水產(chǎn)微生物—病毒和亞病毒(教案)

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1、第五章病毒和亞病毒病毒(virus)是指一類(lèi)超顯微結(jié)構(gòu)、非細(xì)胞形態(tài)、專(zhuān)性活細(xì)胞內(nèi)寄生的微生物。1892年及1898年,Tvanovski與Beijerinck分別獨(dú)立研究了煙草花葉病的病原后,證實(shí)其病原體為一種能通過(guò)細(xì)菌濾器的“傳染性活性液體”或稱(chēng)“病毒”,從而揭開(kāi)了病毒學(xué)的歷史。隨后,人們陸續(xù)發(fā)現(xiàn)各種植物病毒、動(dòng)物病毒、微生物病毒及亞病毒,并對(duì)病毒粒了進(jìn)行了電鏡觀察和化學(xué)分析。自20世紀(jì)50年代始,又展開(kāi)了病毒的分了生物學(xué)研究,從而使人類(lèi)對(duì)病毒木質(zhì)及其與宿主間的相互作用的認(rèn)識(shí),不斷深入。病毒具有以卜?特點(diǎn):形休極具微小,一般可通過(guò)細(xì)菌濾器,需川電子顯微鏡觀察具大小與形

2、態(tài);不具細(xì)胞結(jié)構(gòu),乂稱(chēng)分子牛物;其主要成分為核酸和蛋口質(zhì),每一種病毒僅含一種核酸(DNA或RNA);既無(wú)產(chǎn)能酶系,也無(wú)蛋口質(zhì)合成系統(tǒng),在宿主的活細(xì)胞內(nèi)營(yíng)專(zhuān)性寄牛,依靠宿主細(xì)胞,通過(guò)核酸復(fù)制和核酸蛋口裝配的形式進(jìn)行增殖;在離體條件卜,能以無(wú)住命的化學(xué)大分了狀態(tài)存在,并保持其感染性;對(duì)一般抗生素不敏感,但對(duì)干擾素敏感。第一節(jié)病毒學(xué)研究的基本方法同微生物學(xué)其他分支學(xué)科一樣,病毒學(xué)的進(jìn)步完全得益于研究方法和技術(shù)手段的發(fā)展。一、病毒的分離與純化通過(guò)病毒的分離與純化獲得純化的、有感染性的病毒制備物是病毒學(xué)研究和實(shí)踐的基本技術(shù)。1.病毒的分離病每的分離是將疑冇病毒而待分離的標(biāo)木(如微

3、生物發(fā)酵的倒罐液,可疑病毒感染患者的體液、血液、糞便等臨床標(biāo)木)經(jīng)處理后,接種于敏感的實(shí)驗(yàn)宿主、雞胚或細(xì)胞培養(yǎng),經(jīng)過(guò)一段時(shí)間孵育后,通過(guò)檢查病毒特異性病理表現(xiàn)或丿IJ其它方法來(lái)肯定病毒的存在。2.病毒的純化由于病毒只能在活細(xì)胞內(nèi)繁殖,所以川于病毒制備的起始材料只能是病毒感染的布主機(jī)體,組織或細(xì)胞經(jīng)破碎后的抽捉物,或病毒感染的宿主的體液,血液和分泌物,或病毒感染的細(xì)胞培養(yǎng)物的培養(yǎng)液等。在這些材料中不可避免地混雜冇大量的組織或細(xì)胞成分、培養(yǎng)基成分、可能污染的其他微牛物與雜質(zhì)。為了得到純凈的病毒材料,必須利川一切可能的方法將這些雜質(zhì)成分除去,這就是病毒的純化。二、病毒的鑒定以

