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1、314食品與藥品FoodandDrug2013年第15卷第5期產(chǎn)劍麻皂苷水解酶菌株的篩選與鑒定鄧天發(fā)，王京博，謝慶武(廣西大學(xué)生命科學(xué)與技術(shù)學(xué)院，廣西南寧530004)摘要：目的篩選能酶解劍麻皂苷并釋放游離劍麻皂素的菌株。方法用薄層色譜法(TLC)初篩能酶解劍麻皂苷游離出劍麻皂素的菌株，再用酶活性比色測定和高效液相色譜法(HPLC)復(fù)篩目的菌株。通過形態(tài)學(xué)觀察和ITS序列測定，初步鑒定菌種。結(jié)果篩選~lJ31株目的菌株，其中絲狀真菌13株，細(xì)菌18株。絲狀真菌的酶活性高于細(xì)菌。鑒定其中酶活性較高的4株真菌：菌種T1為黑曲霉，T2、T
2、3為鏈孢霉屬，T4為青霉屬。結(jié)論TLC可快速篩選酶解劍麻皂苷并釋放游離劍麻皂素的菌種。黑曲霉、鏈孢霉和青霉均有較強(qiáng)的酶解劍麻皂苷并釋放游離劍麻皂素的能力。關(guān)鍵詞：劍麻皂素；皂苷水解酶；菌種；篩選中圖分類號(hào)：Q93．331文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A文章編號(hào)：1672—979X(2013)05—0314-03ScreeningandIdentificationofSisalanaSaponinHydrolyticEnzymeProducingStrainsDENGTian—fa，WANGJing—bo，XIEQing—WH(CollegeofLif
3、eScienceandTechnology,GuangxiUniversity,Nanning530004，China)Abstract：ObjectiveToscreenthestrainswhichcanhydrolyzetheagavesisalanasaponinandreleasethetigogenin．MethodsUsingtheTLCassay,thestrainsthatcanhydrolyzetheagavesisalanasaponinandreleasethetigogeninwerefirstscreen
4、edout，thenthedestinationstrainswerescreenedoutagain，usingtheenzymaticcolorimetricdeterminationandHPLCdetermination．BymorphologicalobservationandITSsequencing，thestrainswerepreliminaryidentified．Results31destinationstrainswerescreenedout．a(chǎn)mongwhich13strainswerefilamento
5、usfungiand18werebacteria．Theactivityofthehydrolyticenzymeofthefungiwashigherthanthatthebacteria．The4fungistrainsT1，T2，T3andT4withhigherenzymaticactivitywereidentifiedasAspergillusniger，Neurosporasitophila，andPenicillium，respectively．ConclusionUsingtheTLCassay,thescreen
6、ingofthestrainsthatcanhydrolyzetheagavesisalanasaponinandreleasethetigogeninwasaccelerated．Aspergillusniger，Neurosporasitophila，andPenicilliumallhavethecapacitytohydrolyzetheagavesisalanasaponinandreleasethetigogenin．KeyWords：tigogenin；saponinhydrolyticenzyme；strain；sc
7、reening劍麻皂素(tigogenin)具有抗炎、解熱、鎮(zhèn)痛、增強(qiáng)學(xué)農(nóng)場等地采集。免疫、降低血糖、抗腫瘤、抗菌、降血脂、降血壓等作1．2培養(yǎng)基用，應(yīng)用廣泛，可用于合成120多種激素類藥物，還可應(yīng)用平板篩選培養(yǎng)基：劍麻渣粉末30g，NaNO，2g，于食品、化妝品及畜牧業(yè)等行業(yè)。]。劍麻皂素在劍麻中以K2HPO41g，KC10．5g，MgSO4’7H2O0．5g，F(xiàn)eSO4‘7H2O甾體皂苷配基的形式存在，在其C3位~NC26位等通過糖苷0．01g，瓊脂12g，水1000mL，pH自然。鍵與糖鏈(由葡萄糖、木糖、鼠李糖、半乳糖、阿拉
8、伯糖產(chǎn)酶培養(yǎng)基：劍麻渣粉末1g，葡萄糖O．25g，蛋白等組成)相連]。制備劍麻皂素，必須先水解與其直接相胨0．125g，K2HPO4O．025g，KC1O．0125g，MgSO4’7H2O連的糖苷鍵(以下簡稱皂苷鍵)。目前，國內(nèi)提取劍
