稱取105℃干燥至恒重的葡萄糖0.1g，置100mg容量瓶中，加蒸餾水至刻度，再精密吸取10ml于另一容量瓶中，再加蒸餾水至刻度，搖勻備用，得0.1mg/ml的葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液。2.2.2苯酚溶液的制備稱取苯酚100g，加鋅片0.1g，NaHCO3
7、0.05g，蒸餾，收集182℃餾分，稱取此餾分5g，加蒸餾水95ml，置棕色瓶中備用，得濃度為5%的苯酚溶液。2.2.3天山巖黃芪多糖液的制備精密稱取干燥至恒重的天山巖黃芪多糖0.1g，置100mg容量瓶中，加蒸餾水至刻度，再精密吸取10ml于另一容量瓶中，再加蒸餾水至刻度，搖勻備用，得0.1mg/ml的天山巖黃芪多糖溶液。2.3最大吸收波長(zhǎng)的選擇分別配制0.1mg/ml的葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖、甘露糖、醛糖溶液，分別精密吸取1ml于具塞試管中，分別加苯酚試液1ml，搖勻，迅速加濃硫酸5ml，振搖2min后，旋轉(zhuǎn)于沸水浴中加熱
8、15min，取出置冷水中冷卻置室溫，以苯酚-濃硫酸溶液為空白，用紫外分光光度儀在400~800nm范圍內(nèi)，掃描光譜圖，得上述糖溶液的最大吸收分別為486，488，479，488，479nm。以同樣的方法處理天山巖黃芪多糖樣品溶液，在486nm處有最大吸收。2.4
