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《雌激素及雌激素受體α對(duì)谷氨酸誘導(dǎo)神經(jīng)細(xì)胞損傷的作用研究》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫(kù)。
1、?中國(guó)圖書(shū)資料分類法?分類號(hào)：R741單位代碼：10660學(xué)號(hào)：S100158貴陽(yáng)醫(yī)學(xué)院2013屆臨床醫(yī)學(xué)碩士專業(yè)學(xué)位材料(臨床論文部分)雌激素及雌激素受體α對(duì)谷氨酸誘導(dǎo)神經(jīng)細(xì)胞損傷的作用研究研究生：張廣云導(dǎo)師：王建怡教授年級(jí)：2010級(jí)專業(yè)：兒科學(xué)2013年5月18日目錄摘要.....................................................1縮略詞表..................................................3前言..............................................
2、.......5第一部分谷氨酸誘導(dǎo)神經(jīng)細(xì)胞損傷模型的構(gòu)建及鑒定1、前言..................................................72、材料與方法.............................................83、結(jié)果.................................................124、討論.................................................15第二部分雌激素及雌激素受體α對(duì)谷氨酸誘導(dǎo)神經(jīng)細(xì)胞損傷的保護(hù)作用1、前言............
3、.....................................162、材料與方法............................................173、結(jié)果.................................................264、討論.................................................33結(jié)論....................................................36參考文獻(xiàn)..................................
4、...............37致謝....................................................42英文摘要.................................................43論文原創(chuàng)性聲明...........................................45綜述....................................................46附：臨床能力考核有關(guān)材料：貴陽(yáng)醫(yī)學(xué)院2013屆碩士研究生論文臨床輪轉(zhuǎn)考核表(按時(shí)間順序)學(xué)術(shù)活動(dòng)情況表(按時(shí)間順序)臨床
5、能力考試及學(xué)位答辯情況表貴陽(yáng)醫(yī)學(xué)院2013屆碩士研究生論文雌激素及其受體α對(duì)谷氨酸誘導(dǎo)神經(jīng)細(xì)胞損傷的作用研究專業(yè)名稱：兒科學(xué)研究生：張廣云導(dǎo)師：王建怡教授摘要目的建立谷氨酸（GlutamateGlu）誘導(dǎo)的神經(jīng)細(xì)胞損傷模型，觀察雌激素及雌激素受體a（EstrongenreceptoraERa）對(duì)谷氨酸誘導(dǎo)神經(jīng)細(xì)胞損傷的保護(hù)作用，分析其可能作用機(jī)制，希望為進(jìn)一步認(rèn)識(shí)神經(jīng)系統(tǒng)相關(guān)疾病的病理生理過(guò)程提供理論依據(jù)，并為相關(guān)領(lǐng)域的治療提供新的思路。方法原代培養(yǎng)皮層神經(jīng)細(xì)胞，神經(jīng)元特異性烯醇化酶(Neuronspecificenolase,NSE)免疫組化染色方法鑒定神經(jīng)元的純度。建立Glu誘導(dǎo)的
6、神經(jīng)細(xì)胞損傷模型，通過(guò)檢測(cè)細(xì)胞乳酸脫氫酶（Lactatedehydrogenase,LDH）漏出率以及細(xì)胞凋亡率，鑒定該損傷模型。用前期試驗(yàn)中已構(gòu)建成功的ERα重組慢病毒(V-ERa-RFP-flag)，感染Glu誘導(dǎo)的神經(jīng)細(xì)胞損傷模型，實(shí)時(shí)熒光定量PCR和westernblot方法檢測(cè)ERα轉(zhuǎn)錄和蛋白相對(duì)表達(dá)水平。實(shí)驗(yàn)分為3組：①對(duì)照組：空慢病毒(V-RFP-flag)感染Glu誘導(dǎo)的神經(jīng)細(xì)胞損傷模型；②雌激素組：雌激素干預(yù)Glu誘導(dǎo)的神經(jīng)細(xì)胞損傷模型；③慢病毒組:V-ERa-RFP-flag感染Glu誘導(dǎo)的神經(jīng)細(xì)胞損傷模型。通過(guò)流式細(xì)胞儀（Flowcytomety，F(xiàn)CM）、酶標(biāo)儀
7、分別檢測(cè)各組神經(jīng)細(xì)胞凋亡率、LDH漏出率以及Caspase3活性，觀察對(duì)比神經(jīng)細(xì)胞損傷程度；實(shí)時(shí)熒光定量PCR及免疫熒光法檢測(cè)各組神經(jīng)細(xì)胞中N-甲基-D-天氡氨酸受體1（N-methyl-D-asprtatereceptor1,NMDAR1）及Ⅰ型囊泡膜谷氨酸轉(zhuǎn)運(yùn)體（VesicularGlutamateTransporteroftype1,VGLUT1）變化。結(jié)果成功原代培養(yǎng)神經(jīng)細(xì)胞，經(jīng)NSE免疫組化方法鑒定神經(jīng)元純度大于90%。Glu誘導(dǎo)的神
