兔缺血心肌中移植自體骨髓基質(zhì)干細(xì)胞的治療作用

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1、兔缺血心肌中移植自體骨髓基質(zhì)干細(xì)胞的治療作用【關(guān)鍵詞】缺血心肌Autologousmarroalcelltransplantationforimprovingrabbitcardiacperformanceaftermyocardialinfarction  【Abstract】AIM:Totestthehypothesisthatmarroalcells(MSCs),plantedintoselfmyocardium,canundergomilieudependentdifferentiation,expresscardiomyogenicphenotypesanden

2、hanceangiogenesisandcardiacfunctionofischemicheartsinvivo.METHODS:Acutemyocardialinfarctionodeoxyuridine)invitroinistratedintramyocardiallyintotheinfarctareaofthesamedonorrabbits.RESULTS:After4onstratedmyogenicdifferentiationberofvessels[(22.9±6.6)/HPvs(19.0±5.9)/HP,P<0.05]inmyocardial

3、ischemiaarea,paredplantationresultedinmarkedlyimprovedleftventricularcontractility[LVSP:(15.08±0.84)kPavs(13.26±0.68)kPa;LVEDP:(1.53±0.28)kPavs(19.03±0.41)kPa;+dp/dtmax:(+615.77±48.69)kPa/svs(+435.75±58.25)kPa/s;-dp/dtmax:(-401.17±46.23)kPa/svs(-338.25±50.72)kPa/s,P<0.05].CONCLUSION:Au

4、tologousMSCstransplantationcaneffectivelytreatmyocardialischemiamunerejection.  【Keyarroalcell;ischemicmyocardium;transplantation  【摘要】目的:驗證骨髓基質(zhì)干細(xì)胞(MSC)移植到缺血心肌中后是否在心肌的微環(huán)境中可以向心肌細(xì)胞分化,提高心功能.方法:采用自體MSC體外培養(yǎng)擴增移植.在通過結(jié)扎冠狀動脈造成急性心肌缺血后,被5溴2脫氧尿苷(BrdU)標(biāo)記后的MSC移植到自體的缺血心肌中.結(jié)果:移植4ax:(+615.77±48.69)kPa/svs

5、(+435.75±58.25)kPa/s;-dp/dtmax:(-401.17±46.23)kPa/svs(-338.25±50.72)kPa/s,P<0.05].結(jié)論:MSC移植可治療心肌缺血,并且沒有免疫排斥反應(yīng).  【關(guān)鍵詞】骨髓基質(zhì)干細(xì)胞;缺血心?。灰浦病  ?引言  在離體實驗中發(fā)現(xiàn)骨髓基質(zhì)干細(xì)胞(marroalcells,MSC)可以被5雜氮胞苷誘導(dǎo)為心肌細(xì)胞[1].由于自體MSC容易被獲取,而且具有較強的增殖能力,自體MSC應(yīng)用于臨床可以不再需要胚胎組織和應(yīng)用免疫抑制劑,因此較其他來源的供體細(xì)胞更有優(yōu)勢.為了同未來的臨床實踐相吻合,我們應(yīng)用自體MSC移

6、植入缺血心肌中,而沒有用被誘導(dǎo)后的MSC.目的是著重探討移植后MSC特異性蛋白的變化及其對與心功能的影響.  1材料和方法  1.1材料  取健康雄性的新西蘭兔(2.5~3.5)kg(浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院動物實驗中心),經(jīng)耳緣iv戊巴比妥納(30mg/kg)麻醉,用骨髓穿刺針無菌抽取骨髓,Percoll細(xì)胞分離液分離細(xì)胞,接種于培養(yǎng)瓶中,培養(yǎng)液用含200mL/L胎牛血清的完全LDMEM(2mmol/LL谷氨酰胺,1×104U/L青霉素和25μg/L兩性霉素),37℃,50mL/LCO2孵箱靜置培養(yǎng).抽取的每個動物的骨髓基質(zhì)干細(xì)胞及每個動物均進行編號.取傳第2代的MSC于移植前2

7、4h用BrdU(5溴2脫氧尿苷,Sigma)標(biāo)記骨髓基質(zhì)干細(xì)胞,10μLBrdU貯液(BrdU,50mg;二甲基亞砜0.8mL;三蒸水1.2mL)加入5mL完全培養(yǎng)液中.移植前用PBS調(diào)整細(xì)胞密度為1×1011/L.標(biāo)記細(xì)胞的檢測(免疫組化):先加2mol/L鹽酸(室溫,50min),正常山羊血清封閉10min,不洗,甩掉,加含3g/LTritonX100的1∶40鼠抗BrdumAb(抗體稀釋液稀釋),加入生物素標(biāo)記的羊抗鼠抗體(室溫80min),加入SABC復(fù)合物室溫50min,DAB顯色,脫水、透明、封片.  1.2方法 

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