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1、肝炎病毒微免教研室李爭(zhēng)鳴學(xué)習(xí)目的與要求了解肝炎病毒的種類(lèi)(5min)熟悉甲型肝炎病毒的結(jié)構(gòu)和致病性(40min)掌握乙型肝炎、丙型肝炎病毒的結(jié)構(gòu)、致病特點(diǎn)、實(shí)驗(yàn)診斷方法和防治原則。(60min)了解其它肝炎病毒的傳播方式及致病特點(diǎn)。(30min)肝炎病毒：是指一類(lèi)能引其病毒性肝炎的病毒。種類(lèi)：包括甲、乙、丙、丁、戊、己、庚等型肝炎病毒。1997年又從一例日本輸血后非甲—庚型肝炎病人（T.T）血清中獲得一類(lèi)DNA病毒，稱(chēng)TTV。一、生物學(xué)性狀形態(tài)與結(jié)構(gòu):球形，直徑27—32。核心：?jiǎn)喂烧淩NA,含7478個(gè)核苷酸。衣殼：為二十面立體對(duì)稱(chēng)結(jié)構(gòu)衣殼ssRNAV
2、PgHAV病毒結(jié)構(gòu)示意圖第一節(jié)甲型肝炎病毒（HAV）病毒培養(yǎng)：黑猩猩、狨猴可做動(dòng)物模型用非洲綠猴腎細(xì)胞（Vero細(xì)胞),肝細(xì)胞，人胚腎細(xì)胞,人胚肺二倍體細(xì)胞培養(yǎng),在胞漿內(nèi)增殖,不引起細(xì)胞裂解.抵抗力：60℃1小時(shí)不被滅活，61℃20min部分滅活，100℃煮沸5min滅活。-20℃可存活多年，25℃干燥條件下至少存活1個(gè)月。過(guò)氧乙酸(2%，4h)，甲醛(0.35%)37℃72h可消除其傳染性。二、致病性與免疫性3.致病機(jī)制起病急驟,開(kāi)始有畏寒、發(fā)熱、腹瀉、腹痛、咽痛、關(guān)節(jié)痛等癥狀。接著出現(xiàn)厭食，特別是厭油膩，全身無(wú)力、惡心、嘔吐，上腹部的肝區(qū)，感到疼痛。有
3、肝腫大,肝功能可有血清“谷丙轉(zhuǎn)氨酶”(簡(jiǎn)稱(chēng)ALT)升高。1.傳染源：病人潛伏期：15—50天，平均1個(gè)月。2.傳播方式：主要經(jīng)糞—口傳播，傳染性極強(qiáng)。幾天以后,多數(shù)病人會(huì)出現(xiàn)黃疸,眼睛的鞏膜(即白眼珠)和皮膚發(fā)黃,尿?yàn)闈獠枭?大便顏色變淺,皮膚瘙癢,此稱(chēng)為“黃疸期”,黃疸持續(xù)大約1個(gè)月后逐漸消退,其他癥狀也逐漸消失,肝功能恢復(fù)正常。4.免疫力顯性感染和隱性感染,機(jī)體都可產(chǎn)生HAV的IgM和IgG抗體，IgM在急性期和恢復(fù)早期出現(xiàn),IgG在恢復(fù)后期出現(xiàn)，并可維持多年，對(duì)再感染有免疫力。三、微生物學(xué)檢查①免疫電鏡從糞便中查病毒；②ELISA法查病毒抗原：③EL
