水產(chǎn)微生物—病毒和亞病毒(教案)

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1、第五章病毒和亞病毒病毒(virus)是指一類超顯微結構、非細胞形態(tài)、專性活細胞內(nèi)寄生的微生物。1892年及1898年,Tvanovski與Beijerinck分別獨立研究了煙草花葉病的病原后,證實其病原體為一種能通過細菌濾器的“傳染性活性液體”或稱“病毒”,從而揭開了病毒學的歷史。隨后,人們陸續(xù)發(fā)現(xiàn)各種植物病毒、動物病毒、微生物病毒及亞病毒,并對病毒粒了進行了電鏡觀察和化學分析。自20世紀50年代始,又展開了病毒的分了生物學研究,從而使人類對病毒木質(zhì)及其與宿主間的相互作用的認識,不斷深入。病毒具有以卜?特點:形休極具微小,一般可通過細菌濾器,需川電子顯微鏡觀察具大小與形

2、態(tài);不具細胞結構,乂稱分子牛物;其主要成分為核酸和蛋口質(zhì),每一種病毒僅含一種核酸(DNA或RNA);既無產(chǎn)能酶系,也無蛋口質(zhì)合成系統(tǒng),在宿主的活細胞內(nèi)營專性寄牛,依靠宿主細胞,通過核酸復制和核酸蛋口裝配的形式進行增殖;在離體條件卜,能以無住命的化學大分了狀態(tài)存在,并保持其感染性;對一般抗生素不敏感,但對干擾素敏感。第一節(jié)病毒學研究的基本方法同微生物學其他分支學科一樣,病毒學的進步完全得益于研究方法和技術手段的發(fā)展。一、病毒的分離與純化通過病毒的分離與純化獲得純化的、有感染性的病毒制備物是病毒學研究和實踐的基本技術。1.病毒的分離病每的分離是將疑冇病毒而待分離的標木(如微

3、生物發(fā)酵的倒罐液,可疑病毒感染患者的體液、血液、糞便等臨床標木)經(jīng)處理后,接種于敏感的實驗宿主、雞胚或細胞培養(yǎng),經(jīng)過一段時間孵育后,通過檢查病毒特異性病理表現(xiàn)或丿IJ其它方法來肯定病毒的存在。2.病毒的純化由于病毒只能在活細胞內(nèi)繁殖,所以川于病毒制備的起始材料只能是病毒感染的布主機體,組織或細胞經(jīng)破碎后的抽捉物,或病毒感染的宿主的體液,血液和分泌物,或病毒感染的細胞培養(yǎng)物的培養(yǎng)液等。在這些材料中不可避免地混雜冇大量的組織或細胞成分、培養(yǎng)基成分、可能污染的其他微牛物與雜質(zhì)。為了得到純凈的病毒材料,必須利川一切可能的方法將這些雜質(zhì)成分除去,這就是病毒的純化。二、病毒的鑒定以

4、物理、化學、生物學、乃至分了生物學方法鑒別病毒的性質(zhì),描述其特征是病毒分類的前提。另一方面、病毒鑒定是診斷病毒性疾病的可靠方法。1.根據(jù)病毒感染的宿主范圍及感染表現(xiàn)的鑒定大多數(shù)病毒都冇相當專一的宿主范圍,因而病毒的宿主譜口J以作為病毒初步鑒定的指標。病毒感染宿主機體所引起的疾病癥狀,在雞胚絨毛尿囊膜I:所形成的痘皰的形態(tài),以及在單層細胞培養(yǎng)上所產(chǎn)生的致細胞病變效應表現(xiàn)都冇一定特界性,根據(jù)病毒這些特征性的表現(xiàn)亦町對其進行初步的鑒定。1.病毒的理化性質(zhì)鑒定利用電鏡技術,分析超速離心技術以及熱、紫外線、化學藥物、脂溶劑等理化因了對病毒感染性的作用可檢查毒粒的人小和形態(tài),測定病

5、毒及具紐分的沉降系數(shù)、浮力密度和分子量,鑒定病毒的核酸類型,確定病毒對不同理的因子的敏感性。2.血細胞凝集性質(zhì)鑒定許多病毒能吸附于一定種類的哺乳動物和禽類的紅血球細胞表面產(chǎn)牛凝集現(xiàn)象。不同的病毒所凝集的血細胞種類以及發(fā)生凝集所要求的溫度、兇條件可能不同,這些性質(zhì)給病毒鑒定捉供了重要依據(jù)。3.病毒的血清學鑒定建立在抗原與抗體特異性反應棊礎上的免疫學方法是一類非常重要的病毒鑒定方法。免疫沉淀反應、凝集反應、酚聯(lián)免疫吸附測定、血凝抑制試驗、中和試驗、免疫熒光、免疫電鏡、放射免疫以及單克降抗體等技術都廣泛用于病毒鑒定工作。血清學方法所進行的病毒抗原分析可使病毒鑒定更為準確、精細

6、,它們對于病毒的最終鑒定,乃至區(qū)分同型病毒的不同毒株,了解病毒的親緣關系以及病毒性疾病的診斷都是至關重要的。第二節(jié)病毒的基本性狀一、病毒的性質(zhì)(-)病毒的大小和形態(tài)病毒粒了極其微小,測其大小的單位通常用納米(nm)表示。己知痘類病毒個體最大,大小約200^300nm,如經(jīng)適當染色后可在光學顯微鏡下觀察;而副流感病毒、單純皰疹病毒等其大小約150^200nm;流行性感冒病毒、腺病毒和逆轉(zhuǎn)錄病毒等其大小約80^120nm;小型病毒如口蹄疫病毒、脊髓灰質(zhì)炎病毒等具大小約18"30nnio病毒粒子的形態(tài)多樣,其屮以球型或近似球型的最為多見;植物病毒、昆蟲病毒和某些水生動物病毒(

7、如蝦類)多成桿狀,但人和動物的某些病毒也呈絲狀,如初分離時的流感病W:彈狀病毒為一端関鈍的桿狀,形似了彈頭而得名,如狂犬病病毒;磚形為痘類病毒所特冇的形態(tài);噬菌體的典型形態(tài)為蝌蚪形。(二)病毒的結構病毒的結構,可分為存在于所冇病毒中的基木結構和僅為某病毒所特冇的輔助結構。1.基本結構指病毒的核心和衣殼,兩者構成核衣殼,冇些病毒的核衣殼就是病毒粒了,又稱為裸病毒。(1)核心病毒的核心是病毒粒了的中心結構,其內(nèi)部充滿一種類型的核酸,即DNA或RNA,構成病毒的基因組,為病毒的感染、增殖、遺傳和變界提供信息。病毒核酸町分單鏈DNA(ssDNA)

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