激光掃描共聚焦顯微鏡操作手冊(cè).pdf

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1、北京大學(xué)化學(xué)學(xué)院中級(jí)儀器實(shí)驗(yàn)室A1R操作說(shuō)明書激光掃描共聚焦顯微鏡（A1R-si）操作指南北京大學(xué)化學(xué)學(xué)院中級(jí)儀器實(shí)驗(yàn)室A1R操作說(shuō)明書目錄?第一章：Ti-E顯微鏡操作2-7?顯微鏡光路調(diào)節(jié)和照明注意事項(xiàng)6?Ti-E物鏡，DIC插片，DIC棱鏡對(duì)照表7?第二章：共聚焦開關(guān)機(jī)8-10?第三章：共聚焦圖像拍攝11-38?NIS-ElementsC軟件開啟和操作界面簡(jiǎn)介11-15?NIS-ElementsC的實(shí)時(shí)圖像獲得基本操作16-23?圖像拍攝24-27?探測(cè)模式（標(biāo)準(zhǔn)探測(cè)器）設(shè)置28-38?第四章:圖像的保存和查看39-42?第五章：圖像分析43-46?附件一、多維拍攝功能和操作方

2、式介紹47-51?附件二：圖像格式批量轉(zhuǎn)換操作52-53-1-北京大學(xué)化學(xué)學(xué)院中級(jí)儀器實(shí)驗(yàn)室A1R操作說(shuō)明書第一章Ti-E顯微鏡操作指南（一）認(rèn)識(shí)顯微鏡各個(gè)部件（1）濾光片：包括D---毛玻璃；NCB---色溫（8）濾色塊轉(zhuǎn)盤（包括DIC檢偏器）；平衡片；ND---減光片；“GIF”---綠色濾（9）手動(dòng)熒光光閘；光片和用于PFS的紅外濾光片；（10）電動(dòng)焦距調(diào)節(jié)旋鈕；（2）視場(chǎng)光闌；（11）ND減光片；（3）聚光器升降旋鈕；（12）遙控器；（4）起偏器（DIC用）；（13）透射光電源；（5）聚光器對(duì)中旋鈕；（14）汞燈熒光光源；（6）孔徑光闌；（15）PFS控制器（7）聚光器模塊

3、（包括明視場(chǎng)，DIC）；（16）HUB控制器-2-北京大學(xué)化學(xué)學(xué)院中級(jí)儀器實(shí)驗(yàn)室A1R操作說(shuō)明書遙控器示意圖(根據(jù)具體配置有些圖標(biāo)可能不顯示)1）物鏡切換按鈕；2）濾光塊，DIC檢偏器切換按鈕；3）DIC檢偏器快速切換按鈕；4）光路端口切換按鈕；5）PFS開關(guān)控制按鈕；6）聚光器轉(zhuǎn)盤切換按鈕；7）透射光源控制按鈕*。*請(qǐng)注意：CNTL按鈕燈亮，則可以通過(guò)遙控器或電腦控制軟件來(lái)調(diào)節(jié)透射光源強(qiáng)度，此時(shí)顯微鏡底座左側(cè)光源開關(guān)和調(diào)節(jié)旋鈕鎖定；CNTL功能關(guān)閉，可以通過(guò)顯微鏡底座開關(guān)和旋鈕來(lái)控制透射光源。3北京大學(xué)化學(xué)學(xué)院中級(jí)儀器實(shí)驗(yàn)室A1R操作說(shuō)明書前面板示意圖1）狀態(tài)顯示屏；2）PFS開

4、關(guān)按鈕和PFS聚焦?fàn)顟B(tài)指示燈（需要選購(gòu)PFS部件）；3）光路端口切換按鈕；4）中間變倍旋紐；側(cè)面板示意圖1）調(diào)焦旋鈕2）粗微調(diào)切換按鈕3）物鏡切換按鈕；4）濾光塊，DIC檢偏器切換按鈕5）透射光光源開關(guān)（當(dāng)遙控器透射光源控制按鈕打開時(shí)，此按鈕無(wú)效）；6）透射光量度調(diào)節(jié)旋鈕（當(dāng)遙控器透射光源控制按鈕打開時(shí)，此旋按鈕無(wú)效）；7）物鏡復(fù)位；8）物鏡向下移動(dòng)2毫米；注意：在使用顯微鏡之前，要把主機(jī)底座右后端的黑色HUB控制器（顯微鏡示意圖15位置）右側(cè)的電源開關(guān)打開。4北京大學(xué)化學(xué)學(xué)院中級(jí)儀器實(shí)驗(yàn)室A1R操作說(shuō)明書（二）明視場(chǎng)透射光操作要點(diǎn)1）打開電源開關(guān)，并打開顯微鏡透射光鹵素?zé)綦娫撮_關(guān)

