資源描述：
《骨髓基質(zhì)干細(xì)胞移植治療兔股骨頭缺血性壞死的實驗研究論文》由會員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、骨髓基質(zhì)干細(xì)胞移植治療兔股骨頭缺血性壞死的實驗研究論文劉長安，王江泳，張衛(wèi)平，步建立【摘要】［目的］探討骨髓基質(zhì)干細(xì)胞移植對股骨頭缺血性壞死的治療作用和修復(fù)機(jī)理，為臨床應(yīng)用提供依據(jù)。［方法］24只新西蘭大白兔隨機(jī)分為兩組，A組為髓芯減壓組，B組為干細(xì)胞移植組。采用液氮冷凍法造模。A組鉆孔后植入空白明膠海綿，B組鉆孔后植入復(fù)合有骨髓基質(zhì)干細(xì)胞的明膠海綿。術(shù)后每組分別于2、4、6、8周各處死3只動物.freelentalstudyontreatmentoffemoralheadnecrosisinrabbitarroalcells∥Abstract：［Objective］Toi
2、nvestigatetherepairingeffectandmechanismfortreatmentoffemoralheadnecrosisontransplantationofbonemarroalcells.［Method］Tly,GroupAascoredepressiongroupandGroupBasBonemarroalcellsautograftgroup.Animalfemoralheadneorosismodeladebyfreezingmethodplantedarroalcells.Threeanimalsineverygroupicroscop
3、eexamination.［Result］（1）Radiographexamination:At2ages.At4edaroundthedrilledholesinGroupAandtrabeculaeappearedinthedrilledholesingroupB.（2）Microscopeexamination:ingroupA,at2atorycellsappearedintheholesanyosteoblastsandostoidappearedaroundthedrilledholes.At8arroedinthedrilledholesingroupB,.f
4、reelountofosteoblastsinthedrilledholesandsomeostoidformedaroundthcdrilledholes.At4aturedarroarroalcellsautograftingmaybeaneffectiveoralheadnecrosis.Keyoralheadnecrosis；animalmodel;bonemarroalcell；cellculture;transplantation近年來一些研究發(fā)現(xiàn)骨髓基質(zhì)干細(xì)胞（bonemarroalcell，BMSC）減少與股骨頭缺血性壞死有密切關(guān)系。有報道用自體紅骨髓移植治
5、療股骨頭缺血性壞死取得了較好的療效。認(rèn)為移植于股骨頭內(nèi)BMSC的數(shù)目決定著治療的成敗。本實驗用移植體外增殖的BMSC治療兔股骨頭缺血性壞死，探討B(tài)MSC在早期股骨頭缺血性壞死治療中的作用及修復(fù)機(jī)理，為臨床提供理論依據(jù)和合理的治療方法。1材料與方法1.1動物分組成年新西蘭大白兔24只，雌雄不限，年齡4～5個月，體重2.5～3.5kg。由白求恩國際和平醫(yī)院動物實驗室提供。隨機(jī)分為A、B2組，每組12只。A組為髓芯減壓組，B組為細(xì)胞移植組。1.2主要試劑地塞米松磷酸鈉注射液，浙江仙琚制藥股份有限公司，國藥準(zhǔn)字：H330220827，批號：041105。DMEM細(xì)胞培養(yǎng)液，GIBC
6、O公司。胎牛血清，杭州四季青公司。1.3BMSC的獲取和培養(yǎng)從實驗動物髂后上嵴處抽取骨髓。全骨髓培養(yǎng)。用硬膜外穿刺針刺入髂骨1～1.5mm，以含有100μ／ml肝素0.2ml的5ml注射器，迅速抽取骨髓2ml，所獲骨髓種植于6孔細(xì)胞培養(yǎng)板內(nèi)，每孔種植1ml，每只實驗動物種植2個孔。加入含20%胎牛血清DMEM液5ml，反復(fù)吹打，再加入地塞米松10-8mmol／L，微型震蕩器上震蕩2min，然后放入細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)。培養(yǎng)箱溫度37℃，含5%CO2，100%飽和濕度。5d后換液，沖去紅細(xì)胞，可見多個成纖維細(xì)胞克隆貼壁生長。待細(xì)胞長滿培養(yǎng)孔面積一半時，用0.25%胰蛋白酶消化，原
7、孔傳代，2～3d可見細(xì)胞長滿培養(yǎng)孔，將其按1×106／cm2密度傳入細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)。待第3代細(xì)胞長滿后，消化細(xì)胞并將細(xì)胞配成2×106／ml細(xì)胞懸液，復(fù)合于3cm×4cm的明膠海綿上。每塊明膠海綿含細(xì)胞懸液50μl，共10萬個細(xì)胞，在細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育4h備用。1.4動物造模及細(xì)胞移植所有動物雙側(cè)股骨頭均參加實驗。取俯臥位。硫賁妥鈉40mg/kg腹腔麻醉。后側(cè)入路，暴露股骨頭后不脫位。用液氮棉球連續(xù)冷凍3min。自然復(fù)溫后，用直徑為3.5mm鉆頭從股骨頸內(nèi)后側(cè)向股骨頭內(nèi)鉆入4mm，到達(dá)關(guān)節(jié)軟骨下。A組鉆孔后，植入明膠海
