激光掃描共聚焦顯微鏡 zeiss 激光掃描共聚焦顯微鏡 操作手冊(cè)

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資源描述:

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1、激光掃描共聚焦顯微鏡Zeiss激光掃描共聚焦顯微鏡操作手冊(cè)Zeiss激光掃描共聚焦顯微鏡操作手冊(cè)目錄:1系統(tǒng)的組成系統(tǒng)組成及光路示意圖實(shí)物照片說(shuō)明2系統(tǒng)的使用2.1開(kāi)機(jī)順序2.2軟件的快速使用說(shuō)明2.3顯微鏡的觸摸屏控制2.4關(guān)機(jī)順序3系統(tǒng)的維護(hù)110系統(tǒng)的組成激光掃描共聚焦顯微鏡系統(tǒng)主要由:電動(dòng)熒光顯微鏡、掃描檢測(cè)單元、激光器、電腦工作站及各相關(guān)附件組成。系統(tǒng)組成及光路示意圖:電腦工作站激光器電動(dòng)熒光顯微鏡掃描檢測(cè)單元實(shí)物照片說(shuō)明:電動(dòng)熒光顯微鏡掃描檢測(cè)單元CO2培養(yǎng)系統(tǒng)控制器激光器電腦工作站2系統(tǒng)的使用2.1開(kāi)機(jī)順序(1)打開(kāi)穩(wěn)

2、壓電源(綠色按鈕)等待2分鐘(電壓穩(wěn)定)后,再開(kāi)其它開(kāi)關(guān)(2)主開(kāi)關(guān)[MAINSWITCH]“ON”電腦系統(tǒng)[SYSTEMS/PC]“ON”掃描硬件系統(tǒng)[COMPONENTS]“ON”(3)打開(kāi)[電動(dòng)顯微鏡開(kāi)關(guān)]打開(kāi)[熒光燈開(kāi)關(guān)](注:具有510檔光強(qiáng)調(diào)節(jié)旋鈕)(4)Ar離子激光器主開(kāi)關(guān)“ON”順時(shí)針旋轉(zhuǎn)鑰匙至“—”預(yù)熱等待約15分鐘,將激光器[扳鈕]由“Standby”扳至“Laserrun”狀態(tài),即可正常使用(5)打開(kāi)[電腦開(kāi)關(guān)],進(jìn)入操作系統(tǒng)注:鍵盤(pán)上也具有[電腦開(kāi)關(guān)]2.2軟件的快速使用說(shuō)明(1)電腦開(kāi)機(jī)進(jìn)入操作系統(tǒng)界面后,

3、雙擊桌面共聚焦軟件ZEN圖標(biāo)(2)進(jìn)入ZEN界面,彈出對(duì)話框:“StartSystem”——初始化整個(gè)系統(tǒng),用于激光掃描取圖、分析等?!癐mageProcessing”——不啟動(dòng)共聚焦掃描硬件,用于已存圖像數(shù)據(jù)的處理、分析。(3)軟件界面:1功能界面切換:掃描取圖(Acquisition)、圖像處理(Processing)、維護(hù)(Maintain)(注:Maintain僅供Zeiss專(zhuān)業(yè)工程師使用)2動(dòng)作按鈕;3工具組(多維掃描控制);4工具詳細(xì)界面;5狀態(tài)欄;6視窗切換按鈕;7圖像切換按鈕;8圖像瀏覽/預(yù)掃描窗口;9文檔瀏覽/處理

4、區(qū)域;1010視窗中圖像處理模塊動(dòng)作按鈕:Single——掃描單張圖片、并在圖像預(yù)覽窗口顯示。Start——開(kāi)始掃描單張圖片或一個(gè)實(shí)驗(yàn)流程(1組圖片,如XYZ、XYT等)。Stop——暫停/結(jié)束掃描。New——建立一個(gè)新圖像掃描窗口/文檔。激光連接狀況檢查眼睛觀察/相機(jī)/共聚焦LSM光路切換(ZEN軟件界面右上角):Ocular——通過(guò)觀察筒用眼睛觀察。(激光安全保護(hù)裝置自動(dòng)阻斷激光、保護(hù)眼睛。)Camera——光路切換至相機(jī)。LSM——共聚焦掃描成像光路。顯微鏡設(shè)置:“Ocular”——>“LightPath”——>點(diǎn)擊物鏡圖標(biāo),

5、選擇物鏡——>樣品聚焦。透射光控制(TransmittedLightControl)反射光光閘控制(ReflectedLight10Shutter)熒光激發(fā)塊選擇(Reflector)共聚焦LSM掃描設(shè)置點(diǎn)擊“LSM”(ZEN軟件界面右上角),系統(tǒng)切換至共聚焦掃描光路:光路設(shè)置:SmartSetup——自動(dòng)預(yù)設(shè)光路選取“熒光探針”、“顏色”、掃描方法,應(yīng)用“Apply”。(注:Fastest為最快速掃描,多條激光譜線同時(shí)掃描。Bestsignal為最佳信號(hào)掃描,多條激光譜線順序掃描。Bestcompromise為兼顧速度與信號(hào)的折中

6、式掃描。)掃描圖像參數(shù)設(shè)置:每個(gè)通道的精細(xì)調(diào)節(jié):包括:(1)Pinhole的調(diào)節(jié)(一般設(shè)為1AU。該值越大,則信號(hào)越強(qiáng),但共聚焦圖像效果會(huì)降低。原則上,在保證圖像質(zhì)量的前提下,該值越接近于1AU越好);(2)Master10Gain的調(diào)節(jié)(增大則信號(hào)和噪音都增強(qiáng),減小則信號(hào)和噪音均減小。原則上,在保證圖像質(zhì)量的前提下,Gain值越小越好);(3)DigitalOffset的調(diào)節(jié)(可扣除背景噪音,但標(biāo)本信號(hào)也有一定程度的扣除。原則上,在保證圖像質(zhì)量的前提下,DigitalOffset值越接近于0越好);(4)DigitalGain的調(diào)

7、節(jié)(增大則信號(hào)和噪音都增強(qiáng),減小則信號(hào)和噪音均減小。原則上,在保證圖像質(zhì)量的前提下,Gain值越接近于1.0~1.2越好);(5)另外,對(duì)于每個(gè)通道,需要靈活調(diào)節(jié)激光的強(qiáng)度(激光強(qiáng)度越高,則信號(hào)越強(qiáng),但噪音也相應(yīng)增強(qiáng),同時(shí)標(biāo)本更容易被漂白或淬滅。原則上,在保證圖像質(zhì)量的前提下,激光強(qiáng)度越低越好。)選擇可連續(xù)掃描、一邊預(yù)覽圖像效果、一邊精細(xì)調(diào)節(jié)各個(gè)通道的掃描參數(shù)。如果預(yù)覽圖像的效果可以,則先“Stop”,再點(diǎn)擊“Single”或“Start”即可完成圖像的掃描。圖像的保存:三種方法:(1)“File”菜單下,“Save”或者“Save

8、10AS”。(2)點(diǎn)擊右下角按鈕。(3)點(diǎn)擊工具欄按鈕。(如圖所示)另外,通過(guò)“File”菜單下的“Export”,也可將圖像以其它格式輸出。2.3顯微鏡的觸摸屏控制顯微鏡可由TFT液晶觸摸屏進(jìn)行控制:由觸摸屏“Home/主頁(yè)”進(jìn)入“

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