5、；2）把濾色塊移到空位；3）把起偏器，檢偏器移出光路；4）把聚光器轉(zhuǎn)盤切換到A狀態(tài)；5）檢查柯勒照明（柯勒照明調(diào)節(jié)方法參看附錄1）；6）檢查出光端口。（三）微分干涉(DIC)操作要點(diǎn)1）按照明視場(chǎng)透射光觀察方法調(diào)節(jié)好顯微鏡；2）把起偏器，檢偏器移入光路；3）按照相對(duì)應(yīng)物鏡將聚光器鏡轉(zhuǎn)盤轉(zhuǎn)到相應(yīng)N1/N2位置（請(qǐng)參見另外所附對(duì)照表）；4）檢查出光端口；5）旋轉(zhuǎn)起偏器，選擇最佳顯示效果。（四）熒光觀察操作要點(diǎn)1）打開熒光電源稍待片刻至光源指示燈不閃；（打開約10min穩(wěn)定，關(guān)閉需要超過(guò)15min后才可以再次啟動(dòng)）2）確認(rèn)透射光開關(guān)處于關(guān)閉狀態(tài)；3）檢查出光端口；4）選擇合適的濾色塊；5

6、）打開光閘（汞燈面板的shutter旋鈕），調(diào)節(jié)熒光亮度（汞燈面板的ND旋鈕），進(jìn)行觀察；6）不觀察時(shí)，把光閘關(guān)掉，以避免熒光淬滅。注意：該系統(tǒng)配置透射和熒光光閘，在做相應(yīng)操作時(shí)，應(yīng)將對(duì)應(yīng)光閘打開。光閘開關(guān)可在遙控器上設(shè)定。落射光照明光閘按鈕透射光光閘按鈕汞燈光閘按鈕（電動(dòng)型號(hào)）5北京大學(xué)化學(xué)學(xué)院中級(jí)儀器實(shí)驗(yàn)室A1R操作說(shuō)明書顯微鏡光路調(diào)節(jié)和照明注意事項(xiàng)（一）柯勒照明的調(diào)節(jié)方法1）選擇10X物鏡；2）調(diào)焦，使標(biāo)本清晰成像；3）縮小視場(chǎng)光闌（顯微鏡視圖2位置）；4）上下調(diào)節(jié)聚光器（顯微鏡視圖3位置），使視場(chǎng)光闌邊緣清晰；5）調(diào)節(jié)聚光器對(duì)中旋鈕，使其居中；6）放大視場(chǎng)光闌，使其剛剛外切

7、于視野。（二）長(zhǎng)壽命汞燈電源的注意事項(xiàng)1）電源打開以后，大約10分鐘左右光源達(dá)到穩(wěn)定狀態(tài)；2）電源關(guān)閉以后，至少要等10分鐘才能重新打開。（三）物鏡蓋玻片矯正環(huán)的調(diào)節(jié)方法1）調(diào)焦，使圖像相對(duì)最清楚；2）把矯正環(huán)向一個(gè)方向轉(zhuǎn)動(dòng)一定角度，此時(shí)圖像變模糊，調(diào)焦，使圖像相對(duì)最清楚；3）判斷此時(shí)的圖像質(zhì)量是否有所改善。如有改善，則按照該方向再旋轉(zhuǎn)一定角度；如質(zhì)量下降，則反方向旋轉(zhuǎn)；4）重復(fù)2）和3）直到圖像質(zhì)量改善之后又有所下降；5）反方向旋轉(zhuǎn)，回到倒數(shù)第二次的位置即可。6北京