apha和opar對(duì)副溶血弧菌密度感應(yīng)系統(tǒng)相關(guān)基因的轉(zhuǎn)錄調(diào)控機(jī)制研究

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1、萬(wàn)方數(shù)據(jù)軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院研究生學(xué)位論文獨(dú)創(chuàng)性聲明秉承軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院嚴(yán)謹(jǐn)?shù)膶W(xué)風(fēng)和科研作風(fēng),本人聲明所呈交的學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下獨(dú)立進(jìn)行的研究工作和取得的研究成果,除了文中特別加以標(biāo)注和致謝之處外,論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫(xiě)過(guò)的研究成果,也不包含為獲得芏圭匡鱟盤(pán)堂瞳或其它教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位或證書(shū)而使用過(guò)的材料。與我一同工作的同志對(duì)本研究所做的任何貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說(shuō)明并表示了謝意。論文作者簽字:墮"1::,§t!/-簽字日期:塑!竺年二£月蘭生日軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院保護(hù)知識(shí)產(chǎn)權(quán)聲明本學(xué)位論文作者完全了解芏主匡堂盤(pán)堂瞳對(duì)研究生在學(xué)其間撰寫(xiě)的論文知識(shí)產(chǎn)權(quán)保護(hù)的相關(guān)規(guī)定。本人撰寫(xiě)的

2、論文是在導(dǎo)師具體指導(dǎo)下,并得到相關(guān)研究經(jīng)費(fèi)支持下完成,其數(shù)據(jù)和研究成果歸屬于導(dǎo)師和作者本人,知識(shí)產(chǎn)權(quán)單位屬生圭匡堂銎堂瞳。本人保證畢業(yè)后,以本論文數(shù)據(jù)和資料發(fā)表論文或使用論文工作成果時(shí)署名第一單位仍然為芏主匡堂盤(pán)堂瞳。星主匡堂盤(pán)堂院有權(quán)保留學(xué)位論文及其電子版,通過(guò)網(wǎng)站公布論文的全部或部分內(nèi)容,可以采用影印、縮印或其他復(fù)制手段保存論文、匯編以供查閱和借閱。(涉密和延期公開(kāi)學(xué)位論文在解密后適用本聲明)論文作者簽字:指導(dǎo)教師簽字.o簽字日期:蘭:!!年j二月駕L日簽字日期:趁!生年』—叢日萬(wàn)方數(shù)據(jù)目錄目錄????????????????????????????????l本文中的縮略詞?

3、??????????????????????????5摘要????????????????????????????????7Abstract???????????????????????????????????????..11前言????????????????????????????????..15翮『雷???????????????????????????????????????..1)1.副溶血弧菌的生物學(xué)特性???????????????????..152.副溶血弧菌致病性與其主要毒力因子???????????????152.1耐熱直接溶血素(TDH)??????????

4、?????????..162.2耐熱相關(guān)溶血素(TIm)????????????????????162.3III型分泌系統(tǒng)(T3SS)??????????????????.172.4粘附因子?????????????????????????.193.弧菌生物膜形成???????????????????????193.1鞭毛?????????????????????????????..203.2IV型菌毛????????????????????????2l3.3多糖????????????????????????????????.223.4c.di.GMP信號(hào)分子?????????

5、?????????????234.弧菌密度感應(yīng)系統(tǒng)與其核心調(diào)控子????????????????245.弧菌毒力調(diào)控子ToxR?????????????????????266.調(diào)控子蛋白VPA0606?????????????????????267.細(xì)菌基因轉(zhuǎn)錄調(diào)控????????????????????????268.研究目的、研究假設(shè)和技術(shù)路線?????????????????27材料和方法????????????????????????????.291.材料??????????????????????????????????..291.1菌株和質(zhì)粒?????????????

6、??????????291.2主要試劑(盒)?????????????????????..291.3主要儀器????????????????????????291.4本文所用引物匯總????????????????????..302.方法??????????????????????????????????..312.1菌種準(zhǔn)備與培養(yǎng)?????????????????????..312.2總RNA提取???????????????????????312.3逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)???????????????????????.322.4操縱子鑒定???????????????????????33

7、1萬(wàn)方數(shù)據(jù)目錄2.5RealtimeQuantitativePCR(qRT-PCR)????????????????????.332.6引物延伸實(shí)驗(yàn)(Primerextensionassay)????????????一342.7LacZ報(bào)告基因融合實(shí)驗(yàn)(LacZfusion)????????????一362.8凝膠遷移實(shí)驗(yàn)(Electrophoreticmobilityshittassay,EMSA)????372.9DNaseI足跡實(shí)驗(yàn)(DNaseIfootprinting)?

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