4、ISA和RIA法查血清抗體（IgM,IgG)；甲型肝炎病毒僅在發(fā)病前后一過(guò)性出現(xiàn)在血液中,病毒IgM抗體僅存在發(fā)病后3－6個(gè)月，而甲IgG抗體在發(fā)病后3個(gè)月達(dá)到最高，并長(zhǎng)期存在。檢測(cè)方法可通過(guò)放射免疫分析（RIA）、酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法（ELISA）檢測(cè)甲肝病毒IgM抗體、甲肝病毒IgG抗體.以PCR（聚合酶鏈反應(yīng)）法檢測(cè)糞便中甲肝病毒基因組RNA。（1）甲肝病毒IgM抗體(抗HAV-IgM)陽(yáng)性：表示急性甲型肝炎。 ???（2）甲肝病毒IgG抗體(抗HAV-IgG)陽(yáng)性：表示過(guò)去曾受過(guò)甲肝病毒感染。 ???（3）甲肝病毒RNA(HAV-RNA)糞便檢測(cè)陽(yáng)性
5、：表示急性甲型肝炎。四、防治原則臨床意義：乙型肝炎病毒大球形顆粒,φ42nm（Dane顆粒）小球形顆粒,φ22nm管形顆粒,22nm，長(zhǎng)50-70nm一、生物學(xué)性狀（一）形態(tài)與結(jié)構(gòu)電鏡下可見(jiàn)三種顆粒（HBV)外衣殼：由三種蛋白組成內(nèi)衣殼核心：雙股未閉合環(huán)DNADNA多聚酶主要蛋白:HBsAg中蛋白:HBsAg+pre-2大蛋白:HBsAg+pre-2+pre-1大球形顆粒(Dane顆粒)是最完整的乙肝病毒顆粒結(jié)構(gòu)大蛋白中蛋白主要蛋白(HBsAg)內(nèi)衣殼大球形顆粒的結(jié)構(gòu)模式圖（二）基因結(jié)構(gòu)HBV的DNA的雙鏈中，短鏈為正鏈（S），其長(zhǎng)度是可變的約為長(zhǎng)鏈的50
6、%－100%。長(zhǎng)鏈為負(fù)鏈（L），含HBV的全部的遺傳信息。其基因組在部分環(huán)狀DNA分子上，相當(dāng)于3200個(gè)堿基對(duì)。S區(qū):含C區(qū):P區(qū)：最長(zhǎng)，編碼DNA多聚酶X基因：編碼HBxAg,可激活細(xì)胞的癌基因，V基因.S基因HBsAg前S1基因分別編碼外衣殼上的PreS1抗原前S2基因PreS2抗原C基因編碼HBcAg前C基因編碼HBeAg長(zhǎng)鏈上有4個(gè)開(kāi)放的讀碼框架外衣殼抗原：HBsAg①存在于三中形態(tài)中；②為糖蛋白；③由a及兩另組抗原決定族（d/y,w/r)組成不同的（三）抗原組成adw—?dú)W美多見(jiàn)adr—漢族ayw—我國(guó)少數(shù)民族Ayr亞型：④意義：是感染的標(biāo)志⑤免
7、疫原性：可刺激機(jī)體產(chǎn)生相應(yīng)抗體—抗-HBs。為機(jī)體恢復(fù)的標(biāo)志PreS1及PreS2抗原：與病毒吸附于肝細(xì)胞有關(guān)，其抗原性更強(qiáng)，抗-PreS2及抗-PreS1能通過(guò)阻斷HBV與肝細(xì)胞結(jié)合而起抗病毒作用。內(nèi)衣殼抗原：核心抗原（HBcAg):①存在于Dane顆粒的內(nèi)衣殼上;②主要為蛋白質(zhì)；③在于感染者的肝細(xì)胞內(nèi)，血清中查不到。④抗原性強(qiáng)，可刺激機(jī)體產(chǎn)生抗-HBc,為非保護(hù)性抗體（先產(chǎn)生IgM后產(chǎn)生IgG，IgG可在血清中存在許多年）。⑤高效價(jià)的抗-HBcIgM是病毒在體內(nèi)復(fù)制的標(biāo)志,未檢出IgM可排除急性乙型肝炎?？?HBcIgG是既往感染的指標(biāo)，可持續(xù)存在多年
8、。e抗原(HBeAg)：存在于Dane顆粒的內(nèi)衣殼上，為HBcAg
