apha和opar對副溶血弧菌密度感應系統(tǒng)相關基因的轉(zhuǎn)錄調(diào)控機制研究

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1、萬方數(shù)據(jù)軍事醫(yī)學科學院研究生學位論文獨創(chuàng)性聲明秉承軍事醫(yī)學科學院嚴謹?shù)膶W風和科研作風,本人聲明所呈交的學位論文是本人在導師指導下獨立進行的研究工作和取得的研究成果,除了文中特別加以標注和致謝之處外,論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果,也不包含為獲得芏圭匡鱟盤堂瞳或其它教育機構(gòu)的學位或證書而使用過的材料。與我一同工作的同志對本研究所做的任何貢獻均已在論文中作了明確的說明并表示了謝意。論文作者簽字:墮"1::,§t!/-簽字日期:塑!竺年二£月蘭生日軍事醫(yī)學科學院保護知識產(chǎn)權(quán)聲明本學位論文作者完全了解芏主匡堂盤堂瞳對研究生在學其間撰寫的論文知識產(chǎn)權(quán)保護的相關規(guī)定。本人撰寫的

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3、??????????????????????????5摘要????????????????????????????????7Abstract???????????????????????????????????????..11前言????????????????????????????????..15翮『雷???????????????????????????????????????..1)1.副溶血弧菌的生物學特性???????????????????..152.副溶血弧菌致病性與其主要毒力因子???????????????152.1耐熱直接溶血素(TDH)??????????

4、?????????..162.2耐熱相關溶血素(TIm)????????????????????162.3III型分泌系統(tǒng)(T3SS)??????????????????.172.4粘附因子?????????????????????????.193.弧菌生物膜形成???????????????????????193.1鞭毛?????????????????????????????..203.2IV型菌毛????????????????????????2l3.3多糖????????????????????????????????.223.4c.di.GMP信號分子?????????

5、?????????????234.弧菌密度感應系統(tǒng)與其核心調(diào)控子????????????????245.弧菌毒力調(diào)控子ToxR?????????????????????266.調(diào)控子蛋白VPA0606?????????????????????267.細菌基因轉(zhuǎn)錄調(diào)控????????????????????????268.研究目的、研究假設和技術(shù)路線?????????????????27材料和方法????????????????????????????.291.材料??????????????????????????????????..291.1菌株和質(zhì)粒?????????????

6、??????????291.2主要試劑(盒)?????????????????????..291.3主要儀器????????????????????????291.4本文所用引物匯總????????????????????..302.方法??????????????????????????????????..312.1菌種準備與培養(yǎng)?????????????????????..312.2總RNA提取???????????????????????312.3逆轉(zhuǎn)錄反應???????????????????????.322.4操縱子鑒定???????????????????????33

7、1萬方數(shù)據(jù)目錄2.5RealtimeQuantitativePCR(qRT-PCR)????????????????????.332.6引物延伸實驗(Primerextensionassay)????????????一342.7LacZ報告基因融合實驗(LacZfusion)????????????一362.8凝膠遷移實驗(Electrophoreticmobilityshittassay,EMSA)????372.9DNaseI足跡實驗(DNaseIfootprinting)?

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