4、物理、化學(xué)、生物學(xué)、乃至分了生物學(xué)方法鑒別病毒的性質(zhì),描述其特征是病毒分類(lèi)的前提。另一方面、病毒鑒定是診斷病毒性疾病的可靠方法。1.根據(jù)病毒感染的宿主范圍及感染表現(xiàn)的鑒定大多數(shù)病毒都冇相當(dāng)專(zhuān)一的宿主范圍,因而病毒的宿主譜口J以作為病毒初步鑒定的指標(biāo)。病毒感染宿主機(jī)體所引起的疾病癥狀,在雞胚絨毛尿囊膜I:所形成的痘皰的形態(tài),以及在單層細(xì)胞培養(yǎng)上所產(chǎn)生的致細(xì)胞病變效應(yīng)表現(xiàn)都冇一定特界性,根據(jù)病毒這些特征性的表現(xiàn)亦町對(duì)其進(jìn)行初步的鑒定。1.病毒的理化性質(zhì)鑒定利用電鏡技術(shù),分析超速離心技術(shù)以及熱、紫外線、化學(xué)藥物、脂溶劑等理化因了對(duì)病毒感染性的作用可檢查毒粒的人小和形態(tài),測(cè)定病

5、毒及具紐分的沉降系數(shù)、浮力密度和分子量,鑒定病毒的核酸類(lèi)型,確定病毒對(duì)不同理的因子的敏感性。2.血細(xì)胞凝集性質(zhì)鑒定許多病毒能吸附于一定種類(lèi)的哺乳動(dòng)物和禽類(lèi)的紅血球細(xì)胞表面產(chǎn)牛凝集現(xiàn)象。不同的病毒所凝集的血細(xì)胞種類(lèi)以及發(fā)生凝集所要求的溫度、兇條件可能不同,這些性質(zhì)給病毒鑒定捉供了重要依據(jù)。3.病毒的血清學(xué)鑒定建立在抗原與抗體特異性反應(yīng)棊礎(chǔ)上的免疫學(xué)方法是一類(lèi)非常重要的病毒鑒定方法。免疫沉淀反應(yīng)、凝集反應(yīng)、酚聯(lián)免疫吸附測(cè)定、血凝抑制試驗(yàn)、中和試驗(yàn)、免疫熒光、免疫電鏡、放射免疫以及單克降抗體等技術(shù)都廣泛用于病毒鑒定工作。血清學(xué)方法所進(jìn)行的病毒抗原分析可使病毒鑒定更為準(zhǔn)確、精細(xì)

6、,它們對(duì)于病毒的最終鑒定,乃至區(qū)分同型病毒的不同毒株,了解病毒的親緣關(guān)系以及病毒性疾病的診斷都是至關(guān)重要的。第二節(jié)病毒的基本性狀一、病毒的性質(zhì)(-)病毒的大小和形態(tài)病毒粒了極其微小,測(cè)其大小的單位通常用納米(nm)表示。己知痘類(lèi)病毒個(gè)體最大,大小約200^300nm,如經(jīng)適當(dāng)染色后可在光學(xué)顯微鏡下觀察;而副流感病毒、單純皰疹病毒等其大小約150^200nm;流行性感冒病毒、腺病毒和逆轉(zhuǎn)錄病毒等其大小約80^120nm;小型病毒如口蹄疫病毒、脊髓灰質(zhì)炎病毒等具大小約18"30nnio病毒粒子的形態(tài)多樣,其屮以球型或近似球型的最為多見(jiàn);植物病毒、昆蟲(chóng)病毒和某些水生動(dòng)物病毒(

7、如蝦類(lèi))多成桿狀,但人和動(dòng)物的某些病毒也呈絲狀,如初分離時(shí)的流感病W:彈狀病毒為一端関鈍的桿狀,形似了彈頭而得名,如狂犬病病毒;磚形為痘類(lèi)病毒所特冇的形態(tài);噬菌體的典型形態(tài)為蝌蚪形。(二)病毒的結(jié)構(gòu)病毒的結(jié)構(gòu),可分為存在于所冇病毒中的基木結(jié)構(gòu)和僅為某病毒所特冇的輔助結(jié)構(gòu)。1.基本結(jié)構(gòu)指病毒的核心和衣殼,兩者構(gòu)成核衣殼,冇些病毒的核衣殼就是病毒粒了,又稱(chēng)為裸病毒。(1)核心病毒的核心是病毒粒了的中心結(jié)構(gòu),其內(nèi)部充滿一種類(lèi)型的核酸,即DNA或RNA,構(gòu)成病毒的基因組,為病毒的感染、增殖、遺傳和變界提供信息。病毒核酸町分單鏈DNA(ssDNA)

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