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《intermedin對低氧誘導的大鼠肺動脈平滑肌細胞凋亡和增殖的影響》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關內容在學術論文-天天文庫。
1、溫州醫(yī)學院碩士學位論文Intermedin對低氧誘導的大鼠肺動脈平滑肌細胞凋亡和增殖的影響姓名：薛峰申請學位級別：碩士專業(yè)：病理學與病理生理學指導教師：龔永生2012-05-26溫州醫(yī)學院碩上學位論文Intermedin對低氧誘導的大鼠肺動脈平滑肌細胞凋亡和增殖的影響中文摘要目的：1．研究低氧條件下，大鼠肺動脈平滑肌細胞凋亡與內質網應激途徑的關系。2．研究低氧條件下，新的小分子活性肽intermedin(IMD)對大鼠肺動脈平滑肌細胞凋亡的影響。3．研究IMD對低氧誘導的大鼠肺動脈平滑肌細胞增殖的影響。方法：組織塊貼壁法原代培養(yǎng)肺動脈平滑肌細胞，用胰蛋白酶
2、消化法傳代細胞，實驗用高純度4～6代生長良好的肺動脈平滑肌細胞。實驗分組：①常氧對照組：在37。C，21％02，5％C02條件下培養(yǎng)②低氧組：在37。C，1％02，5％C02條件下培養(yǎng)③IMD組：在37。C，1％02，5％C02條件下培養(yǎng)+IMD干預(用藥濃度lO～、10～、10～mol／L)。Hoechst和Tunel染色計數凋亡細胞檢測凋亡率；化學比色法檢測細胞培養(yǎng)液中乳酸脫氫酶含量；分光光度比色法檢測caspase．3酶活性水平；Westernblot和實時定量PCR法分別檢測caspase．12、GRP78、GRP94蛋白和mRNA表達水平；Brd
3、u和CCK．8法檢測細胞增殖率。用SPSSl2．0軟件統(tǒng)計分析，所有實驗數據以i姆表示，p<0．05時認為差異有統(tǒng)計學意義。結果：1．細胞凋亡率：低氧組明顯高于常氧組(p<0．01)；IMD。9組、IMD。8組均高于低氧組(p<0．05)；而IMD。7組明顯高于低氧組(p<0．01)。2．caspase．3酶活性：低氧組明顯高于常氧對照組(矽<0．001)；IMD’9組、IMD{組與低氧組相比無明顯變化(p>O．05)；而IMD。7組高于低氧組(p<0．05)。3．GRP94、GRP78及caspase．12蛋白表達水平：低氧組明顯高于常氧組(p<0．01
4、)；而低氧組與IMD母組、IMD喝組、IMD。7組之間蛋白表達沒有明顯的變化(p>0．05)。4．caspase．12、caspase一3、GRP78及GRP94基因表達水平：低氧組明顯高于常氧組(p0．05)；而IMD。組caspase．3、GRP78、GRP94基因表達均高于低氧組(p<0．05)。5．細胞增殖率：低氧組高于常氧組(p0
5、．05)。6．LDH含量：低氧組顯著高于常氧組(p<0．01)，而IMD。組和IMD培組低于低氧組(p<0．05)。結論：1、內質網應激介導的細胞凋亡途徑參與了低氧性肺動脈平滑肌細胞的凋亡：外源性IMD具有促進肺動脈平滑肌細胞凋亡的作用，但內質網應激凋亡途徑可能不是其促進細胞凋亡的主要途徑。2、外源性IMD具有抑制肺動脈平滑肌細胞增殖的作用。關鍵詞：肺動脈平滑肌細胞；intermedin；低氧；凋亡；增殖；內質網應激溫州醫(yī)學院碩仁學位論文EffectsofIntermedinonApoptosisandProliferationinRatPulmonary
6、ArterySmoothMuscleCellsundertheHypoxicConditionAbstractobjective：1．Toinvestigateeffectofhypoxiaonratpulmonaryarterialsmoothmusclecells(PSMCs)apoptosisanditsendoplasmicreticulumstresspmhway．2．Toinvestigateeffectofthenewsmallmoleculeactivepeptideintermedin(IMD)ontheapoptosisofhypoxi
7、a-inducedPSMCs．3．ToinvestigateeffectoflMDontheproliferationofhypoxia-inducedPSMCs．Methods：Ratpulmonaryarterialsmoothmusclecells(PSMCs)whichwereseparatedfromratpulmonaryarterieswereculturedbytheexplant-attachedmethod．AndtheculturedPSMCswerepassagebytrypsindigestionmethod．The3tO5gen
8、erationsofgoodgrowthofPSMCswerech
