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《n-3 pufas通過脂聯(lián)素調(diào)控高脂誘導(dǎo)apoe--小鼠肝損傷作用》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
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3、／Ｖ三八巧？話．．，Ｖ：；、：節(jié)人如護；一：；盧＇‘六．．．．ｔＡｒ＞巧摘要目的：研究不同比例的DHA/EPA對載脂蛋白E基因敲除（apolipoproteinE-knockout，-/-ApoE）小鼠肝損傷的保護作用，以及對肝臟中脂聯(lián)素的調(diào)節(jié)機制。方法:-/-1．15只雄性C57BL/6J小鼠，6周齡，18-22g；90只載脂蛋白E基因敲除（ApoE）-/-小鼠，6周齡，18-22g。經(jīng)適應(yīng)性喂養(yǎng)一周后，將ApoE小鼠隨機分為6組，共分7-/-組。CT組：C57BL/6J小鼠（普通飼料，蒸餾水灌胃）、ND組：ApoE小鼠（普通-/-
4、飼料，蒸餾水灌胃）、HFD組：ApoE小鼠（高脂飼料，蒸餾水灌胃）、ALA組：-/--/-ApoE小鼠（高脂飼料，ALA1mg/gbw灌胃）DHA/EPA=2∶1組：ApoE小鼠（高-/-脂飼料，DHA/EPA=2∶1，1mg/gbw灌胃）、DHA/EPA=1∶1組：ApoE小鼠（高脂-/-飼料，DHA/EPA=1∶1，1mg/gbw灌胃）、DHA/EPA=1∶2組：ApoE小鼠（高脂飼料，DHA/EPA=1∶2，1mg/gbw灌胃）。2．飼養(yǎng)12周后，小鼠稱重，處死小鼠，收集小鼠血清，并對各主要臟器分離稱重，計算臟器指數(shù)。通過試劑盒測定小鼠體內(nèi)脂質(zhì)水平
5、（血清TC、TG，肝臟TC、TG）、血清酶活性（AST、ALT、AKP）及肝臟氧化損傷指標（MDA、SOD、GSH）。制備肝臟病理切片，通過HE染色和電鏡觀察小鼠肝損傷情況；采用ELISA酶聯(lián)免疫試劑盒檢測小鼠血清中脂聯(lián)素水平；運用免疫組化方法對小鼠肝臟內(nèi)脂聯(lián)素、脂聯(lián)素受體2（AdipoR2）的表達進行定量分析。采用熒光定量PCR測定肝臟中脂聯(lián)素、脂聯(lián)素受體1和2（AdipoR1、AdipoR2）、過氧化物酶體增殖物激活受體γ（PPARγ）mRNA表達水平；采用Westernblot測定小鼠肝臟脂聯(lián)素蛋白表達水平。結(jié)果：1．試驗結(jié)果表明，與正常對照組（N
6、D組）相比，HFD組小鼠體重、食物攝入量、小鼠肝臟臟器指數(shù)顯著增加（P<0.05），各干預(yù)組小鼠體重、食物攝入量、肝臟臟器指數(shù)略高于ND組小鼠，但無統(tǒng)計學(xué)意義。各干預(yù)組小鼠體重、食物攝入量、肝臟臟器指數(shù)與HFD組小鼠相比無顯著性差異。通過肝臟HE染色和電鏡觀察，HFD組小鼠肝細胞出現(xiàn)嚴重的脂變性，DHA/EPA干預(yù)各組肝細胞內(nèi)的脂滴積累有所減少，肝臟脂質(zhì)浸潤情況有所改善。2．與ND組小鼠相比，HFD組小鼠肝臟和血清的TC、TG含量均顯著升高（p<0.05），血清AST、ALT及AKP水平顯著升高（p<0.05），肝臟MDA水平顯著升高（p<0.05），S
7、OD水平差異無統(tǒng)計學(xué)意義，GSH水平顯著下降（p<0.05）。IDHA/EPA干預(yù)后，與HFD組相比，血清及肝臟TC、TG含量均明顯下降（p<0.05），血清AST、ALT、AKP水平明顯下降（p<0.05），肝臟MDA水平顯著下降（p<0.05），SOD和GSH水平顯著升高（p<0.05）。3．與ND組相比，HFD組小鼠脂聯(lián)素血清水平顯著降低（p<0.05）；與HFD組相比，DHA/EPA干預(yù)組小鼠脂聯(lián)素血清水平顯著升高（p<0.05）。免疫組化結(jié)果顯示，與ND組相比，HFD組肝臟脂聯(lián)素及AdipoR2表達水平降低；DHA/EPA干預(yù)組脂聯(lián)素及Adip
8、oR2水平均有明顯提高。-/-4．與HFD組相比，DHA/EPA干預(yù)組ApoE小
