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《intermedin對(duì)低氧誘導(dǎo)的大鼠肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞凋亡和增殖的影響》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫(kù)。
1、溫州醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文Intermedin對(duì)低氧誘導(dǎo)的大鼠肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞凋亡和增殖的影響姓名：薛峰申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：病理學(xué)與病理生理學(xué)指導(dǎo)教師：龔永生2012-05-26溫州醫(yī)學(xué)院碩上學(xué)位論文Intermedin對(duì)低氧誘導(dǎo)的大鼠肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞凋亡和增殖的影響中文摘要目的：1．研究低氧條件下，大鼠肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞凋亡與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激途徑的關(guān)系。2．研究低氧條件下，新的小分子活性肽intermedin(IMD)對(duì)大鼠肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞凋亡的影響。3．研究IMD對(duì)低氧誘導(dǎo)的大鼠肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞增殖的影響。方法：組織塊貼壁法原代培養(yǎng)肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞，用胰蛋白酶
2、消化法傳代細(xì)胞，實(shí)驗(yàn)用高純度4～6代生長(zhǎng)良好的肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞。實(shí)驗(yàn)分組：①常氧對(duì)照組：在37。C，21％02，5％C02條件下培養(yǎng)②低氧組：在37。C，1％02，5％C02條件下培養(yǎng)③IMD組：在37。C，1％02，5％C02條件下培養(yǎng)+IMD干預(yù)(用藥濃度lO～、10～、10～mol／L)。Hoechst和Tunel染色計(jì)數(shù)凋亡細(xì)胞檢測(cè)凋亡率；化學(xué)比色法檢測(cè)細(xì)胞培養(yǎng)液中乳酸脫氫酶含量；分光光度比色法檢測(cè)caspase．3酶活性水平；Westernblot和實(shí)時(shí)定量PCR法分別檢測(cè)caspase．12、GRP78、GRP94蛋白和mRNA表達(dá)水平；Brd
3、u和CCK．8法檢測(cè)細(xì)胞增殖率。用SPSSl2．0軟件統(tǒng)計(jì)分析，所有實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以i姆表示，p<0．05時(shí)認(rèn)為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)果：1．細(xì)胞凋亡率：低氧組明顯高于常氧組(p<0．01)；IMD。9組、IMD。8組均高于低氧組(p<0．05)；而IMD。7組明顯高于低氧組(p<0．01)。2．caspase．3酶活性：低氧組明顯高于常氧對(duì)照組(矽<0．001)；IMD’9組、IMD{組與低氧組相比無(wú)明顯變化(p>O．05)；而IMD。7組高于低氧組(p<0．05)。3．GRP94、GRP78及caspase．12蛋白表達(dá)水平：低氧組明顯高于常氧組(p<0．01
4、)；而低氧組與IMD母組、IMD喝組、IMD。7組之間蛋白表達(dá)沒(méi)有明顯的變化(p>0．05)。4．caspase．12、caspase一3、GRP78及GRP94基因表達(dá)水平：低氧組明顯高于常氧組(p0．05)；而IMD。組caspase．3、GRP78、GRP94基因表達(dá)均高于低氧組(p<0．05)。5．細(xì)胞增殖率：低氧組高于常氧組(p0
5、．05)。6．LDH含量：低氧組顯著高于常氧組(p<0．01)，而IMD。組和IMD培組低于低氧組(p<0．05)。結(jié)論：1、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激介導(dǎo)的細(xì)胞凋亡途徑參與了低氧性肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞的凋亡：外源性IMD具有促進(jìn)肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞凋亡的作用，但內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激凋亡途徑可能不是其促進(jìn)細(xì)胞凋亡的主要途徑。2、外源性IMD具有抑制肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞增殖的作用。關(guān)鍵詞：肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞；intermedin；低氧；凋亡；增殖；內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激溫州醫(yī)學(xué)院碩仁學(xué)位論文EffectsofIntermedinonApoptosisandProliferationinRatPulmonary
6、ArterySmoothMuscleCellsundertheHypoxicConditionAbstractobjective：1．Toinvestigateeffectofhypoxiaonratpulmonaryarterialsmoothmusclecells(PSMCs)apoptosisanditsendoplasmicreticulumstresspmhway．2．Toinvestigateeffectofthenewsmallmoleculeactivepeptideintermedin(IMD)ontheapoptosisofhypoxi
7、a-inducedPSMCs．3．ToinvestigateeffectoflMDontheproliferationofhypoxia-inducedPSMCs．Methods：Ratpulmonaryarterialsmoothmusclecells(PSMCs)whichwereseparatedfromratpulmonaryarterieswereculturedbytheexplant-attachedmethod．AndtheculturedPSMCswerepassagebytrypsindigestionmethod．The3tO5gen
8、erationsofgoodgrowthofPSMCswerech
