lps處理對(duì)豬背最長(zhǎng)肌能量代謝的影響與其機(jī)制分析

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1、萬(wàn)方數(shù)據(jù)摘要LPS對(duì)豬背最長(zhǎng)肌能量代謝的影響及其機(jī)制研究本實(shí)驗(yàn)旨在探索LPS模擬的炎癥模型下，豬背最長(zhǎng)肌中能量代謝的變化，以期能全面的評(píng)價(jià)炎癥對(duì)豬骨骼肌的影響，并闡明可能的機(jī)制，為今后找到合適的緩解治療藥物提供理論基礎(chǔ)。實(shí)驗(yàn)分為兩組：正常對(duì)照組和LPS處理組，分析肌肉中ATP、ADP等的濃度，研究LPS處理后肌肉糖酵解水平、線粒體功能和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)功能的變化情況，并檢測(cè)了胞漿和線粒體中鈣離子濃度的變化；此外還分析了LPS處理對(duì)肌肉生長(zhǎng)分化相關(guān)調(diào)節(jié)因子基因表達(dá)情況的影響。1LPS處理對(duì)豬背最長(zhǎng)肌能量代謝的影響選擇12±0．5kg的雄

2、性杜X長(zhǎng)X大三元仔豬12頭，按體重相接近隨機(jī)分為2組：對(duì)照組和LPS(15gg／kgBW)j!i射組，對(duì)照組注射相同體積的生理鹽水。注射6h后屠宰采樣，用含抗凝素的EP管收集頸部靜脈血液樣品，并制得血清同采集的肌肉組織一并放入．80℃冰箱保存。利用全自動(dòng)生化分析儀，檢測(cè)血液中的血糖和乳酸含量；利用高壓液相檢測(cè)肌肉組織中ATP、ADP等能量基本物質(zhì)的含量；利用試劑盒檢測(cè)了相關(guān)酶活和鈣離子濃度；并利用RT-PCR和WesternBlot技術(shù)檢測(cè)了相關(guān)基因、蛋白的表達(dá)水平。結(jié)果顯示，LPS注射6h后血糖并沒(méi)有發(fā)生顯著性變化，但是血

3、液中乳酸卻顯著性上升。NADH的含量顯著性上調(diào)(P<0．05)，NADH／NAD+的比值和ATP的含量有上升的趨勢(shì)(P=n064)；ATP、ADP、AMP和NAD+無(wú)顯著性變化。糖酵解的大部分關(guān)鍵基因都顯著性上升(P<0．05)；糖酵解通路的3個(gè)關(guān)鍵酶HK、LDH和PK的酶活都顯著性上調(diào)了(P

4、網(wǎng)功能之間相互偶聯(lián)，我們檢測(cè)了內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的狀態(tài)，結(jié)果顯示內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激的大部分基因都顯著性上調(diào)，標(biāo)志性蛋白BIP顯著性下降(P<0．05)，CHOP蛋白顯著性上調(diào)(P<0．05)。鈣離子的檢測(cè)結(jié)果顯示，細(xì)胞內(nèi)總體鈣離子的濃度無(wú)顯著萬(wàn)方數(shù)據(jù)LPS對(duì)豬背最長(zhǎng)肌能量代謝的影響及其機(jī)制研究性變化，但是線粒體內(nèi)的鈣離子濃度顯著升高(P<0．05)。我們的結(jié)果提示LPS處理顯著增強(qiáng)了肌細(xì)胞的糖酵解途徑，并可能通過(guò)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和線粒體之間的鈣交流，介導(dǎo)了肌細(xì)胞線粒體的功能紊亂。2肌肉注射LPS對(duì)豬背最長(zhǎng)肌生長(zhǎng)相關(guān)基因的影響選擇12頭體重約為12±O．5

5、始的雄性杜X長(zhǎng)X大三元仔豬，并隨機(jī)分為2組：對(duì)照組和LPS(15gg／kgBⅥ注射組，對(duì)照組注射相同體積的生理鹽水。注射6h后屠宰采樣，樣品保存于．80"C冰箱。RT-PCR的結(jié)果顯示LPS處理組IGF．1的基因顯著性下降(P

6、1和MuRF．1的基因顯著性上調(diào)(P<0．05)。蛋白檢測(cè)的結(jié)果顯示MuRF-1無(wú)顯著性變化。MSTN的基因和蛋白表達(dá)水平均無(wú)顯著性變化。檢測(cè)MRFs家族的基因和蛋白表達(dá)，結(jié)果顯示MyoD和MyoG都顯著性下降(P<0．05)，而Myf5和Myf6的基因顯著性上調(diào)(P<0．05)。MyoG、Myf5和Myf6的蛋白檢測(cè)顯示其表達(dá)均無(wú)顯著性變化。我們的結(jié)果提示LPS注射后顯著下調(diào)了IGF．1的表達(dá)，同時(shí)也增加肌肉萎縮的自噬和泛素蛋白酶系統(tǒng)相關(guān)基因的表達(dá)，可能對(duì)肌肉生長(zhǎng)產(chǎn)生不利影響。關(guān)鍵詞：豬；LPS；背最長(zhǎng)??；糖酵解；線粒體Ⅱ

7、萬(wàn)方數(shù)據(jù)ABSTRACTTHEEFFECTOFLPSONENERGYMETABOLISMINTHESKELETALMUSCLEOFPIGThisstudywasaimedtoinvestigatetheeffectofLPStreatmentonmuscleenergymetabolismandgrowthinpigs．Understandingtheseunderlyingmechanismsmayprovidenewtherapeuticstrategiesfortreatingmetabolicdiseasesindu

8、cedbyLPSinmuscle．1TheeffectofLPSinjectiononenergymetabolisminpigLDmuscle．Weemployed12growingpiglets(LargeWhitexLandracexDuroc)withanaveragebodywe