骨髓基質(zhì)干細(xì)胞移植治療兔股骨頭缺血性壞死的實(shí)驗(yàn)研究

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1、骨髓基質(zhì)干細(xì)胞移植治療兔股骨頭缺血性壞死的實(shí)驗(yàn)研究作者:劉長安,王江泳,張衛(wèi)平,步建立【摘要】[目的]探討骨髓基質(zhì)干細(xì)胞移植對(duì)股骨頭缺血性壞死的治療作用和修復(fù)機(jī)理,為臨床應(yīng)用提供依據(jù)。[方法]24只新西蘭大白兔隨機(jī)分為兩組,A組為髓芯減壓組,B組為干細(xì)胞移植組。采用液氮冷凍法造模。A組鉆孔后植入空白明膠海綿,B組鉆孔后植入復(fù)合有骨髓基質(zhì)干細(xì)胞的明膠海綿。術(shù)后每組分別于2、4、6、8周各處死3只動(dòng)物,做X線及組織學(xué)檢查。[結(jié)果](1)X線結(jié)果:2周時(shí)A、B組鉆孔區(qū)均呈低密度,4周時(shí)A組鉆孔邊緣密度增加,B組整個(gè)鉆孔區(qū)密度增加,8周時(shí)A組鉆孔區(qū)均呈低密

2、度,邊緣形成硬化線,B組鉆孔區(qū)形成骨小梁結(jié)構(gòu)。(2)組織學(xué)結(jié)果:2周時(shí)A組鉆孔區(qū)出現(xiàn)少許炎癥細(xì)胞,邊緣出現(xiàn)較多成骨細(xì)胞并有骨組織形成,至8周時(shí),鉆孔區(qū)內(nèi)形成骨髓組織,只在邊緣形成骨小梁結(jié)構(gòu)。2周時(shí)B組鉆孔區(qū)有大量的成骨細(xì)胞,邊緣有較多骨組織形成,4周時(shí)鉆孔區(qū)內(nèi)充滿新生骨小梁結(jié)構(gòu),8周時(shí)鉆孔區(qū)內(nèi)骨小梁成熟,小梁有骨髓組織填充。[結(jié)論]骨髓基質(zhì)干細(xì)胞對(duì)兔股骨頭缺血性壞死有良好的修復(fù)作用?!娟P(guān)鍵詞】股骨頭缺血性壞死;動(dòng)物模型;骨髓基質(zhì)干細(xì)胞;細(xì)胞培養(yǎng);移植  Experimentalstudyontreatmentoffemoralheadnecrosi

3、sinrabbitarroalcells∥  Abstract:[Objective]Toinvestigatetherepairingeffectandmechanismfortreatmentoffemoralheadnecrosisontransplantationofbonemarroalcells.[Method]Tly,GroupAascoredepressiongroupandGroupBasBonemarroalcellsautograftgroup.Animalfemoralheadneorosismodeladebyfreezi

4、ngmethodplantedarroalcells.Threeanimalsineverygroupicroscopeexamination.[Result](1)Radiographexamination:At2ages.At4edaroundthedrilledholesinGroupAandtrabeculaeappearedinthedrilledholesingroupB.(2)Microscopeexamination:ingroupA,at2atorycellsappearedintheholesanyosteoblastsando

5、stoidappearedaroundthedrilledholes.At8arroedinthedrilledholesingroupB,at2ountofosteoblastsinthedrilledholesandsomeostoidformedaroundthcdrilledholes.At4aturedarroarroalcellsautograftingmaybeaneffectiveoralheadnecrosis.  Keyoralheadnecrosis;animalmodel;bonemarroalcell;cellcultur

6、e;transplantation  近年來一些研究發(fā)現(xiàn)骨髓基質(zhì)干細(xì)胞(bonemarroalcell,BMSC)減少與股骨頭缺血性壞死有密切關(guān)系。有報(bào)道用自體紅骨髓移植治療股骨頭缺血性壞死取得了較好的療效。認(rèn)為移植于股骨頭內(nèi)BMSC的數(shù)目決定著治療的成敗。本實(shí)驗(yàn)用移植體外增殖的BMSC治療兔股骨頭缺血性壞死,探討B(tài)MSC在早期股骨頭缺血性壞死治療中的作用及修復(fù)機(jī)理,為臨床提供理論依據(jù)和合理的治療方法?! ?材料與方法  1.1動(dòng)物分組  成年新西蘭大白兔24只,雌雄不限,年齡4~5個(gè)月,體重2.5~3.5kg。由白求恩國際和平醫(yī)院動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室提供。

7、隨機(jī)分為A、B2組,每組12只。A組為髓芯減壓組,B組為細(xì)胞移植組?! ?.2主要試劑  地塞米松磷酸鈉注射液,浙江仙琚制藥股份有限公司,國藥準(zhǔn)字:H330220827,批號(hào):041105。DMEM細(xì)胞培養(yǎng)液,GIBCO公司。胎牛血清,杭州四季青公司。  1.3BMSC的獲取和培養(yǎng)  從實(shí)驗(yàn)動(dòng)物髂后上嵴處抽取骨髓。全骨髓培養(yǎng)。用硬膜外穿刺針刺入髂骨1~1.5mm,以含有100μ/ml肝素0.2ml的5ml注射器,迅速抽取骨髓2ml,所獲骨髓種植于6孔細(xì)胞培養(yǎng)板內(nèi),每孔種植1ml,每只實(shí)驗(yàn)動(dòng)物種植2個(gè)孔。加入含20%胎牛血清DMEM液5ml,反復(fù)吹打

8、,再加入地塞米松10-8mmol/L,微型震蕩器上震蕩2min,然后放入細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)。培養(yǎng)箱溫度37℃,含5%CO2,

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