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《乙酰肝素酶調(diào)控vegf-c的表達及其對胰腺癌體外侵襲凋亡的影響》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在應(yīng)用文檔-天天文庫。
1、分類號：R735．9單位代碼：10422密級：公開學(xué)號：201213606⑧∥霧辦孑SHANDONGUNIVERSITY碩士學(xué)位論文ThesisforMasterDegree論文題目：乙酰肝素酶調(diào)控VEGF-C的表達及其對胰腺癌細胞體外侵襲凋亡的影響HeparanaseregulatesVEGF—CexpressionanditsimpactOilmetastasis。andapoptosisofpancreaticcancercellsinvitro作者姓名張斌培養(yǎng)單位醫(yī)學(xué)院專業(yè)名稱外科學(xué)(普外)指導(dǎo)教師曾慶東主任醫(yī)師合作導(dǎo)師呂
2、斌副主任醫(yī)師2015年5月10日萬方數(shù)據(jù)JfUlllHlllIIIIIIUIIIIIIIIlU』Y2791886原創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明：所呈交的學(xué)位論文，是本人在導(dǎo)師的指導(dǎo)下，獨立進行研究所取得的成果。除文中已經(jīng)注明引用的內(nèi)容外，本論文不包含任何其他個人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的科研成果。對本文的研究做出重要貢獻的個人和集體，均已在文中以明確方式標明。本聲明的法律責(zé)任由本人承擔(dān)。論文作者簽名：日期：丕!生：生二至[關(guān)于學(xué)位論文使用授權(quán)的聲明本人完全了解山東大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)文論文的規(guī)定，同意學(xué)校保留或向國家有關(guān)部門或機構(gòu)送交論文的
3、復(fù)印件或電子版，允許論文被查閱和借閱；本人授權(quán)山東大學(xué)可以將本學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進行檢索，可以采用影印、縮印或其他復(fù)制手段保存論文和匯編本學(xué)位論文。(保密論文在解密后應(yīng)遵守此規(guī)定)論文作者簽名：導(dǎo)師簽名：叢日期：萬方數(shù)據(jù)目錄中文摘要1Abstract．．3符號說明。5前言．6材料與方法．81．1細胞培養(yǎng)與傳代．．81．2設(shè)計并合成人HPSE基因過表達載體．．81．3設(shè)計合成針對HPSE基因的siRNA91．4脂質(zhì)體介導(dǎo)的重組質(zhì)粒、siRNA轉(zhuǎn)染宿主細胞．．91．5Reversetransrciption—PCR
4、及Realtime—qPCR檢測HPSE及VEGF—C的rnl州A水平一91．6Westernblot檢鋇UHPSE及VEGF—C蛋白的表達情況．．101．7細胞劃痕實驗與Transwell侵襲實驗．．111．8流式細胞術(shù)檢測HPSE抑制對細胞凋亡影響．111．9實驗數(shù)據(jù)的處理．．11結(jié)果一122．1轉(zhuǎn)染效率．122．2重組質(zhì)粒及不同干擾片段對HPSE及VEGF—C的mRNA水平影響．122．3免疫印跡法檢測各實驗組HPSE與VEGF-C蛋白表達量的變化一122．4各實驗組細胞體外侵襲遷移能力的變化．132．5抑審OHPSE對細胞
5、凋亡的影響13討論．．14文獻綜述17附錄．29參考文獻．34致謝4l發(fā)表論文．42萬方數(shù)據(jù)Cataloguechineseabstract．．1Englishabstract··--··-········-·······-··-3Symboldescription··-··········--······-5Introduction．6Materialsandmethods．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．81．1Cellculture
6、andpassage··81．2HPSEexpressionvectorconstruction81．3SynthesisofsiRNA···-91．4Transienttransfection91．5SemiquantitativePCRandReal—timequantitativePCR··91．6Immunoblottingassay101．7TranswellinvasionassayandScratch-woundassay·······························111．8Flowcytometr
7、y····-·····-···-··-······--····--··-······-··-······-·········-··111．9Statisticalanalysis······················-····················-···-··-···11Resultsl22．1Transfectionefficiency122．2TheinfluencesofGV230／HPSEandHPSE—siRNAsonmRNAlevelsofHPSEandVEGF．C．·122．3Expressiono
8、fHPSEandVEGF-Cproteins122．4BxPC一3cellsinvasionuponHPSEoverexpressionandsuppression132．5TheapoptosisofcellsuponHPSEinterferen
