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《試析血根堿對(duì)細(xì)胞的增殖抑制和凋亡誘導(dǎo)作用研究》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫(kù)。
1、分類號(hào):學(xué)校代碼:10128UDC:學(xué)號(hào):20071159碩士學(xué)位論文（類別：全日制碩士研究生題目：血根堿對(duì)細(xì)胞的增殖抑制和凋亡誘導(dǎo)作用研究英文題目：Inhibitoryeffectsandinductiveofapoptosisofsanguinarineoncells研究生：張鴻學(xué)科名稱：化學(xué)工藝指導(dǎo)教師：魏雄輝二○一○年六月摘要目前肝癌和胃癌病發(fā)率在亞洲較為突出。治療手段主要是手術(shù)輔助化療，但是化療的耐藥性成為治療過(guò)程中新的難題。因此，從中藥中尋找抗癌藥物成為當(dāng)前研究的熱點(diǎn)。血根堿（Sanguinarine，SA）是提取自博落回等植
2、物中的一種苯菲啶類生物堿，具有抗癌活性。為了能進(jìn)一步探討血根堿抗癌作用，本課題選擇人胃癌細(xì)胞株BGC-823細(xì)胞和人肝癌細(xì)胞株SMMC-7221細(xì)胞作為研究對(duì)象，通過(guò)光學(xué)倒置顯微鏡觀察藥物作用前后的細(xì)胞形態(tài)變化，直觀的看出SA對(duì)腫瘤細(xì)胞具有明顯的增殖抑制作用；臺(tái)盼藍(lán)拒染試驗(yàn)和二苯基溴化四氮唑藍(lán)（MTT）實(shí)驗(yàn)，結(jié)果表明血根堿對(duì)細(xì)胞具有明顯的抑制作用。在一定范圍內(nèi)，隨著藥物濃度的增大，作用時(shí)間的延長(zhǎng)和細(xì)胞濃度的減小，細(xì)胞增殖抑制作用增強(qiáng)，最高抑制率最高超過(guò)90%；Hochest33258染色實(shí)驗(yàn)，結(jié)果表明隨著藥物濃度的增大，細(xì)胞的早期凋亡率增
3、大，同時(shí)，細(xì)胞體積變小，細(xì)胞染色質(zhì)濃縮；在流式細(xì)胞儀（FCM）檢測(cè)對(duì)血根堿作用腫瘤細(xì)胞的細(xì)胞周期和細(xì)胞凋亡情況，結(jié)果表明隨著藥物濃度的增大，作用時(shí)間的延長(zhǎng)，細(xì)胞早期凋亡率升高，細(xì)胞各個(gè)時(shí)期的DNA含量變化明顯，血根堿使BGC-823細(xì)胞阻滯于G1/G0期，而將SMMC-7221細(xì)胞阻滯于G2/M期。為了進(jìn)一步佐證血根堿抑制細(xì)胞增殖，改變細(xì)胞周期和誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡與相應(yīng)的凋亡蛋白有關(guān)，我們通過(guò)WesternBlot試驗(yàn)對(duì)凋亡相關(guān)蛋白Bcl-2和Bax表達(dá)進(jìn)行檢測(cè)，試驗(yàn)結(jié)果表明隨著血根堿濃度逐漸增大，SMMC-7221細(xì)胞和BGC-823細(xì)胞的B
4、cl-2/Bax都逐漸降低。血根堿和谷胱甘肽（GSH）的相互作用紫外光譜和熒光光譜研究，結(jié)果表明隨著谷胱甘肽濃度的增大，血根堿的紫外吸光光度和熒光吸光光度逐漸減少，血根堿與谷胱甘肽存在相互作用。關(guān)鍵詞：血根堿；肝癌細(xì)胞；胃癌細(xì)胞；細(xì)胞凋亡AbstractBackground:Atthepresenttime,itisterribleintheAsiawherethelivercancerandthegastriccancerratearehigher.Surgicaloperationassociatedwithchemotherapeu
5、ticsisanidealmethodtotreatcancer,howeverwefindthatoneffectivetherapyisavailableforcancerbecausetumorcellsexistenceisdrug-fast.ItisahottopictoextractausefulingredienttreatingcancerfromtraditionalChinesemedicine.Sanguinarine,abenzo[c]phenthridinealkaloidextractedformMacleya
6、Cordata,exhibitsananticancerproperty.TostudythemechanismoftherapeuticactionofSA,inthispaper,wechooseBGC-823cellsandSMMC-7221cellsasthesubjectinvestigated.WefoundthegrowthofcancercellshasbeeninhibitedbySA,whichthemorphologicalchangesofcellswereobservedonoptical-microscope.
7、ByusingtrypanbluedyeexclusiontestandMTTassaytomeasuretheinhibitionofSAoncancercells,wefoundthattheinhibitionrateincreaseswiththedecreasingofcellinoculumsdensity,theincreasingoftreatingtimeandtheincreasingofdrugconcentration,andthelargestinhibitorionrateexceeds90%intheexpe
8、riment.WeusedHochest33258dyeassaytofindthatwiththeincreasingofdrugconcentration,theapoptosisrate
