lps處理對豬背最長肌能量代謝的影響與其機制分析

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1、萬方數(shù)據(jù)摘要LPS對豬背最長肌能量代謝的影響及其機制研究本實驗旨在探索LPS模擬的炎癥模型下，豬背最長肌中能量代謝的變化，以期能全面的評價炎癥對豬骨骼肌的影響，并闡明可能的機制，為今后找到合適的緩解治療藥物提供理論基礎。實驗分為兩組：正常對照組和LPS處理組，分析肌肉中ATP、ADP等的濃度，研究LPS處理后肌肉糖酵解水平、線粒體功能和內(nèi)質網(wǎng)功能的變化情況，并檢測了胞漿和線粒體中鈣離子濃度的變化；此外還分析了LPS處理對肌肉生長分化相關調(diào)節(jié)因子基因表達情況的影響。1LPS處理對豬背最長肌能量代謝的影響選擇12±0．5kg的雄

2、性杜X長X大三元仔豬12頭，按體重相接近隨機分為2組：對照組和LPS(15gg／kgBW)j!i射組，對照組注射相同體積的生理鹽水。注射6h后屠宰采樣，用含抗凝素的EP管收集頸部靜脈血液樣品，并制得血清同采集的肌肉組織一并放入．80℃冰箱保存。利用全自動生化分析儀，檢測血液中的血糖和乳酸含量；利用高壓液相檢測肌肉組織中ATP、ADP等能量基本物質的含量；利用試劑盒檢測了相關酶活和鈣離子濃度；并利用RT-PCR和WesternBlot技術檢測了相關基因、蛋白的表達水平。結果顯示，LPS注射6h后血糖并沒有發(fā)生顯著性變化，但是血

3、液中乳酸卻顯著性上升。NADH的含量顯著性上調(diào)(P<0．05)，NADH／NAD+的比值和ATP的含量有上升的趨勢(P=n064)；ATP、ADP、AMP和NAD+無顯著性變化。糖酵解的大部分關鍵基因都顯著性上升(P<0．05)；糖酵解通路的3個關鍵酶HK、LDH和PK的酶活都顯著性上調(diào)了(P

4、網(wǎng)功能之間相互偶聯(lián)，我們檢測了內(nèi)質網(wǎng)的狀態(tài)，結果顯示內(nèi)質網(wǎng)應激的大部分基因都顯著性上調(diào)，標志性蛋白BIP顯著性下降(P<0．05)，CHOP蛋白顯著性上調(diào)(P<0．05)。鈣離子的檢測結果顯示，細胞內(nèi)總體鈣離子的濃度無顯著萬方數(shù)據(jù)LPS對豬背最長肌能量代謝的影響及其機制研究性變化，但是線粒體內(nèi)的鈣離子濃度顯著升高(P<0．05)。我們的結果提示LPS處理顯著增強了肌細胞的糖酵解途徑，并可能通過內(nèi)質網(wǎng)和線粒體之間的鈣交流，介導了肌細胞線粒體的功能紊亂。2肌肉注射LPS對豬背最長肌生長相關基因的影響選擇12頭體重約為12±O．5

5、始的雄性杜X長X大三元仔豬，并隨機分為2組：對照組和LPS(15gg／kgBⅥ注射組，對照組注射相同體積的生理鹽水。注射6h后屠宰采樣，樣品保存于．80"C冰箱。RT-PCR的結果顯示LPS處理組IGF．1的基因顯著性下降(P

6、1和MuRF．1的基因顯著性上調(diào)(P<0．05)。蛋白檢測的結果顯示MuRF-1無顯著性變化。MSTN的基因和蛋白表達水平均無顯著性變化。檢測MRFs家族的基因和蛋白表達，結果顯示MyoD和MyoG都顯著性下降(P<0．05)，而Myf5和Myf6的基因顯著性上調(diào)(P<0．05)。MyoG、Myf5和Myf6的蛋白檢測顯示其表達均無顯著性變化。我們的結果提示LPS注射后顯著下調(diào)了IGF．1的表達，同時也增加肌肉萎縮的自噬和泛素蛋白酶系統(tǒng)相關基因的表達，可能對肌肉生長產(chǎn)生不利影響。關鍵詞：豬；LPS；背最長??；糖酵解；線粒體Ⅱ

7、萬方數(shù)據(jù)ABSTRACTTHEEFFECTOFLPSONENERGYMETABOLISMINTHESKELETALMUSCLEOFPIGThisstudywasaimedtoinvestigatetheeffectofLPStreatmentonmuscleenergymetabolismandgrowthinpigs．Understandingtheseunderlyingmechanismsmayprovidenewtherapeuticstrategiesfortreatingmetabolicdiseasesindu

8、cedbyLPSinmuscle．1TheeffectofLPSinjectiononenergymetabolisminpigLDmuscle．Weemployed12growingpiglets(LargeWhitexLandracexDuroc)withanaveragebodywe